aplicaciones del estudio del estrés oxidativo en...
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Aplicaciones del estudio del estrés oxidativo en toxicología
Juana Patricia Sánchez Villamil
Bacterióloga, Magíster Epidemiología - UIS
PhD Biología Molecular – UBA
ESTRÉS OXIDATIVO
Especies Reactivas
de oxígeno (ERO)
No Radicales
Radicales Libres
H2O2
Peróxido de hidrógeno
Oxígeno singlete
ONOO Peroxinitrito
O2 -
Superóxido
HO Radical hidroxilo
RO. Y ROO. Radicales alcoxi
y peroxi
ERO
Sistemas Antioxidantes
El estrés oxidativo se encuentra asociado a
Obesidad Contaminantes ambientales
Polución Metales pesados
Solventes Humo de tabaco
Cáncer
Virus
Bacterias Fármacos
Enfermedad cardiovascular Pesticidas
Desórdenes neurodegenerativos
Radiación
DAÑO OXIDATIVO INDUCIDO POR ERO
O2-
OH
ADN
Modificación de bases, Rompimiento
hebras ADN
PROTEINAS
Inactivación, degradación, peroxidacion
LIPIDOS
Peroxidación lipídica
.
Superoxido Dismutasa
H2O
2
Reacción de Fenton
+
Reacción de Haber Weiss
Metodologías para determinación de estrés oxidativo
Cuantificación de radicales
Directa
Resonancia de espín electrónico
(ESR, EPR)
Indirecta
Marcadores Inmunohistoquímicos
Cuantificación de marcadores de daño oxidativo
Cuantificación de sistemas de defensa
antioxidante
Metodologías para determinación de estrés oxidativo
Ensayos de peroxidación lipídica
TBARS
Malondialdehído
4 - hidroxinonenal
Ensayos oxidación de proteínas
Carbonilos proteicos
Sulfoxidación del aminoácido metionina
Ensayos oxidación ADN
Ensayo del cometa
8-OH-DG
Métodos para cuantificación de daño oxidativo
• Relación glutation reducido / oxidado GSH / GSSC
• Glutatión Peroxidasa
• Superóxido dismutasa
• Catalasa
• Tiorredoxina Capacidad antioxidante total - TRAP
Cuantificación de sistemas de defensa antioxidante
• Actividad • Expresión
Determinación de la función mitocondrial
Actividad Complejos
mitocondriales
Permeabilidad de la membrana mitocondrial
Actividad y expresión de antioxidantes mitocondriales
Cambios dinámica y biogénesis mitocondrial
Apoptosis
Consumo de oxígeno
mitocondrial
Aplicaciones – Evaluacion mecanismos de toxicidad
Efectos del Paraquat sobre la mitocondria
Imbalance en el estado redox
Inhibición del complejo I
Incremento producción de superóxido
Swelling mitocondrial
Reducción en el consumo de oxígeno
Despolarización mitocondrial.
Daño hepático inducido por Acetaminofem
Depleción de niveles mitocondriales
de GSH
Apertura del poro de transición de
permeabilidad mitocondrial
EVALUACIÓN ESTRATEGIAS ANTIOXIDANTES
T. BlancoAyala, et al, 2014
EVALUACION DEL POTENCIAL FOTOSENSIBILIDAD/FOTOTOXICIDAD
PERSPECTIVAS Desarrollo de biomarcadores de estrés oxidativo, para un estudio
integral del paciente
Estudio de estrategias farmacológicas con acción antioxidante, como marcadores indices de gran valor predictivo para la selección de estrategias terapéuticas
Utilidad en la predicción del potencial fototóxico de compuestos químicos que unido a la farmacogenómica contribuyan a la seguridad de nuevos medicamentos y personalización terapeutica.
GRACIAS