CUPRINS

Introducere...............................2

Suplimente nutritive

I.1. Definiie................................4

I.2. Legislaie privind suplimentele nutritive..............................4

II. Polifenolii...............................24

II.1. Polifenoli generaliti..............................24

II.2. Clasificarea polifenolilor.............................24

II.2.1. Acizii fenolici...............................25

II.2.2. Derivaii silbenici (stilbenoidele).............................28

II.2.2.1. Stilbenele...............................30

II.2.2.2. Resveratrol............................31

II.2.2.3. Stilbenele oligomeri...............................37

II.2.2.4. Produi de condensare ai stilbenelor cu taninurile................................37

II.2.3. Calconele..............................37

II.2.4. Flavonoidele.............................37

II.2.4.1. Flavonozidele............................48

II.2.4.2. Antocianozidele............................50

II.2.4.3. Proantocianozidele...........................52

II.2.4.4. Taninurile nehidrolizabile............................54

II.2.5. Cumarinele..............................55

II.2.6. Cromonele.......................................................................................................................................61

II.2.7. Lignani..............................................................................................................................................62

II.2.8. Taninuri hidrolizabile.......................................................................................................................62

II.3. Aciune polifenoli................................................................................................................................64

II.4. ntrebuinri.........................................................................................................................................70

II.5. Exemple de suplimente nutritive care conin polifenoli.....................................................................74

Bibliografie................................................................................................................................................83

Introducere

Procesul de oxidare reprezint transferul de electroni de la un atom la altul i reprezint o parte eseniala a vieii aerobe i a metabolismului, att timp ct oxigenul este acceptorul final de electroni n procesul de generare a energiei sub form de ATP. Dificultile apar atunci cnd electronul transferat devine necuplat, generndu-se radicali liberi.Exemple de specii de oxigen reactiv (ROS): radicalul superoxid O2, peroxil ROO-, alcoxil RO-, hidroxil HO, oxid nitric NO-.Radicalii liberi hidroxil (t 1/2 = 10-9s) i alcoxil (t1/2 = sec.) sunt foarte reactivi i atac rapid moleculele din apropierea lor, iar daunele provocate nu pot fi evitate dar pot fi reduse prin procese de regenerare. Pe de alt parte anionul superoxid, hidroperoxizii i oxidul nitric sunt cel mai puin reactivi. n plus fa de aceti ROS , n organismele vii mai exist i nonradicali ROS, cum ar fi 1O2 (oxigen atomic), H2O2, HOC1 - acid hipocloros.ROS prezint anumite funcii in vivo, unii au aciune pozitiv n ceea ce privete implicarea n procesele de producere de energie, fagocitoza, reglare a creterii celulare i de semnalizare intercelular, precum i n sinteza unor compui de importan biologic.Totui, majoritatea aciunilor lor sunt nedorite, deoarece atac lipidele ce intr n compoziia membranelor celulare, proteine, enzime, carbohidrai sau chiar ADN-ul prin inducerea unor procese de oxidare care duc la disfuncionaliti ale membranelor, modificri ale proteinelor i enzimelor precum i a moleculelor ce stocheaz informaia genetic. Se consider, c aceste deteriorri oxidative joac un rol determinant n procesele de mbtrnire i n mai multe boli degenerative asociate acesteia, precum afeciuni cardiace, catarale, cancere. Fiina uman i-a dezvoltat n cursul evoluiei sisteme antioxidante de protecie mpotriva radicalilor liberi. Aceste sisteme includ att antioxidani produi de organism (endogeni) ct i antioxidani ce sunt obinui din alimentaie (exogeni).

Cei endogeni sunt reprezentai de sisteme de protecie:

- enzimatice: Se-glutation peroxidaza, catalaza, superoxid dismutaza - ce metabolizeaz superoxizii, peroxidul de hidrogen i peroxizii lipidici, prevenind n acest fel formarea majoritii radicalilor toxici- nonenzimatice: glutationul, histidin peptidele, proteinele transportoare de Fe (transferina, feritina), acidul dihidrolipidic, coenzima Q10 redus, melatonina, tiolii proteici plasmatici - ce determin capacitatea plasmei de a capta radicali liberi.Aceste sisteme de aprare sunt complementare, cu toate c acioneaz mpotriva a diferite specii de radicali la nivelul diferitelor compartimente celulare.

Totui, anumii radicali liberi trec de bariera antioxidanilor (care pot inhiba formarea radicalilor liberi dar i neutralizarea celor formai i propagarea reaciilor n lan).

Pe lng antioxidanii cu rol defensiv, organismul se folosete i de antioxidanii reparatori, capabili s amelioreze daunele, fiind bazai pe proteaze, lipaze, transferaze i erizime reparatoare ale ADN.Datorit eficienei incomplete a sistemelor de aprare endogene i a existenei unor situaii fizio - patologice (fumatul, poluanii din aer, radiaiile UV, dieta bogat n acizi grai cu grad mare de nesaturare, inflamaii etc.) n care ROS sunt produi n exces, antioxidanii preluai din diet sunt necesari pentru diminuarea efectelor cumulative ale reaciilor oxidative n cursul vieii. Cei cu efecte benefice provenii din alimentaie sunt vitaminele C, E, A i carotenoidele, intens studiate.Pe lng aceste vitamine; mai exist i alte substane obinute din produse vegetale ce influeneaz pozitiv starea de sntate a organismului, asociate cu consumul de fructe i legume.De-a lungul ultimelor decenii s-au efectuat studii care au evideniat faptul c polifenolii obinui din produsele vegetale formeaz o clas important de antioxidani cu rol defensiv. Aceti compui sunt rspndii, teoretic, n majoritatea plantelor i sunt reprezentai de fenoli, acizi fenolici, flavonoide, taninuri, lignani.Suplimente nutritive

I.1. Definiie

Suplimentele nutritive sunt preparate condiionate sub form de tablete, capsule, drajeuri, pulberi sau lichide, care au n compoziia lor nutrieni (macro- i micronutrieni) i/sau alte substane comestibile, care sunt consumate n cantiti definite, n mod suplimentar fa de aportul alimentar obinuit.

I.2. Legislaie privind suplimentele nutritive

Ordinul nr. 282 din 11/05/2001pentru aprobarea Normelor privind suplimentele nutritive

Ministrul sntaii i familiei, n temeiul prevederilor art. 22 i 32 din Ordonana Guvernului nr. 113/1999 privind reglementarea produciei, circulaiei i comercializrii alimentelor i ale Hotrrii Guvernului nr. 22/2001 privind organizarea i funcionarea Ministerului Sntii i Familiei, cu modificrile i completrile ulterioare, avnd n vedere Referatul de aprobare al Direciei generale de sntate public nr. DB 4.727 din 11 mai 2001, emite prezentul ordin. Art. 1. - Se aprob Normele privind suplimentele nutritive, prevzute n anexa care face parte integrant din prezentul ordin. Art. 2. - Normele privind suplimentele nutritive sunt obligatorii pentru toi productorii, importatorii i distribuitorii de astfel de produse. Art. 3. - Direcia general de sntate public, Direcia general de asisten medical i farmaceutic, Inspecia sanitar de stat din cadrul Ministerului Sntii i Familiei i institutele de sntate public vor aduce la ndeplinire prevederile prezentului ordin. Art. 4. - Nerespectarea Normelor privind suplimentele nutritive atrage, dup caz, rspunderea civil, contravenional sau penal a persoanelor vinovate. Art. 5. - Pentru produsele care se ncadreaz n anexa nr. 1 la Normele privind suplimentele nutritive avizele sanitare obinute anterior publicrii prezentului ordin n Monitorul Oficial al Romniei, Partea I, rmn valabile. Art. 6. - Prezentul ordin va intra n vigoare n termen de 30 de zile de la data publicrii lui n Monitorul Oficial al Romniei, Partea I. La aceeai dat se abroga Ordinul ministrului sntii nr. 910/2000 pentru aprobarea Normelor privind utilizarea suplimentelor de hran, publicat n Monitorul Oficial al Romniei, Partea I, nr. 65 din 7 februarie 2001. Ministrul sntii i familiei,

