citología cutánea veterinaria

Download Citología cutánea veterinaria

Post on 10-Jan-2017

216 views

Category:

Documents

2 download

Embed Size (px)

TRANSCRIPT

  • Vol. 23, n 2, 2003

    Citologa cutnea veterinaria

    La citologa dentro del diagnstico veterinario se considera una herrami nta til p r u v n-tajas y por la informacin que se obtiene de ella. Debido al alto nmero de procesos que apa-recen en piel, este artculo se centra en la cito patologa cutnea de lesiones que se puedenencontrar en la clnica diaria.

    Palabras clave: Citologa cutnea. Lesiones inflamatorias y no inflamatorias. Neoplasias.Rev. AVEPA, 23(2): 75-87, 2003

    C. Fernndez,J. C. Jimnez de la Puerta,A. AguiJar.

    Clnica VeterinariaManzanares.po Virgen del Puerto 928005-Madrid.

    8LJAVE.P.A.

    Introd uccin

    Cundo y cmo la citologa nos ayuda en el diagnstico? En muchas ocasiones, lesiones dedistinta etiologa no se diferencian externamente unas de otras, y es necesario tener una visinms cercana del proceso que se est desarrollando in situ a travs del estudio detallado de lasclulas presentes, los posibles agentes implicados y la respuesta inmune generada. Despus deesta valoracin podremos:

    -Definir procesos inflamatorios, infecciosos y neoplasias y establecer su estirpe celular (epite-lial, conjuntiva, clulas redondas).

    -Encontrar agentes etiolgicos 7o o 20 y oportunistas: protozoos (Ieishmanias microfilarias,por ej.), bacterias, ectoparsitos, hongos y levaduras. (Fig. 1-3).

    -Corroborar un diagnstico previamente realizado o descartar otros.-Control del seguimiento del tratamiento establecido, para valorar su eficacia y al mismo tiem-

    po la evolucin del proceso.Adems se pueden extrapolar estas funciones en otros rganos (hgado, bazo, prstata, pul-

    mn, ojos, etc.), lquidos corporales (derrames en trax, abdomen, articulaciones, orina, etc.),tanto en vivo como en necropsias.

    Tambin est indicada para:-Definir las fases de ciclo fisiolgico en vagina.-Valorar la respuesta inmunitaria del organismo en mdula sea, sangre y ganglio, frente a agre-

    siones externas o internas (desrdenes linfoproliferativos, mieloproliferativos o mielodisplsicos).Es importante indicar que para que la citologa tenga valor diagnstico, debe estudiarse con-

    juntamente con el resto de las pruebas realizadas al paciente (bioqumica, Rx, ecografa ...), histo-rial clnico, sintomatologa y exploracin fsica. Por tanto, el reconocimiento de la patologa a nivelcelular ayuda a comprender la ambigedad de la lesin macroscpica.

    Tcnicas de recogida de muestras

    Aunque los pasos previos al estudio citolgico, recogida de muestras y procesado, no soncomplicados, s requieren un entrenamiento prctico para poder interpretar correctamente la cito-loga y evitar errores. Podemos usar distintas tcnicas: raspados, improntas, aspiracin con agujafina (AAF), tcnica de no aspiracin e hisopados.

    -Raspado: Se utiliza una hoja de bistur y parafina, en superficies cutneas, lceras, erosionesy sobre todo en la bsqueda de ectoparsitos; tambin en ndulos o tumores despus de su eli-minacin quirrgica para determinar el tipo de clulas de estratos ms internosv y es funda-

    75

  • Fernndez et al.

    mental para valorar mucosa conjuntival, en la que se requie-re una esptula ocular.

    -Impronta"': Consiste en posicionar suavemente el por-taobjetos sobre superficies slidas, hmedas o grasientas,habiendo retirado antes el exceso de sangre y detritus conuna gasa. Tambin se pone sobre ndulos y tumores, despusde su exresis quirrgica, de hacer un corte profundo en lamasa, que deja libre una superficie sobre la que realizaremosla impronta.

    -Aspiracin con aguja fina ( AAF)'2 ..5: Sobre ndulosfirmes, quistes, masas subcutneas o vesculas. Se utilizanagujas de 22-25 G Y jeringas de 5-10 cc. Se sujeta la zonamanualmente, se introduce la aguja y se realizan aspirados endistintas direcciones y de distintos puntos, liberando la pre-sin negativa en cada aspirado. Si no vemos ninguna mues-tra en la jeringa no significa que no obtengamos clulas,stas quedarn en el cilindro de la misma. Antes de retirar laaguja, se libera la presin negativa sobre el mbolo, despusse separa la aguja y se carga la jeringa con aire, se coloca denuevo la aguja y se expulsa el contenido sobre un portaobje-tos. Repitiendo esta operacin varias veces, se obtendrnpequeas gotas que extenderemos suavemente y sin paradascon otro portaobjetos colocado encima (squash).Para evitar lacoagulacin de la muestra y la degeneracin, debe procesar-se inmediatamente.

    -Tcnica de no aspirado": Es una modificacin de laanterior basada en el principio de capilaridad y en la que noes necesario aplicar presin negativa. Estil sobre tejidos conalta vascularizacin y vsceras (hgado, rin, bazo o tiroides).Se introduce la aguja (22 G) en el interior de la zona y se rea-lizan varios movimientos rpidos hacia adelante y atrs sinvariar la direccin. Las clulas se introducen en el cono de laaguja por capilaridad, de manera que permite disminuir elriesgo de hemodilucin al no aplicar presin negativa. Seobtendr un escaso volumen de muestra pero con mayorrepresentacin celular, que se expulsar con ayuda de unajeringa sobre un portaobjetos igual que en la tcnica deA.A.F.

