clase teórica biopsia

Biopsias

Cátedra de Anatomía Patológica. Facultad de Medicina. U. N. T.

OBJETIVOS Definir biopsiaDefinir biopsia Señalar los aspectos generales, Señalar los aspectos generales,

características primordiales e importancia características primordiales e importancia

de una biopsiade una biopsia Describir las principales característicasDescribir las principales característicasde de

los diferentes tipos de biopsiaslos diferentes tipos de biopsias Manejar el tejido bajo las normas Manejar el tejido bajo las normas

adecuadas para su fijación, rotulación y adecuadas para su fijación, rotulación y

envío.envío. Interpretar el informe anatomo patológico Interpretar el informe anatomo patológico

y su significado clínico terapéutico.y su significado clínico terapéutico.

MÉTODOS DE LA ANATOMÍA PATOLÓGICA Patología Postmortem. Patología Postmortem. AutopsiasAutopsias

Patología Quirúrgica. Patología Quirúrgica. BiopsiasBiopsias

CitopatologíaCitopatología

ExperimentalExperimental

Otros Otros

BIOPSIA

““Método de la anatomía Método de la anatomía

patológica que estudia los patológica que estudia los

tejidos obtenidos de pacientes tejidos obtenidos de pacientes

vivos con fines diagnosticos, vivos con fines diagnosticos,

pronósticos y de seguimiento”pronósticos y de seguimiento”

TIPOS DE BIOPSIA

De órgano Total Parcial

Intraoperatoria Punción Biopsia

Incisional

Excisional

Dirigidas

No dirigidas

TIPOS DE BIOPSIA

DirigidaDirigida

Endoscopica Endoscopica

Colposcópica Colposcópica

DermatoscópicaDermatoscópica

EstereotaxicaEstereotaxica

No DirigidaNo Dirigida

A ciegasA ciegas

BIOPSIA INCISIONAL

Cuando toma parte de la lesión.Cuando toma parte de la lesión.

Ej: punch de en lesion extensa de pielEj: punch de en lesion extensa de piel

biopsia endoscópica en tumor biopsia endoscópica en tumor

>2cm>2cm

BIOPSIA ESCISIONAL

Cuando en la muestra se extrae la Cuando en la muestra se extrae la lesión en su totalidad. lesión en su totalidad.

Ej: losange de pielEj: losange de piel

polipectomíapolipectomía

BIOPSIA ESCISIONAL

BIOPSIA DE ÓRGANO

Consiste en el estudio de materiales

obtenidos durante un acto quirúrgico,

generalmente el material está representado

por todo o parte de un órgano. El

procesamiento se realiza en base a un

protocolo pre establecido que indica pautas

que van desde la apertura de la pieza hasta

obtención de muestras representativas.

ÓRGANO TOTAL

ÓRGANO PARCIAL

BIOPSIAS DIRIGIDAS

Biopsias endoscópicas:Biopsias endoscópicas: es un tipo de es un tipo de

biopsia dirigida que permite la obtención biopsia dirigida que permite la obtención

del material de órganos huecos ( tubo del material de órganos huecos ( tubo

digestivo, árbol respiratorio, vias digestivo, árbol respiratorio, vias

urinarias) o cavidades (pleural, urinarias) o cavidades (pleural,

pericardica, abdominal) pericardica, abdominal)

BIOPSIAS DIRIGIDAS

Biopsias colposcopicas : se utilizan en

lesiones precursoras de cuello uterino.

BIOPSIAS DIRIGIDAS

Biopsias estereotáxicas: Biopsias estereotáxicas: con la

ayuda de métodos imagenológicos se

localiza tridimensionalmente la lesión

y se obtiene tejido. Ej mama y SNC

BIOPSIA DIRIGIDA ENDOSCÓPICA

BIOPSIA INTRAOPERATORIA

Es el estudio del material obtenido Es el estudio del material obtenido

durante el acto operatorio para durante el acto operatorio para

determinar la naturaleza de la lesión determinar la naturaleza de la lesión

y emitir un diagnóstico que permita y emitir un diagnóstico que permita

al cirujano adoptar una conducta al cirujano adoptar una conducta

quirúrgica adecuada.quirúrgica adecuada.