Daniela BartoBucureti, 11 mai 2001. Nr. 282.ANEXANorma din 11/05/2001privind suplimentele nutritive

Art. 1. - n sensul prezentelor norme, suplimentele nutritive sunt preparate condiionate sub form de tablete, capsule, drajeuri, pulberi sau lichide, care au n compoziia lor nutrieni (macro- i micronutrieni) i/sau alte substane comestibile, care sunt consumate n cantiti definite, n mod suplimentar fa de aportul alimentar obinuit, i sunt prevzute n anexa nr. 1. Art. 2. - Suplimentele nutritive prevzute n anexa nr. 1, produse n ar sau provenite din import, pot fi comercializate pentru consumul uman numai dup avizarea lor de ctre Ministerul Sntii i Familiei prin Direcia general de sntate public. Art. 3. - Suplimentele nutritive prevzute n anexa nr. 1 se administreaz numai pe cale oral i nu vor fi nsoite de indicaii terapeutice. Art. 4. - Dozele fiziologice zilnice de vitamine i elemente minerale recomandate pentru o persoan adult sunt prevzute n anexa nr. 2. Art. 5. - Pentru suplimentele nutritive prevzute n anexa nr. 1 instruciunile cu privire la cerinele de avizare, supravegherea pe pia i publicitatea suplimentelor nutritive sunt prevzute n anexa nr. 3. Art. 6. - Anexele nr. 1-3 fac parte integrant din prezentele norme. ANEXA Nr. 1 la normeSUPLIMENTE NUTRITIVE 1. Vitamine i elemente minerale n cantiti care pe unitatea de consum (tableta, capsula, drajeu, linguria etc.) nu depesc de 3 ori dozele fiziologice zilnice recomandate pentru o persoan n cazul vitaminelor hidrosolubile i de 1,5 ori n cazul vitaminelor liposolubile i al elementelor minerale. Dozele fiziologice zilnice de vitamine i elemente minerale, recomandate pentru o persoan adult, sunt prevzute n anexa nr. 2 la norme. 2. Proteine pure sau sub form de concentrate proteice, izolate proteice i hidrolizate proteice, aminoacizi i amestecuri ale acestora. 3. Uleiuri alimentare considerate dietetice (de exemplu: uleiuri din germeni de semine de cereale, uleiuri din ficat de pete) i acizi grai polinesaturai eseniali. 4. Fosfolipide (lecitine, cefaline, serinfosfatide, inozitolfosfatide) pn la cantiti ale coninutului de fosfor de 1 g/zi 5. Fibre alimentare pn la cantitatea de 24 g/zi 6. Lapte pentru copii, indiferent de vrsta de administrare, dar fr indicaii terapeutice 7. Produse pentru copii: lapte cu cereale i/sau fructe, produse tip "baby-food" 8. ndulcitori sintetici alimentari 9. Produse pentru slbit i pentru meninerea greutii corporale, fr indicaii terapeutice 10. Produse parabiotice: probiotice, prebiotice, simbiotice - alimente funcionale care regleaz flora microbian intestinal 11. Produse pentru sportivi care conin vitamine, elemente minerale, proteine, hidrolizate proteice, aminoacizi, glucide uor asimilabile, acizi grai eseniali i ali nutrieni cu rol n susinerea efortului sportiv, n refacerea postefort, n dezvoltarea i meninerea masei musculare. ANEXA Nr. 2 la norme DOZELE FIZIOLOGICE ZILNICE

de vitamine i elemente minerale recomandate pentru o persoan adult*) *) Dozele pentru copii se vor recomanda de medicul de familie sau de medicul cu specialitatea pediatrie. Vitamine:

Vitamina A (retinol): 2.500-5.000 U.I.

Vitamina D (colecalciferol, ergocalciferol): 400 U.I.

Vitamina E (tocoferoli): 20-30 mg Vitamina K (filo- si fanochinona, menadiona): 0,1 mg Vitamina B1 (tiamina): 1,6 mg Vitamina B2 (riboflavina): 1,7 mg Vitamina B6 (piridoxina): 2,0 mg Vitamina B12 (cobalamina): 2,0 micrograme Vitamina PP (nicotinamida, acid nicotinic): 15-20 mg Acidul pantotenic: 10,0 mg Acidul folic: 0,4 mg Vitamina C (acid ascorbic): 60 mg Biotina (vitamina H): 0,2 mg Vitamina P (flavone, flavonoizi): 200 mg (total) Vitamina F (acizi grasi esentiali): 8,0 g.

Elemente minerale: Calciu: 1.000 mg Cupru: 3,0 mg Fosfor: 1.000 mg Iod: 0,2 mg Magneziu: 350 mg Fluor: 4,0 mg Sodiu: 2,0 g Mangan: 3,0 mg Potasiu: 3,5 g Molibden: 0,25 mg Clor: 5,0 g Crom: 0,2 mg Fier: 18,0 mg Seleniu: 0,1 mg Zinc: 15,0 mg Cobalt: 1,0 micrograme. ANEXA Nr. 3 la norme

I. Cerine de avizare a suplimentelor nutritive 1. Avizarea sanitar a suplimentelor nutritive prevzute n anexa nr. 1 este obligatorie i are drept scop asigurarea proteciei sntii populaiei prin desfacerea pe pia a unor produse care ntrunesc caracteristicile privind calitatea i sigurana acestora. 2. Avizarea sanitar poate fi solicitat de: a) productor; b) importator; c) reprezentantul autorizat al productorului. 3. Solicitantul avizului sanitar depune la institutul de sntate public la care este arondat judeul n care se afl sediul acestuia o cerere care cuprinde: a) denumirea i adresa productorului; b) denumirea i adresa solicitantului; c) denumirea i descrierea produsului; d) forma de condiionare (tablete, capsule, capsule gelatinoase, pulberi, lichide), coninutul net, modul de utilizare (pentru aduli, copii, vrstnici, gravide, unde este cazul); e) compoziia cantitativ i calitativ; f) termenul de valabilitate; g) precauii speciale de depozitare i transport; h) ambalare, etichetare; i) documente care atesta dreptul de comercializare a suplimentului nutritiv n ar de origine i/sau n alte ri. 4. Cererea de avizare sanitar va fi nsoit de urmtoarele documente: a) date de identificare a productorului, importatorului sau a reprezentantului acestuia (dup caz); b) date de identificare a produsului; c) informaii privind compoziia produsului finit; d) denumirea ingredientelor active; e) cantitile pentru ingredientele active i pentru excipieni; f) calitatea materiilor prime (caracteristici organoleptice, fizico-chimice, microbiologice, date toxicologice, metode de identificare i determinare cantitativ, buletine de analiz); g) descrierea procesului tehnologic de obinere a produsului finit; h) specificaia tehnic de calitate a produsului finit, limite de admisibilitate i metode de testare; i) identificarea/determinarea substanelor aditive; j) contaminare microbian (unde este cazul); k) date de stabilitate; l) certificat de calitate (nsoit de buletine de analiz); m) certificat de conformitate (import) din ara de origine; n) specificaii asupra materialului de ambalaj; o) prospectul ataat ambalajului (unde este cazul); p) eantion din produsul finit. 5.1. Institutul de sntate public care a primit cererea va studia documentaia prezentat, va efectua analizele de laborator necesare i va elibera un referat tehnic care este transmis Ministerului Sntii i Familiei - Direcia general de sntate public. 5.2. Ministerul Sntii i Familiei decide asupra avizrii produsului respectiv. 6. Avizul sanitar al suplimentelor nutritive este valabil 5 ani de la data emiterii, dac nu se modific parametrii de calitate ai produsului, prevzui n documentaia care a stat la baza avizrii. 7. n cazul neacordrii avizului sanitar solicitantul poate depune o contestaie motivat la Ministerul Sntii i Familiei - Direcia general de sntate public. n termen de 60 de zile de la primirea contestaiei Ministerul Sntii i Familiei, prin Direcia general de sntate public, va decide asupra contestaiei. 8. Reavizarea produsului se face la cererea titularului avizului, cu minimum 3 luni nainte de expirarea termenului de valabilitate a avizului sanitar. Etapele procedurale sunt identice cu cele ale avizrii iniiale. Dac nu se solicit reavizarea produsului, este permis comercializarea acestuia pn la epuizarea stocurilor, dar nu mai mult de un an de la expirarea avizului sanitar. 9. Retragerea avizului sanitar pentru suplimentele nutritive se decide de Ministerul Sntii i Familiei n urmtoarele situaii: a) nerespectarea prevederilor prezentului ordin; b) produsul nu corespunde parametrilor de calitate; c) apariia unor efecte adverse sau proprieti duntoare; d) beneficiile pentru sntate sunt mai mici dect riscurile; e) deintorul avizului solicit aceasta.

