CONTEO MICROALGAS CAMARA NEUBAUERHaga clic para modificar el estilo de subttulo del patrn

JESUS GONZALEZ JIMENEZ OCEANOLOGIA 8 SEMESTRE MICROALGAS Y CULTIVOS AUXILIARES 3/11/12

Cmara de neubauer.cmara cuentaglbulos hemocitmetro. o

Consiste en una placa gruesa de cristal con forma de porta, cuya porcin central est dividida en 3 ejes perpendiculares al eje longitudinal de la cmara. De ellas, las dos laterales se hallan sobreelevadas 0.1 mm con respecto a la central, y en esta ltima hay grabado un retculo cuadrangular ( cmara simple). La banda central puede estar, a su vez, subdividida en 2 semi bandas idnticas y separadas por un surco paralelo al eje longitudinal de la cmara ( cmaras dobles). 3/11/12

No todas las cmaras de recuento son iguales, la ms utilizada en hematologa es la cmara de neubauer. Se trata de una cmara doble, cuyos retculos ( 2 al tratarse de una cmara doble) se denominan retculos de neubauer. La siguiente figura muestra las dimensiones de dicho retculo:

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Si contamos las cuatro reas sombreada (L) observando un total de x clulas entre las cuatro reas, la concentracin en la suspensin celular ser : concentracin en la suspensin (clulas / mL) = 10000 (x/4)

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En la imagen puedes observar el aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una cuadrcula de 16 pequeos cuadrados de 0.25 milmetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases.

Conteo de microalgas Para alimentar se realiz el conteo de microalgas durante todo el cultivo con un hematocitmetro de 0.1 de profundidad y que contiene dos cmaras con un retculo de 9 cuadros de 1 mm por lado. El volumen de cada una de las cmaras es de 0.9 microlitros. Para el conteo se puede usar los objetivos 20X, y 40X del microscopio compuesto. El procedimiento para poder realizar el conteo y conocer el nmero de clulas por mililitro es: 1. - Agitar el cultivo y tomar una muestra aproximada de 1 ml en un tubo de ensayo. Si es muy densa se recomienda aadir una cantidad conocida de agua salada y fijar con lugol (3 gotas). Si la densidad es baja se toma una muestra cualquiera (6ml) y solo se fija con lugol. 2. - Mezclar y tomar una submuestra del tubo con una pipeta pasteur que sea suficiente para llenar las dos cmaras. 3/11/12 3. - Se coloca el cubreobjetos sobre las cmaras y con cuidado se agrega

Ejemplo: FORMULA N * D * C * 10,000 = clulas/mal. Donde: N= Nmero promedio de clulas contadas en las 2 cmaras. D= Dilucin de la muestra

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