Requiere de instrumental Requiere de instrumental

(criostato) y ambiente adecuados.(criostato) y ambiente adecuados.

Se utiliza el tejido en fresco.Se utiliza el tejido en fresco.

Fijador es el frío.Fijador es el frío.

BIOPSIA INTRAOPERATORIA: CONTROL DE

MÁRGENES

BIOPSIA DIFERIDA CONTROL DE MÁRGENES

BIOPSIA POR PUNCIÓN Consiste en la obtención de un Consiste en la obtención de un

cilindro de tejido del órgano afectado, cilindro de tejido del órgano afectado, utilizando agujas especiales de utilizando agujas especiales de grueso calibre 0.2cm de diametro.grueso calibre 0.2cm de diametro.

Se aplica para el diagnóstico de Se aplica para el diagnóstico de patologías que afectan a órganos patologías que afectan a órganos parenquimatosos en forma difusa parenquimatosos en forma difusa (cirrosis hepatica, glomerulopatias) o (cirrosis hepatica, glomerulopatias) o localizada solida (tumor) localizada solida (tumor)

El material obtenido se incluye El material obtenido se incluye totalmente y se procesa en forma totalmente y se procesa en forma seriada. seriada.

BIOPSIA POR PUNCIÓNPuede realizarse : Puede realizarse :

A ciegas:A ciegas: sobre el sitio donde se sobre el sitio donde se sospecha que se encuentra la lesión.sospecha que se encuentra la lesión.

Dirigida:Dirigida: mediante aparatos que mediante aparatos que permiten visualizar el sitio de permiten visualizar el sitio de punción (ecografía, TAC) Ej: punción punción (ecografía, TAC) Ej: punción biopsia de mama con mammotomebiopsia de mama con mammotome..

BIOPSIA POR PUNCIÓN

BIOPSIA POR PUNCIÓN DIRIGIDA

BIOPSIA POR PUNCIÓN

PASOS A SEGUIR

Recepción del materialRecepción del material:: todo el material todo el material ingresado deberá ir acompañado de los datos ingresado deberá ir acompañado de los datos personales del paciente, breve resumen de la personales del paciente, breve resumen de la Historia clínica, tipo y características, motivo Historia clínica, tipo y características, motivo del estudio solicitado y diagnóstico del estudio solicitado y diagnóstico presuntivo.presuntivo.

FijaciónFijación:: permite preservar la estructura y permite preservar la estructura y funcion de los tejidos e impedir la autolisis.funcion de los tejidos e impedir la autolisis.

Consiste en sumergir el material en una Consiste en sumergir el material en una solución de formol al 10 % en recipiente de solución de formol al 10 % en recipiente de boca ancha.boca ancha.

PASOS A SEGUIR

Macroscopía:Macroscopía: consiste en la inspección del consiste en la inspección del material y su descripción, lo más semejante a material y su descripción, lo más semejante a la realidad, indicando los siguientes aspectos:la realidad, indicando los siguientes aspectos:

ÓRGANOS PARENQUIMATOSOSÓRGANOS PARENQUIMATOSOS Tamaño, color, forma, superficie externaTamaño, color, forma, superficie externa PesoPeso ConsistenciaConsistencia HallazgosHallazgos Superficie de corteSuperficie de corte

PASOS A SEGUIR

ÓRGANOS HUECOSÓRGANOS HUECOS Tamaño, forma, serosaTamaño, forma, serosa PesoPeso Pared (espesor, consistencia, hallazgos)Pared (espesor, consistencia, hallazgos) Mucosa (color, pliegues, aspecto, hallazgos)Mucosa (color, pliegues, aspecto, hallazgos) LuzLuz

PASOS A SEGUIR

Existen protocolos de descripción Existen protocolos de descripción macroscópica tipo.macroscópica tipo.