II. Supravegherea pe pia a suplimentelor nutritive 1.1. Supravegherea calitii produselor i supravegherea distribuiei lor n afara reelei farmaceutice pentru produsele prevzute n anexa nr. 1 se vor asigura de Inspecia sanitar de stat din cadrul Ministerului Sntii i Familiei. 1.2. Supravegherea calitii i distribuiei suplimentelor nutrivite admise n reeaua farmaceutic se va asigura de Direcia general de asisten medical i farmaceutic din cadrul Ministerului Sntii i Familiei.

III. Publicitatea suplimentelor nutritive i a altor produse similare 1. Publicitatea suplimentelor nutritive este permis numai dup avizarea coninutului materialului publicitar de ctre Ministerul Sntii i Familiei. 2. Materialul publicitar trebuie s conin urmtoarele informaii: - denumirea suplimentului i a substanei/substanelor active din punct de vedere nutriional sau metabolic; - informaiile necesare pentru consumul corect al suplimentului nutritiv; - o invitaie de a parcurge cu atenie informaiile nscrise pe ambalaj sau n prospect, referitoare la compoziie, modul de administrare, termenul de valabilitate, condiiile de pstrare; - atenionarea c produsele fac parte din categoria suplimentelor nutritive. 3. Agentul economic care solicit avizarea publicitii unui supliment nutritiv va prezenta Ministerului Sntii i Familiei - Direcia general de sntate public urmtoarele documente: a) cerere de avizare a materialului publicitar, n care se precizeaz modul de difuzare: televiziune, radio, pres, afie, pliante, panouri publicitare; b) materialul publicitar n detaliu: casete video sau audio, text dactilografiat; c) copie de pe avizul sanitar pentru suplimentul respectiv. 4. Avizul de publicitate acordat de Ministerul Sntii i Familiei are valabilitate permanent dac produsul rmne neschimbat. MINISTERUL SNTIIOrdin nr. 1214 din 23/12/2003pentru aprobarea Normelor privind suplimentele alimentareVznd Referatul de aprobare al Direciei generale sntate public i inspecia sanitar de stat nr. OB 6.829/2003, avnd n vedere prevederile art. 20 din Ordonana de urgen a Guvernului nr. 97/2001 privind reglementarea produciei, circulaiei i comercializrii alimentelor, aprobat cu modificri i completri prin Legea nr. 57/2003, n temeiul Hotrrii Guvernului nr. 743/2003 privind organizarea i funcionarea Ministerului Sntii, cu modificrile ulterioare.

Ministrul Sntii emite urmtorul ordin:

Art. 1. - Se aproba Normele privind suplimentele alimentare, prevzute n anexa care face parte integrant din prezentul ordin. Art. 2. - Direcia general sntate public i inspecia sanitar de stat din cadrul Ministerului Sntii, precum i direciile de sntate public judeene i a municipiului Bucureti vor controla modul de respectare a prevederilor prezentului ordin. Art. 3. - La data intrrii n vigoare a prezentului ordin se abrog Ordinul ministrului sntii i familiei nr. 282/2001 pentru aprobarea Normelor privind suplimentele nutritive, publicat n Monitorul Oficial al Romniei, Partea I, nr. 322 din 15 iunie 2001, i orice alte prevederi contrare. Art. 4. - Prezentul ordin va fi publicat n Monitorul Oficial al Romniei, Partea I, i va intra n vigoare n 90 de zile de la data publicrii. Ministrul sntii,