    -Hisopado-': Se rueda un hisopo previamente humedeci-do con solucin salina en superficies de difcil acceso: fstulas,mucosa bucal, regin interdigital, vagina, odos, etc.

    Figura 1. Penicilium, hongo contaminante en cultivo de DTM(Dermatophyte Test Medium).

    Figura 2. Conidios junto con neutrfilos en un kerion cutneo.

    Figura 3. Macrfago fagocitando amastigotes de leishmania y bacteriasadyacentes en almohadilla de perro.

    Pautas para la adecuada obtencin yestudio de la muestra':':

    - Utilizacin de portaobjetos nuevos para evitar restos demuestras anteriores.

    - Recoger varias muestras, para obtener una mayor repre-sentacin celular, y secar al aire.

    - Evitar la contaminacin de sangre en la AAF, ya quediluye la muestra y disminuye su representatividad.

    - Habitualmente se utiliza la tincin rpida de tipoRomanowsky, Diff-Quick.

    - Solamente se deben valorar de reas de clulas enmonocapa que se encuentren ntegras y no hayan sufridodaos en el procesado para evitar confundirlas con clulas

    76

    ]LJA.V. E. P.A.

  • Vol. 23, n? 2, 2003

    Poblacin leucocitaria y fagocitaria

    Neutrfilos adultos no degenerados y degenerados.

    Eosinfilos

    Linfocitos adultos, clulas plasmticas y Iinfoblastos.

    Macrfagos y clulas gigantes o epiteloides.

    Tabla 1. Poblacin leucocitariay fagocitaria

    malignas. Se debe observar primero a bajos aumentos, 10x, ylocalizar una zona representativa con adecuada celularidad;despus a 40 o SOx, para el estudio celular ms detallado. Elobjetivo de inmersin, 100x, se emplea para detalles de cito-plasma y ncleo.

    Clulas implicadas y clasificacin de laslesiones': (Tabla 1)

    Encontraremos una poblacin especfica leucocitaria yfagocitara que responde a agresiones externas e internas, yuna poblacin noble que determina el origen de las clulasimplicadas en la lesin: epitelial, mesenquimatoso y clu-las redondas.

    -Poblacin leucocitaria y fagocitaria"'. Estconstituidapor neutrfilos adultos no degenerados con una morfologasemejante a los encontrados en sangre perifrica, ncleohipersegmentado basfilo y citoplasma plido. Aparece enprocesos donde existe un componente inflamatorio no puru-lento. Es posible que el ncleo experimente cambios comopicnosis y cariorrexis, que son procesos de muerte celular,donde el ncleo se condensa, aumenta su basofilia, pierde laslobulaciones y aparece como una nica o varias estructurasredondas de distinto tamao.

    Neutrfilos adultos degenerados (Fig. 4). Como conse-cuencia del ambiente txico creado, sufren rpidamente cam-bios que afectan a ncleo, cariolisis, muestran tumefaccin,bordes deshilachados, tincin rosada y prdida de membranacitoplasmtica. El citoplasma puede aparecer vacuolizado pordigestin enzirntica" y contener bacterias fagocitadas en suinterior'. Son propios de infecciones spticas bacterianas.

    Eosin filos. Son semejantes a los que se encuentran ensangre circulante y generalmente se encuentran asociados auna sintomatologa cutnea de prurito, edema, tumefaccin,etc. Estn presentes en procesos alrgicos e hipersensibilidad,parasitarios, presencia de cuerpo extrao, fngicos, complejogranuloma eosinoflico y en algunas neoplasias (Fig. 5).

    Linfocitos adultos. Son como una poblacin heterognea

    ]LJAV E.P.A.

    Figura 4. Neutrfilos degenerados en una infeccin purulenta con abun-dante poblacin bacteriana.

    Figura 5. Placa eosinofllica en gato con presencia de numerosos eoslnfl-los, algunos degranulados.

    Figura 6. Clula multinucleada gigante en una lesin inflamatoria de tipogranulomatosa..

    77

  • Fernndez et al.

    Poblacin noble

    clulas basales, escamosas,

    clulas de musculatura lisa y estriada,

    mastocitos, histiocitos, clulas de

    TVT, clulas linfoides (linfocitos,

    linfoblastos, clulas plasmticas).

    Tabla 2. Poblacin noble

    de tamao pequeo e intermedio, con ncleo basfilo y esca-so citoplasma. Estn relacionados con lesiones crnicas, fn-gicas, con mediacin inmunitaria compleja. Pueden verseacompaados por clulas plasmticas, que se diferencian porla existencia de una zona perinuclear clara, el aparato deGolgi y un citoplasma ms abundante y azul ms plido. Lasformas inmaduras, linfoblastos, de mayor tamao, con cro-matina menos basfila y nucleolo/s visible/s y prominentes enuna cantidad >50%, aparecen en linfomas cutneos.

    Macrfagos, clulas gigantes epitelioides. Son clulasencargadas de fagocitar clulas, restos celulares, cuerposextraos, pigmentos, agentes infecciosos, etc. Tienen untamao mediano/grande y morfologa variable y muestran uncitoplasma con vacuolas fagocitarias si estn activados,pudiendo incluir partculas digeridas. Cuando se presentanmultinucleados se denominan clulas gigantes o epiteloides(Fig. 6) por su semejanza con las clulas