Se complementa con la selección de Se complementa con la selección de muestras representativas, lo cual muestras representativas, lo cual también está pre-establecido en los también está pre-establecido en los protocolosprotocolos

PASOS A SEGUIR

Procesamiento histológico:Procesamiento histológico: Los Los pasos a seguir son: pasos a seguir son:

– Deshidratación: pases sucesivos en Deshidratación: pases sucesivos en alcohol 96º, acetato (2) y Xilol (2). alcohol 96º, acetato (2) y Xilol (2). Permite extraer el agua de los tejidos.Permite extraer el agua de los tejidos.

– Baño e inclusión en parafinaBaño e inclusión en parafina– CorteCorte– Coloración Coloración

PASOS A SEGUIR

Diagnóstico:Diagnóstico: en algunos casos se utilizan en algunos casos se utilizan

protocolos microscópicos o breves protocolos microscópicos o breves

descripciones microscópicas seguidas por uno descripciones microscópicas seguidas por uno

o más diagnósticos que incluirán datos de o más diagnósticos que incluirán datos de

valor pronóstico y de orientación terapéutica.valor pronóstico y de orientación terapéutica.

INFORME ANATOMOPATOLÓGICO

Debe reunir las siguientes condiciones:Debe reunir las siguientes condiciones:

Datos del pacienteDatos del paciente Descripción macro y microscópica detallada Descripción macro y microscópica detallada

pero concretapero concreta ProtocoloProtocolo Diagnóstico jerarquizadoDiagnóstico jerarquizado Debe concretarse a los aspectos relacionados Debe concretarse a los aspectos relacionados

con el pronóstico y la terapéutica.con el pronóstico y la terapéutica.

BIBLIOGRAFÍA Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El

Ateneo. Bs As .1992Ateneo. Bs As .1992 Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de

Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989.Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989. Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S..

Patología estructural y funcional. 4º Ed. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 19901990

““Guía de Métodos”. Sánchez Segura, M.; Guía de Métodos”. Sánchez Segura, M.; Nieman Y.;Cátedra de Anatomía Nieman Y.;Cátedra de Anatomía Patológica, Facultad de Medicina, Patológica, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Tucumán, Universidad Nacional de Tucumán, 2001.2001.

Fin de la Fin de la presentaciónpresentación

BIOPSIA ESTUDIOS COMPLEMENTARIOS

Cátedra de Anatomía Patológica Cátedra de Anatomía Patológica

Facultad de MedicinaFacultad de Medicina

U.N.T.U.N.T.

INFORME ANATOMOPATOLÓGICO

Debe reunir las siguientes condiciones:Debe reunir las siguientes condiciones:

Datos del pacienteDatos del paciente Descripción macro y microscópica detallada Descripción macro y microscópica detallada

pero concretapero concreta ProtocoloProtocolo Diagnóstico jerarquizadoDiagnóstico jerarquizado Debe concretarse a los aspectos relacionados Debe concretarse a los aspectos relacionados

con el pronóstico y la terapéutica.con el pronóstico y la terapéutica.

BIOPSIA

Técnica de rutina: Técnica de rutina:

Hematoxilina- eosinaHematoxilina- eosina Coloraciones especiales:Coloraciones especiales:

Giemsa (Helicobacter Pylori)Giemsa (Helicobacter Pylori)

Azul Alcian (Esófago de Barret)Azul Alcian (Esófago de Barret)

Ziehl Nielsen (BAAR)Ziehl Nielsen (BAAR)

Rojo Congo (Amiloide)Rojo Congo (Amiloide)

PAS (Hongos)PAS (Hongos)

OTROS MÉTODOS

Microscopía electronica Inmunofluoresencia Polarización Inmunomarcación Patología Molecular: Captura híbrida PCR

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA

-Alcanza una magnificación de 500.000 aumentos.

-Utiliza un haz de electrones. -Se enfoca por campos magnéticos sobre

pantalla fluorescente o placas fotográficas. -Se usa por ej. en patología glomerular

para detectar cambios mínimos en podocitos,membranas basales,mesangio, etc.

INMUNOFLUORESCENCIA En tejidos sin fijación.

Usa coloración fluorescente que debe registrarse microfotograficamente por que se degrada.