Ovidiu BrinzanBucureti, 23 decembrie 2003.Nr. 1.214.ANEXA - Norme privind suplimentele alimentare Art. 1. - (1) Prezentele norme reglementeaz suplimentele alimentare comercializate ca produse alimentare i prezentate ca atare. Aceste produse vor fi livrate consumatorului final numai sub form preambalat. (2) Prezentele norme nu se vor aplica pentru produsele medicamentoase definite n Ordonana de urgen a Guvernului nr. 152/1999 privind produsele medicamentoase de uz uman, aprobat cu modificri i completri prin Legea nr. 336/2002, cu modificrile ulterioare. (3) Normele privind suplimentele alimentare sunt obligatorii pentru toi productorii, importatorii i distribuitorii de astfel de produse. Art. 2. - n sensul prezentelor norme: a) suplimente alimentare reprezint produsele alimentare al cror scop este s completeze dieta normal i care sunt surse concentrate de nutrieni sau alte substane cu efect nutriional ori fiziologic, separat sau n combinaie, comercializate sub form de doz, cum ar fi: capsule, pastile, tablete, pilule i alte forme similare, pachete de pulbere, fiole cu lichid, sticle cu picurtor i alte forme asemntoare de preparate lichide sau pulberi destinate consumului n cantiti mici, msurabile; b) nutrienii reprezint urmtoarele substane: (i) vitamine; (ii) minerale. Art. 3. - In categoria suplimentelor alimentare, conform definiiei cuprinse la art. 2 lit. a), se includ i urmtoarele: a) proteine pure sau sub form de izolate proteice, izolate proteice i hidrolizate proteice, aminoacizi i amestecuri ale acestora; b) lipide alimentare (inclusiv acizi grai polinesaturai eseniali); c) fosfolipide (lecitine, cefaline, serinfosfatide, inozitolfosfatide) pn la cantiti ale coninutului de fosfor de 1 g/zi; d) fibre alimentare pn la cantitatea de 24 g/zi; e) produse parabiotice: probiotice, prebiotice, simbiotice - alimente funcionale care regleaz flora microbian intestinal. Art. 4. - (1) Pot fi utilizate la fabricarea suplimentelor alimentare numai vitaminele i mineralele enumerate n anexa nr. I i n formele listate n anexa nr. II. (2) Pentru substanele enumerate n anexa nr. II se vor aplica criteriile de puritate specificate de reglementrile legislative existente pentru utilizarea lor n producerea produselor alimentare n alte scopuri dect cele prevzute de prezentele norme. (3) Pentru acele substane enumerate n anexa nr. II pentru care criteriile de puritate nu sunt specificate n legislaia naional i pn la adoptarea unor astfel de specificaii, criteriile de puritate general acceptate, recomandate de organismele internaionale, sunt aplicabile, dar pot fi meninute i regulile naionale ce stabilesc criteriile de puritate mai stricte. (4) Ministerul Sntii poate acorda derogare de la cerinele prevzute la alin. (1) pn la data de 31 decembrie 2009 pentru utilizarea vitaminelor i mineralelor nemenionate n anexa nr. I sau sub formele nemenionate n anexa nr. II, cu condiia ca: a) substanele respective s fie utilizate n unul sau mai multe suplimente alimentare comercializate n Uniunea European la data intrrii n vigoare a prezentelor norme; b) Autoritatea European de Siguran Alimentar s nu fi emis un aviz nefavorabil pentru utilizarea acestor substane sau utilizarea lor n aceast form, n producerea suplimentelor alimentare, pe baza unui dosar ce susine utilizarea substanei n cauz, prezentat Comisiei Europene de ctre statele membre ale Uniunii Europene nu mai trziu de 12 decembrie 2006. Art. 5. - (1) Cantitile maxime de vitamine i minerale prezente n suplimentele alimentare pentru o porie zilnic de consum, conform recomandrilor fabricantului, se stabilesc lundu-se n considerare urmtoarele: a) nivelurile superioare de siguran ale vitaminelor i mineralelor stabilite prin evaluarea tiinific a riscului, pe baza datelor tiinifice general acceptate, innd cont de variaia nivelurilor de sensibilitate ale diferitelor grupuri de consumatori; b) aportul de vitamine i minerale din alte surse alimentare. (2) Cnd sunt stabilite nivelurile maxime la care se refer alin. (1), trebuie s se ia n considerare aportul de referin al vitaminelor i mineralelor pentru populaie. (3) Pentru a asigura cantiti semnificative de vitamine i minerale n suplimentele alimentare, se stabilesc cantiti minime pentru o porie zilnic de consum, conform recomandrilor fabricantului, dup caz. (4) Cantitatea total zilnic de consum pentru vitaminele hidrosolubile nu trebuie ns s depeasc de 3 ori dozele fiziologice zilnice recomandate, iar pentru vitaminele liposolubile i elementele minerale nu trebuie s depeasc de 1,5 ori dozele fiziologice zilnice recomandate. Dozele fiziologice zilnice de vitamine i elemente minerale recomandate pentru o persoan adult sunt prezentate n anexa nr. III. Art. 6. - (1) Conform reglementrilor privind etichetarea produselor alimentare, numele sub care sunt vndute produsele specificate n prezentele norme este acela de "supliment alimentar". (2) Etichetarea, prezentarea i reclama nu trebuie s atribuie suplimentelor alimentare proprietatea de prevenire, tratare sau vindecare a unei boli umane sau s fac referire la asemenea proprieti. (3) Fr a prejudicia reglementrile privind etichetarea produselor alimentare, etichetarea trebuie s conin urmtoarele meniuni: a) numele categoriilor de nutrieni sau de substane ce caracterizeaz produsul ori o indicaie a naturii acestor nutrieni sau substane; b) poria din produs care este recomandat pentru consumul zilnic; c) un avertisment de a nu se depi doza zilnic recomandat; d) o atenionare ca suplimentele alimentare nu trebuie s nlocuiasc un regim alimentar variat; e) o atenionare ca produsele nu trebuie s fie lsate la ndemna copiilor mici. Art. 7. - Etichetarea, prezentarea i reclama suplimentelor alimentare nu vor include afirmaii directe sau care s induc ideea c o diet corespunztoare i diversificat nu poate asigura cantiti adecvate de substane nutritive n general. Art. 8. - (1) Cantitatea de nutrieni sau substane cu efect nutriional ori fiziologic prezena n produs este declarat pe eticheta sub form numeric. Unitile utilizate pentru vitamine i minerale sunt specificate n anexa nr. I. (2) Cantitile de substane nutritive sau alte substane declarate se specific pe etichet pentru o porie de produs recomandat pentru consumul zilnic. (3) Informaiile privind vitaminele i mineralele sunt exprimate i sub form de procent din valoarea de referin menionat, doza zilnic recomandat, dup caz, n reglementrile privind etichetarea nutriional (Hotrrea Guvernului nr. 106/2002 privind etichetarea alimentelor, cu modificrile ulterioare). Art. 9. - (1) Valorile declarate, menionate la art. 8 alin. (1) i (2), sunt valorile medii obinute pe baza analizei produsului, efectuat de ctre fabricant. (2) Procentul valorilor de referin pentru vitaminele i mineralele menionate la art. 8 alin. (3) poate fi, de asemenea, prezentat sub form grafic.

CAPITOLUL II

Supravegherea pe pia a suplimentelor alimentare Art. 10. - (1) Pentru activitatea de monitorizare a suplimentelor alimentare se cere fabricantului sau persoanei responsabile cu punerea produsului pe pia s notifice autoritatea competena, Direcia general sntate public i inspecia sanitar de stat din cadrul Ministerului Sntii, prin transmiterea unui model de eticheta (n forma electronic i folio) utilizat pentru acest produs. (2) Ministerul Sntii are obligaia s fac public informaia privind suplimentele alimentare notificate. Art. 11. - Dac n urma unor noi informaii sau a reevalurii informaiilor existente n prezentele norme exist motive s se stabileasc faptul c un produs prevzut la art. 1 pericliteaz sntatea uman, dei este n conformitate cu acele prevederi, Ministerul Sntii poate suspenda sau restriciona temporar comercializarea produsului n cauz pe teritoriul Romniei. Art. 12. - Supravegherea pe piaa a suplimentelor alimentare se face de ctre personalul mputernicit pentru exercitarea activitii de inspecie sanitar de stat.

CAPITOLUL III

Dispoziii finale

Art. 13. - Suplimentele alimentare sunt comercializate n Romnia numai dac acestea sunt n conformitate cu regulile prevzute n prezentele norme. Art. 14. - Nerespectarea prezentelor norme atrage, dup caz, rspunderea civil, contravenional sau penal a persoanelor vinovate. Art. 15. - Ministerul Sntii va amenda i adopta legile, reglementrile i prevederile administrative necesare pentru a fi n conformitate cu prezentele norme, pn la 31 iulie 2005 cel trziu. Art. 16. - Anexele nr. I-III fac parte integrant din prezentele norme. ANEXA Nr. I la norme *) Anexa nr. I la norme este reprodus n facsimil. VITAMINE I MINERALEcare pot fi utilizate pentru fabricarea suplimentelor alimentare 1. Vitamine: Vitamina A (g RE) Vitamina D (g) Vitamina E (mg (alfa) - TE) Vitamina K (g) Vitamina B1 (mg) Vitamina B2 (mg) Niacina (mg NE) Acid pantotenic (mg) Vitamina B6 (g) Acid folic (g) Vitamina B12 (g) Biotina (g) Vitamina C (mg)

2. Minerale Calciu (mg) Magneziu (mg) Fier (mg) Cupru (g) Iod (g) Zinc (mg) Mangan (mg) Sodiu (mg) Potasiu (mg) Seleniu (g) Crom (g) Molibden (g) Fluor (mg) Clor (mg) Fosfor (mg) ANEXA Nr. II la norme

SUBSTANTE VITAMINICE SI MINERALE

ce pot fi utilizate pentru fabricarea suplimentelor alimentare A. Substante vitaminice: 1. Vitamina A a) retinol b) acetat de retinol c) palmitat de retinol d) beta-caroten 2. Vitamina D a) colecalciferol b) ergocalciferol 3. Vitamina E a) D-alfa-tocoferol b) DL-alfa-tocoferol c) acetat de D-alfa-tocoferol d) acetat de DL-alfa-tocoferol e) succinat acid de D-alfa-tocoferol 4. Vitamina K a) fitochinona (fitomenadiona) 5. Vitamina B1 a) clorhidrat de tiamina b) mononitrat de tiamina 6. Vitamina B2 a) riboflavina b) riboflavin 5'-fosfat de sodiu 7. Niacina a) acid nicotinic b) nicotinamida 8. Acid pantotenic a) D-pantotenat de calciu b) D-pantotenat de sodiu c) dexpantenol 9. Vitamina B6 a) clorhidrat de piridoxina b) piridoxin 5'-fosfat 10. Acid folic a) acid pteroilmonoglutamic 11. Vitamina B12 a) cianocobalamina b) hidroxocobalamina 12. Biotina a) D-biotina 13. Vitamina C a) acid L-ascorbic b) L-ascorbat de sodiu c) L-ascorbat de calciu d) L-ascorbat de potasiu e) L-ascorbil 6-palmitat B. Substante minerale: 1. carbonat de calciu 2. clorura de calciu 3. saruri de calciu ale acidului citric 4. gluconat de calciu 5. glicerofosfat de calciu 6. lactat de calciu 7. saruri de calciu ale acidului ortofosforic 8. hidroxid de calciu 9. oxid de calciu 10. acetat de magneziu 11. carbonat de magneziu 12. clorura de magneziu 13. saruri de magneziu ale acidului citric 14. gluconat de magneziu 15. glicerofosfat de magneziu 16. saruri de magneziu ale acidului ortofosforic 17. lactat de magneziu 18. hidroxid de magneziu 19. oxid de magneziu 20. sulfat de magneziu 21. carbonat feros 22. citrat feros 23. citrat feric de amoniu 24. gluconat feros 25. fumarat feros 26. difosfat feric de sodiu 27. lactat feros 28. sulfat feros 29. difosfat feric (pirofosfat feric) 30. zaharat feric 31. fier elementar (carbonil+electrolitic+hidrogen redus) 32. carbonat de cupru 33. citrat de cupru 34. gluconat de cupru 35. sulfat de cupru 36. complex cupru-lizina 37. iodura de sodiu 38. iodat de sodiu 39. iodura de potasiu 40. iodat de potasiu 41. acetat de zinc 42. clorura de zinc 43. citrat de zinc 44. gluconat de zinc 45. lactat de zinc 46. oxid de zinc 47. carbonat de zinc 48. sulfat de zinc 49. carbonat de mangan 50. clorura de mangan 51. citrat de mangan 52. gluconat de mangan 53. glicerofosfat de mangan 54. sulfat de mangan 55. bicarbonat de sodiu 56. carbonat de sodiu 57. clorura de sodiu 58. citrat de sodiu 59. gluconat de sodiu 60. lactat de sodiu 61. hidroxid de sodiu 62. saruri de sodiu ale acidului ortofosforic 63. bicarbonat de potasiu 64. carbonat de potasiu 65. clorura de potasiu 66. citrat de potasiu 67. gluconat de potasiu 68. glicerofosfat de potasiu 69. lactat de potasiu 70. hidroxid de potasiu 71. saruri de potasiu ale acidului ortofosforic 72. selenat de sodiu 73. hidrogenoselenit de sodiu 74. selenit de sodiu 75. clorura de crom (III) 76. sulfat de crom (III) 77. molibdat de amoniu [molibden (VI)] 78. molibdat de sodiu [molibden (VI)] 79. fluorura de potasiu 80. fluorura de sodiu

ANEXA Nr. III la norme DOZELE FIZIOLOGICE ZILNICE

de vitamine i elemente minerale recomandate pentru o persoan adult*) *) Dozele pentru copii se vor recomanda de medicul de familie sau de medicul cu specialitatea pediatrie. Vitamine: Vitamina A (retinol): 2.500-5.000 UI Vitamina D (colecalciferol, ergocalciferol): 400 UI Vitamina E (tocoferoli): 20-30 mg Vitamina K (fito- si fanochinona, menadiona): 0,1 mg Vitamina B1 (tiamina): 1,6 mg Vitamina B2 (riboflavina): 1,7 mg Vitamina B6 (piridoxina): 2,0 mg Vitamina B12 (cobalamina): 2,0 micrograme Vitamina PP (nicotinamida, acid nicotinic): 15-20 mg Acid pantotenic: 10,0 mg Acid folic: 0,4 mg Vitamina C (acid ascorbic): 60,0 mg Biotina (vitamina H): 0,2 mg Vitamina P (flavone, flavonoizi): 200 mg (total) Elemente minerale: Calciu: 1.000 mg Fosfor: 1.000 mg Magneziu: 350 mg Sodiu: 2,0 g Potasiu: 3,5 g Clor: 5,0 g Fier: 18,0 mg Zinc: 15,0 mg Cupru: 3,0 mg Iod: 0,2 mg Fluor: 4,0 mg Mangan: 3,0 mg Molibden: 0,25 mg Crom: 0,2 mg Seleniu: 0,1 mg Cobalt: 1,0 micrograme II. Polifenolii

II.1. Polifenoli generaliti

Polifenolii sunt un grup se substane chimce de natur vegetal, caracterizate prin prezena unuia sau mai multora radicali fenil, unii sau liberi sau care fac parte din alte edificii moleculare.

Polifenolii reprezint o larg categorie de compui naturali de origine vegetal i marea lor majoritate prezint o marcant activitate antioxidant. Cteva din exemplele comune, n ordinea creterii complexitii, sunt: hidroxil stilbenii, cum ar fi resveratrolul - compus ce se gsete n struguri i vin, compui cu structuri oligomerice provenite de la acidul cafeic, prezeni n anumite specii de Lamiaceae - acidul rosmarinic, acidul yunnaneic, vastul grup al flavonoidelor, avnd flavan- 3- olul ca monomer sau oligomer (derivati ai + catechinei sau epicatechinei, taninuri condensate ) sau taninurile hidrolizabile.II.2. Clasificarea polifenolilor

Polifenolii se divid n urmtoarele clase:

acizi fenolici (acid cafeic, acid clorogenic);

derivaii stilbenici (resveratrol i derivai);

calcone;

flavonoidele (flavonozide, antocianozide, proantocianozide, taninuri nehidrolizabile);

cumarinele (derivai fnolici ai cumarinelor);

cromonele (derivai fenolici ai cromonelor);

lignani (derivai fenilpropanici)

taninuri hidrolizabile (derivai de acid galic).

Figura 1. Clasificarea polifenolilor

II.2.1. Acizii fenolici

Sunt compui fenolici de tip C6 C3. Majoritatea acestor polifenoli sunt esteri ai acizilor cafeic, pcumaric, ferulic i sinapic i numai rareori esteri ai acizilor ocumaric, i oferulic. Datorit celor dou grupri odihidroxi cu caracter fenolic ale acidului cafeic - aceti compui se mai numesc i ODP-uri (12).

Se gsesc rspndii n numeroase plante, mai ales n familiile: Asteraceae, Boraginaceae, Lamiaceae, Oleaceae, Plantaginaceae, Violaceae, Scrophulariaceae etc.

Din acest grup fac parte:

esterii acidului cafeic cu:

acidul chinic (monocafeil chinici acidul clorogenic i izomerii si; dicafeoil chinici cinarina i izomerii si);

Figura 2 - Structura chimic a unor derivai ODP (12)

acidul tartric (acidul cichoric = acid 2-3 dicafeoil tartric);

acidul 2-hidroxi-dihidrocafeic (acidul rozmarinic sau labiatinic i acidul litospermic);

glucoza (i alte oze) i cu 3,4-dihidroxi-fenil-etanolul (echinacozida, verbascozida, forsitiozida, plantamajozida, helicozida, angorozida A, poliumozida .a.);

Figura 3 - Esteri ai acidului cafeic cu glucoza

RR1RR1

echinozida

ramnozglucozplantamajozidaglucozaH

verbascozidaramnozHpoliumozidaramnozramnoz

forsitiozidaHramnozangorozida Aramnoz-L-arabinoza

esterii acidului ferulic cu acidul tartric (acid feruil-tartric).