Forma un trípode diagnóstico para las enfermedades glomerulares con la ME y los cortes de rutina con H-E, PAS y Tricrómico

Depósitos lineales de IgG en Riñón. Depósitos lineales de IgG en Riñón. Sindrome de Goodpasture. X 100Sindrome de Goodpasture. X 100

POLARIZACIÓN

Identifica el carácter Identifica el carácter birrefringente de ciertos tipos de birrefringente de ciertos tipos de depósito fibrilar colágeno.depósito fibrilar colágeno.

Por ejemplo: amiloidePor ejemplo: amiloide

INMUNOMARCACIÓN

Consiste en la detección de antígenos existentes en células o tejidos

Utiliza anticuerpos monoclonales o policlonales copulados con una enzima (peroxidasa) que se unen con dicho antígeno.

Se visualiza con microscopía óptica mediante coloración marrón del núcleo o citoplasma.

INMUNOMARCACIÓN

Epiteliales: citoqueratina 7 y 20.Mesenquimáticos: vimentina,

desmina.Linfoides: antígeno común

leucocitario-SNC: S100, PGFA-

HMB 45:HMB 45: melanoma melanoma

CANCER DE MAMACANCER DE MAMA

Inmunomarcación

Estrogénicos Progesterónicos

Catepsina D C-erb B-2 (HER2-neu)

PATOLOGÍA MOLECULAR

Permite conocer el mecanismo Permite conocer el mecanismo por el cual se origina una por el cual se origina una neoplasia.neoplasia.

Aporta información de valor Aporta información de valor pronóstico.pronóstico.

Predice en algunos casos la Predice en algunos casos la respuesta a la terapia.respuesta a la terapia.

VALOR PRONÓSTICO

Cambio cromosómico primario:Cambio cromosómico primario: asociado asociado a los mecanismos moleculares responsables a los mecanismos moleculares responsables de la neoplasia.de la neoplasia.

Cambio cromosómico secundario:Cambio cromosómico secundario: la la enfermedad sigue un curso más agresivo, enfermedad sigue un curso más agresivo, haciéndose más resistente a la terapia y haciéndose más resistente a la terapia y difícil de obtener una remisión completa.difícil de obtener una remisión completa.

Presencia o ausencia de células Presencia o ausencia de células normales:normales: La ausencia indica peor La ausencia indica peor pronóstico.pronóstico.

Presencia de dobles diminutos:Presencia de dobles diminutos: confiere confiere mayor resistencia a la terapia.mayor resistencia a la terapia.

TÉCNICA DE HIBRIDIZACIÓN IN SITU TÉCNICA DE HIBRIDIZACIÓN IN SITU (HIS) (HIS)

Permite detectar y localizar secuencias Permite detectar y localizar secuencias específicas de ADN o ARN.específicas de ADN o ARN.

Requiere de una desnaturalización (rotura de Requiere de una desnaturalización (rotura de los enlaces) de ADN de la muestra y de la los enlaces) de ADN de la muestra y de la sonda utilizada.sonda utilizada.

Hibridación de los ADN de la muestra y la Hibridación de los ADN de la muestra y la sonda por complementariedad de bases.sonda por complementariedad de bases.

Interpretación microscópica de acuerdo a la Interpretación microscópica de acuerdo a la sonda utilizada.sonda utilizada.

TIPOS DE SONDA

Centroméricas:Centroméricas: marcan la región marcan la región centromérica. Puede valorar la presencia o centromérica. Puede valorar la presencia o ausencia de alteraciones numéricas.ausencia de alteraciones numéricas.

De pintado cromosómico:De pintado cromosómico: abarcan todo el abarcan todo el cromosoma. Para alteraciones numéricas y cromosoma. Para alteraciones numéricas y estructurales en metafase y translocaciones estructurales en metafase y translocaciones complejas.complejas.

De secuencia única:De secuencia única: marcan regiones marcan regiones cromosómicas muy concretas. Para cromosómicas muy concretas. Para alteraciones numéricas y estructurales en alteraciones numéricas y estructurales en metafase e interfase.metafase e interfase.

NUEVAS TÉCNICAS DE HIS Multicolor FISH:Multicolor FISH: 24 sondas de marcado 24 sondas de marcado

cromosómico marcados con fluorescencia cromosómico marcados con fluorescencia sobre metafase.sobre metafase.