Unii derivaii ai acidului cafeic au aciune hepatotrop. Astfel acidul clorogenic, cinarina, izomerii lor i acidul cicoric sunt coleretice i colecistochinetice. Acidul rozmarinic, prin proprietile antioxidante, anihileaz aciunea radicalilor oxid i peroxid care intervin n procesele infecioase i de mbtrnire i activeaz circulaia cerebral. Angorozida A este un citostatic; echinacozida este imunostimulatoare, iar acidul litospermic este un antigonadotrop, tireotrop i hipoglicemiant (12).

Produsele cu cel mai mare coninut n aceti derivai sunt: Cynarae folium (acid clorogenic, cinarin i derivai); Cichorii radix et herba (acid cichoric), Echinaceae radix (echinacozid, acid feruil-tartric); Verbasci folium et flores (verbascozida), Plantaginis majoris folium (plantamajozida), Forsynthia viridissima Wahl (forsitiozida), Phlomis armeniaca Willd. i Scutellaria salviifolia Bentham (Lamiaceae); Lythospermum officinale L., Symphytum officinale L., Echium vulgare (Boraginaceae), Arctostaphylos uva ursi (L.) Spreng (Ericaceae), Rubus idaeus L. (Rosaceae), Cnicus benedictus L. (Asteraceae) (acid litospermic) (12).

II.2.2. Derivaii stilbenici (stilbenoidele)

Stilbenoidele sunt un grup de compui fenolici formai din acid cinamic (rezultat pe calea acidului shikimic) i trei molecule de acetat unite (din malonil CoA). Prima parte a biosintezei este comun att stilbenoidelor ct i flavonoidelor. Cele 2 ci biosintetice se despart din punctul ciclizrii acidului stiril-3,5,7-treichetoheptanoic. Prin acilare la un carbon rezult o calcon, iar apoi prin transformarile ulterioare rezult flavonoidele (flavonozide, aurone, biflavonozide, izoflavone, calcone, pterocarpani, antocianozide, proantocianidoli, catecholi). Prin condensare aldolic la acelai compus, acid stiril-3,5,7-treichetoheptanoic, rezult acidul stilben-2-carboxilic (fig. 20)., care este instabil i conduce la structurile de baz ale claselor de stilbenoide (bibenzili (dihisrostilbeni), bis-bibenzili, stilbenele, fenildihidro-isocumarinele, fenantreni, i 9,10-dihidrofeantreni) (fig. 21).

Figura 4. Biosinteza stilbenoidelor

Figura 5. Structurile de baz ale stilbenoidelor

II.2.2.1. Stilbenele

Stilbenele sunt compui ai metabolismului secundar formai n partea lemnoas i pot fi considerate fitoalexine. Ele au structur de tip C14H12 i aparin chimic hidroxiderivailor stilbenului. Biochimic ele aparin derivailor fenilpropaninici i au aceeai cale de sintez ca i calconele. Sunt substane solide de culoare galben sau verde. Cel mai important reprezentant al clasei este resveratrolul - 3,3',4,5' tetrahidroxistilben (C14H12O3).

Din categoria stilbenelor fac parte: stilbenele simple, stilbenele oligomeri i produi de condensare ai stilbenelor cu taninuri.

Dintre stilbenele simple menionm: combretastatinul: i derivaii, dietilstilbestrolul, hidroxistilbamidina, piceatanolul, piceozida, pinosilvinul, pterostilbenul i resveratrolul.

II.2.2.2. Resveratrolul

Relaii structur chimic-activitate

Resveratrolul (trans-3,5,4'-trihidroxistilbene) este o fitoalexin produs natural n cteva plante n urma atacrii lor de ageni patogeni ca de exemplu bacterii sau fungi.

Resveratrolul obinut prin sintez chimic, este vndut ca supliment nutritiv pentru prima dat n Japonia. Dei resveratrolul a prelungit perioada de via la cteva specii de animale cu via scurt, totui acest efect nu a fost demonstrat pe mamifere. S-a demonstrat pe oareci i cobai efect anticancerigen, aciune atiinflamatoare, hipoglicemiant i alte efecte benefice cardiovasculare. Unele dintre aceste efecte au fost confirmate pe oameni.

Farmacocinetic

Cea mai eficient cale de administrare a resveratrolului este cea oral, fr a se nghii, cu absorbie direct bucal. Prin administrarea a 1 mg de resveratrol dizolvat n 50 ml de ap i reinut n gur un minut nainte de nghiire, a fost determinat n plasm 2 minute mai trziu 37 ng/ml de resveratrol liber. Acest nivel netransformat de resveratrol poate fi obinut n snge dup administrarea a 250 mg n tablete. Biodisponibilitatea oral a resveratrolului este sczut, el fiind rapid metabolizat n intestin i n ficat n derivai glucuronoconjugai i sulfuronoconjugai.. Numai urme (mai puin de 5 ng/mL) de resveratrol netransformat a fost determinat n snge dup 25 mg administrate oral.

Chiar cnd s-au administrat doze mari de resveratrol (2,5 i 5 g) n comprimate neacoperite, concentraia de resveratrol n snge nu a atins nivele sistemice necesare prevenirii cancerului. Totui, resveratrolul se administreaz ca SRT-501 (3 ori 5 g), comercializat de Sirtris Pharmaceuticals, ajungndu-se la nivele mai nalte n snge de 5-8 ori mai crescute.

Dup alte studii efectuate la oameni i la oareci mai puin de 5% din dozele orale ajung n plasm. Cei mai ntlnii metabolii la oameni, oareci i cobai sunt trans-resveratrol-3-O-glucuronide i trans-resveratrol-3-sulfate.

Walle sugereaz c sulfuronoconjugaii sunt eseniali n activitate, ca i Wang i colaboratorii iar Boocock i colaboratorii accentueaz nevoia n viitor de studii asupra efectelor metaboliilor incluznd i posibilitatea deconjugrii formelor conjugate ale resveratrolului cu obinerea resveratrolului liber n celule. Goldberd care a studiat farmacocinetica resveratrolului, catecholului i quercetolului la oameni a concluzionat urmtoarele se pare c acest beneficiu la aceti compui se bazeaz pe activitile in vitro a formelor neconjugate sunt nerealistice i exagerate. Este adevrat c multele scrieri au legitimat aceast ipotez neadevrat. Studii pe aceast tem au demonstrat potenialul benefic i al derivailor conjugai

Ipoteza c resveratrolul din vin nu poate avea biodisponibilitate crescut ca resveratrolul din tablete a fost combtut cu date experimentale. De exemplu, 5 oameni au luat 600 mL vin rou care conine resveratrol 3,2 mg/L (doza total aproape 2 mg) nainte de micul dejun, resveratrol netransformat a fost detectat n snge numai la doi dintre ei, i numai n urme (mai puin de 2,5 ng/mL). La administrare cu hran nivelele sunt mai mici (16 ng/mL) nivele gsite la 4 din 10 subieci n alt studiu de farmacocinetic a resveratrolului s-au administrat 25 mg din diferite surse i s-au determinat nivele nalte de resveratrol n ser (7-9 ng/mL) dup 30 minute, care au disprut dup 4 ore.

Farmacodinamie

Aciunea estrogenic

Figura 22. Similaritatea de structur a resveratrolului cu unii estrogeni

Structura resveratrolului este comparabil cu cea a dietilstilbestrolului dar i cu estradiolul. Similitudinea de structur (fig. 22) ntre resveratrol i dietilstilbestrol este foarte evident privind partea stilbenic. Inelul fenolic A este caracteristic estrogenilor steroidieni i este prezent n toi cei trei compui.

Resveratrolul poate fi considerat un fitoestrogen deoarece se combin cu receptorul de estrogen uman. Resveratrolul intr n competiie cu 125I-estradiol n combinarea cu receptorul de estrogen uman. n plus resveratrolul activeaz exprimarea genelor reporter ce rspund la estrogen din diferite linii celulare umane iar aceast activare este inhibat de ctre antagonitii de estrogen. Efectele estrogenice ale resveratrolului au loc la concentraii care sunt similare celor necesare pentru aciunile antiinfamatorii, antitrombocitice i anticarcinogenice.

Aciunea antiinflamatoare

Un studiu pe macrofage RAW 264,7 a demonstrat c Arahidinul-1, Piceatannolul i Resveratrolul au aciune antiinfamatoare prin inhibarea lipopolizaharidelor (LPS) care induc producia de PGE2 i NO i a factorilor de transciere genic ai NF-KB sau C/EBP.

Aciune antitumoral

M. Abdel-Mogib, S.A.Basaif i T.R. Sobahi au constatat prezena resveratrolului n extractul de Scirpus holoschoenus. Resveratrolul este un polifenol natural prezent n unele plante medicinale (Polygonum cuspidatum), via de vie, etc. Resveratrolul este una din substanele prezente n vinul alb i mai ales n cel rou. Din aceast cauz au fost fcute studii cu privire la consumul de vin rou i incidena bolilor coronariene. S-a constatat efectul antioxidant i antiinflamator al resveratrolului. Aceast aciune determin o inhibare a formrii plachetelor sangvine.

n cercetarea pentru stabilirea unor noi compui eficieni n lupta mpotriva cancerului s-au analizat sute de plante, printre care i Polygonum cuspidatum, plant utilizat n medicina popular chinezeasc. Astfel au aprut suplimente naturale cu extract din aceast plant medicinal.

n 1997 Jang a raportat n urma unui experiment pe oareci c resveratrolul previne apariia cancerului de piele. In vitro resveratrolul reacioneaz cu numeroase molecule int i dau efecte pozitive n cancere de sn, topice, gastrice, cancer al colonului, cancer al esofagului, cancer al prostatei, cancer pancreatic i leucemie. Totui studii de farmacocinetic au demonstrat c dozele mici i medii de resveratrol nu sunt suficiente pentru prevenirea cancerului. Efectul cel mai puternic al aciunii cancerigene a fost la aplicarea topic a resveratrolului intrnd n contact direct cu tumori ale pielii sau gastrointestinale.

De exemplu aplicaii topice ale resveratrolului la oareci nainte i dup expunere la radiaii UVB au inhibat efectele distructive asupra pielii i creterea incidenei cancerului. Totui administrarea oral a resveratrolului nu a avut efect in tratarea melanoamelor induse la oareci. De asemenea administrarea oral nu a avut efect nici n leucemie. Administrarea intraperitoneal a 2,5 pn la 10 mg/kg de resveratrol a ncetinit grbirea metastazei Lewis in carcinomul pulmonar. Resveratrolul (1 mg/kg administrat oral) reduce numrul i mrimea tumorilor esofagiene.

n cteva studii doze mici de (0,02-8 mg/kg) resveratrol, pot reduce i preveni dezvoltarea tumorilor de colon i intestinale.

Creterea perioadei de viaHowitz, Sinclair i colaboratorii au raportat n 2003 n jurnalul Nature c resveratrolul prelungete durata de via pentru Saccharomyces cerevisiae. viermi ca Caenorhabditis elegans i Drosophila melanogaster. n 2007 alt grup de cercettori au reprodus rezultatele obinute de cercettorii anteriori cu Caenorhabditis elegans dar al III-lea grup nu a putut obine creteri semnificative ale duratei vieii pentru Drosophila melanogaster ori C. elegans

In 2006 un cercettor italian a obinut rezultate pozitive n acest sens pentru vertebrate. E a utilizat ca material speciile de peti cu via scurt, Nothobranchius furzeri, cu o via n medie de nou sptmni. Administrnd doze maxime de resveratrol media de via a petilor a crescut cu 56%. Mai trziu n acelai an Sinclair a raportat c resveratrolul contracareaz efectele nocive ale dietei bogat n grsimi la oareci. Hrana bogat n grsimi a fost compus din adaos de grsimi hidrogenate din ulei de nuc de cocos pn la diet standard. La amndou loturile li s-a administrat resveratrol 22 mg/kg i au avut o reducere de 30 % a riscului de mortalitate dect lotul hrnit numai cu grsimi.

Farmacotoxicologie

Resveratrolul stimuleaz exprimarea genelor endogene activate de estrogen i induce proliferarea celulelor T47D de cancer mamar.

Dei efectele benefice ale resveratrolului sunt importante, stimularea dezvoltarii celulelor canceroase mamare. Este posibil deoarece structura chimic a resveratrolului este similar fitoestrogenilor,. Totui alte studii au demonstrat c resveratrolul ar inhiba dezvoltarea celulelor mamare canceroase,. Proprietile estrogenice ale resveratrolului limiteaz utilizarea lui la femeile nsrcinate sau care intenioneaz s rmn nsrcinate sau la cele care iau contraceptive. De asemenea nu se recomand copiilor i tinerilor sub 18 ani deoarece nu sunt studii care s arate c nu influeneaz dezvoltarea lor. Puine studii menioneaz c dozele administrate mai mari de 5 g trans-resveratrol au cauzat efecte adverse neimportante dup administrare.

II.2.2.3. Stilbenele oligomeri

Dintre oligomeri menionm, hopeaphenolul, din specia Balanocarpus heimi sin. Hopea heimi. Stilbene dimere sunt: e-viniferin, balanocarpol, palidol, tricuspidatol, ampelopsin A. Dintre stilbenele trimere menionm: ampelopsin O, viniferin, distichol, canaliculatol, copalliferol A, copalliferol B, stremonoporol. Stilbenele tetramere sunt: vatticaffinol, miabenol A, miabenol B, kobofenol A, kobofenol B, ampelopsin H. Acestea se gsesc n Vitaceae, Fabaceae i mai ales n Diterocarpaceae.

II.2.2.4. Produi de condensare ai stilbenelor cu taninurile

Acetia au fost izolai din urmtoarele specii: Alluaudia dumosa Drake., Guibourtia coleosperma Benth. i n Sophora moorcoftiana. Dintre produii de condensare ai stilbenelor cu taninurile menionm: andriolul i metilandriolul, produi de condensare ai resveratrolului cu 3-metoxiflavan. Sophora moorcoftiana conine sophoraflavone H, I, J ce au n compoziie un rest de resveratrol.

II.2.3. Calconele

II.2.4. Flavonoidele

Att flavonoidele ct i flavan - 3 - olii sunt coninute ntr-o proporie apreciabil n seminele de struguri dar mai ales n vinul rou; s-a sugerat c ambele clase de compui ar putea fi responsabile de aa - numitul ,,paradox francez".