Mulibanding FISH:Mulibanding FISH: alteración estructural alteración estructural dentro de un mismo cromosoma, utiliza dentro de un mismo cromosoma, utiliza células en división.células en división.

Hibridación Genómica comparada (HGC):Hibridación Genómica comparada (HGC): detecta cambios numéricos de secuencias de detecta cambios numéricos de secuencias de ADN en tumores de índice proliferativo bajo.ADN en tumores de índice proliferativo bajo.

MICROARRAYS Son soportes sólidos en los que moléculas de ADN de cadena Son soportes sólidos en los que moléculas de ADN de cadena

simple se fijan y permiten identificar por hibridación la simple se fijan y permiten identificar por hibridación la

expresión de una multitud de genes de una muestra biológica. expresión de una multitud de genes de una muestra biológica.

Aislamiento de ARN de tejido normal y de una muestra de Aislamiento de ARN de tejido normal y de una muestra de

referencia.referencia.

Síntesis de ADN y marcaje con dos colorantes fluorescentes Síntesis de ADN y marcaje con dos colorantes fluorescentes

(Cy3 y Cy5).(Cy3 y Cy5).

Hibridación sobre el array.Hibridación sobre el array.

La diferencia de expresión del ARN entre ambos tejidos se La diferencia de expresión del ARN entre ambos tejidos se

puede evaluar a partir de la relación Cy3/Cy5 para cada gen.puede evaluar a partir de la relación Cy3/Cy5 para cada gen.

El análisis nos permite definir el patrón de expresión génica El análisis nos permite definir el patrón de expresión génica

para cada muestra concreta.para cada muestra concreta.

MICROARRAYS

Principales aplicaciones:Principales aplicaciones:

Clasificación de neoplasias morfológicamente Clasificación de neoplasias morfológicamente similares pero con comportamiento biológico similares pero con comportamiento biológico heterogéneo.heterogéneo.

Evaluación del pronóstico.Evaluación del pronóstico.

Respuesta al tratamiento.Respuesta al tratamiento.

PCR

Preparación y dosaje de ácidos Preparación y dosaje de ácidos nucleicos (ADN-ARN) por reacción nucleicos (ADN-ARN) por reacción en cadena de polimerasa (PCR), en cadena de polimerasa (PCR), técnica de amplificación in vitro técnica de amplificación in vitro de secuencias conocidas del de secuencias conocidas del genoma, que permite la detección genoma, que permite la detección de deleciones, mutaciones o de deleciones, mutaciones o rearreglos cromosómicosrearreglos cromosómicos

NO OLVIDAR

Conocer datos clínicos y exámenes complementarios Conocer datos clínicos y exámenes complementarios del paciente.del paciente.

Seleccionar el tipo de biopsia a realizar según la Seleccionar el tipo de biopsia a realizar según la patología y órgano afectado.patología y órgano afectado.

Envío del material en óptimas condiciones y con los Envío del material en óptimas condiciones y con los datos pertinentes.datos pertinentes.

Fijación y procesamiento adecuados.Fijación y procesamiento adecuados. Descripción macroscópica.Descripción macroscópica. Diagnósticos microscópicos.Diagnósticos microscópicos. Aspectos relacionados con el pronóstico y terapéutica.Aspectos relacionados con el pronóstico y terapéutica.

BIBLIOGRAFÍA

Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992Ateneo. Bs As .1992

Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989.Patológica. Ed. Doyma.1989.

Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990

XXII Congreso de la SEAP. Curso largo de XXII Congreso de la SEAP. Curso largo de Patología Molecular. 2005Patología Molecular. 2005

XXII Congreso de la SEAP. Aplicaciones XXII Congreso de la SEAP. Aplicaciones diagnósticas del FISH en Patología. 2005diagnósticas del FISH en Patología. 2005

XXII Congreso de la SEAP. Seminario del club XXII Congreso de la SEAP. Seminario del club de Inmunohistoquímica y Patología de Inmunohistoquímica y Patología Molecular. 2005Molecular. 2005

Fin de la Fin de la presentaciónpresentación

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