Sunt sintetizate de ctre plante plecnd de la aminoacizi aromatici -fenilalanina, tirozina - dar i din malonat. Structura de baz a flavonoidelor este reprezentat de nucleul flavanic, alctuit din 15 atomi de carbon aranjai n trei nuclee aromatice C6 Q3 C6, notate A, B, C. Clasele de flavonoide difer prin natura substituenilor de pe inelele A i B.Din vasta clas a acestor compui, cei care prezint interes sunt flavonele, flavanonele, izoflavonele, flavonolii,flavanonolii, flavan 3-olii i antocianozidele.Alte clase de flavonoide ncadreaz biflavonele, calconele, cumarinele.Taninurile hidrolizabile, proantocianii (oligomeri ai flavan 3 - olului) i lignanii sunt toi fenoli i sunt de obicei clasificai separat.Flavonoidele se regsesc n plant n general sub form de derivai glucosinolai i contribuie la realizarea nuanelor de albastru, portocaliu i galben n frunze, flori, fructe.Exceptnd fructele i legumele, compuii flavanoidici au mai fost pui n eviden n semine, nuci, cereale, unele condimente, att n plante medicinale ct i n vinul rou, ceai, bere (n cantiti reduse).Apigenina i luteolina se regsesc n cereale i n unele condimente (cimbru, rozmarin), n timp ce omologii lor hidrogenai, hesperitina i neringina care sunt aproape exclusiv prezeni n citrice. Quercetina i kaempferolul predomin n legume, fructe, mai precis n coaja acestora, cu cteva excepii. Izoflavonele sunt ntlnite cel mai adesea n legume - soia, fasolea, dar i n seminele de floarea soarelui.Flavan 3 - olii, + catechina, - epicatechina, - epigalocatechina i esterii lor cu acidul galic sunt prezeni n multe produse vegetale, dar cu precdere n frunzele de ceai.Antocianii sunt pigmeni naturali, gsii din abunden n fructe de pdure i struguri negri.Flavonoidele joac diferite roluri n viaa plantei datorit culorilor plcute pe care le imprim, flavonele, flavonolii i antocianii funcioneaz ca semnalizatori vizuali pentru insectele polenizatoare; fiind astringente, catechinele i ali flavonoli pot aciona i n sensul protejrii plantei mpotriva insectelor ce le pot produce daune; au rol de catalizatori n faza la lumin a fotosintezei i/sau ca reglatori ai canalelor de Fe implicate n fosforilare; pot funciona ca protectori contra stresului n celulele plantei prin neutralizarea ROS produse n procesul de transport de electroni; datorit proprietilor lor de a absorbi radiaiile UV protejeaz planta i anuleaz efectele ROS generate de aceste radiaii.Pe lng rolurile fiziologice n plant, flavonoidele sunt componente importante n dieta organismelor umane, cu toate c sunt n general considerate nonnutrieni.

ntr-adevar, nivelul aportului de flavonoide din alimentaie este considerabil mai mare comparativ cu vitamina C (70 mg/zi), vitamina E (7-10mg/zi), carotenoide ( caroten 2-3 mg/zi), putnd ajunge pn la 800 mg/zi, n funcie de consumul de legume i fructe sau vin rou, ceai (n special acestea din urm conin cantiti mari de fenoli totali, 200mg/pahar).Totui, variaiile n consumul acestor buturi sunt n principal responsabile pentru aportul diferit n cadrul dietelor din variate zone ale globului. O alt important surs de flavonoide este reprezentat de plantele medicinale i remediile homeopate.Evidene epidemiologiceAciune

Mai multe studii epidemiologice au demonstrat un efect protector mpotriva cancerului i bolilor de inim, n cazul consumului de fructe i legume proaspete.Consumatorii de cruditi au, n mod normal, un stil de via mai sntos, ceea ce se poate dovedii un factor important pentru rezistena la boli cronice. n ansamblu, fructele i legumele consumate n stare proaspt au un important rol n organism, datorat unei mari varieti a constituenilor lor: vitamine, minerale, fibre i muli ali compui chimici n categoria crora intr i flavonoidele.

Efectul protector al acestora din urm a fost demonstrat de studii in vitro ex. vivo i asupra animalelor de laborator. Din pcate, acelai lucru nu a putut fi clarificat n cazul organismului uman, rmnnd totui destul de controversat.n ceea ce privete datele biologice, precum nivelul sanguin al flavonoidelor i metaboliilor lor, nu sunt nc disponibile suficiente date, astfel nct este greu de determinat aciunea individual, dar i interaciunile lor cu ali compui.Corelaia dintre aportul de flavonoide i protecia mpotriva cancerului este, n prezent, incert. n acord cu unele studii epidemiologice nu exist nc o dovad precis c aportul de flavonoide ar proteja mpotriva unor forme de cancer. Un singur studiu a evideniat o proporionalitate invers ntre consumul de flavonoide i anumite orme de cancer.

Spre deosebire de acesta, un posibil rol de aprare mpotriva afeciunilor coronare realizat de un aport mai mare de flavonoide a fost pus n eviden de 4 din 6 studii efectuate.

Pe de alt parte, Knekt i colab., n cadrul unui studiu vast n Statele Unite, au observat o corelaie mai slab ntre consumul de flavonoide i rata mortalitii din cauza afeciunilor coronare.

Se pare c efectele flavonoidelor sunt mai pronunate n cazul mortalitii i nu morbiditii din cauza afeciunilor coronare.Activitate in vitro a antioxidanilor

Conform lui Halliwell i Gutteridge, mecanismele dup care se produce aciunea antioxidant pot include att stoparea formrii speciilor reactive ale oxigenului prin inhibiia enzimatic sau chelatarea elementelor implicate n acest proces de formare a ROS ct i protecia sistemelor de aprare a organismului.

Flavonoidele pot realiza ambele efecte descrise:

- inhib enzimele responsabile pentru producerea anionului superoxid (xantinoxidaze i protein kinaza C), precum i alte ciclooxigenaze, lipoxigenaze, microoxidaze microzomale, glutation S transferaze, succinoxidaze mitocondriale i NADH oxidaze, implicate n producerea radicalilor reactivi de oxigen. Anumite flavonoide chelateaz urmele de metale ce joac un rol important n metabolismul oxigenului - Fe, Cu ce determin reducerea peroxidului de hidrogen cu generarea unui radical hidroxil foarte activ:H2 O2 + Fe2+ HO + HO- +Fe3+De asemenea mai poate avea loc oxidarea lipoproteinelor cu densitate joas, proces mediat de ionul de Cu:LH L LOO, unde LH = LDL

Fr ndoial, trebuie amintit faptul ca aceti ioni metalici sunt eseniali pentru buna realizare a unor funcii importante n organismul uman, ca i constitueni ai hemoproteinelor i cofactori ai diferitelor enzime, incluzndu-le pe acelea implicate n aprarea antioxidativ (Fe pentru catalaz, Cu pentru ceruloplasmin i Cu, Zn pentru superoxid dismutaz).Situsurile de cuplare a urmelor de metale de ctre moleculele de flavonoide sunt gruprile catechol de pe nucleul B, gruprile hidroxil din poziia 3, gruparea 4 - oxo de pe nucleul heterociclic i gruprile 4 - oxo, 5 -hidroxil poziionate ntre nucleul heterociclic i nucleul A.

Dar, n principal, gruparea catechol rmne cel mai important situs de chelatare a metalelor, lucru demonstrat i de o deplasare batocrom mai pronunat observat la chelatarea ionului de cupru de ctre quercetin, comparativ cu chelatarea acestuia de ctre kaempferol (similar cu structura quercetinei, singura diferen intervenind la nivelul nucleului B, unde lipsete gruparea catechol).- datorit valorilor mici ale potenialelor redox (0,23 Fl-O-+RHRadicalul Fl-O- poate interaciona cu un al doilea radical rezultnd o structur chinonic stabil. Poate de asemenea interaciona i cu oxigenul, rezultnd chinona i un anion superoxid, cu o mai mare probabilitate dect s aib loc ntreruperea lanului de reacii.Ultima reacie poate avea loc n prezena unor nivele ridicate de ioni ai metalelor tranziionale i este responsabil pentru efectul nedorit, prooxidativ al flavonoidelor.Dar capacitatea antioxidant a acestor compui nu depinde numai de potenialul redox al perechii Fl-O- /Fl - OH, dar i de posibilele reacii paralele ale radicalului aroxil.

Neutralizarea superoxidului are o importan deosebit, deoarece acest radical este omniprezent n celulele aerobe i, n ciuda reactivitii sale sczute este un potenial precursor al radicalului hidroxil, mai agresiv, care intr n reaciile Fenton i Haber Weiss.

Pe lng scindri, flavonoidele pot stabiliza radicalii liberi implicai n procesele oxidative prin complexare.

Pentru stabilirea relaiei ntre strucutra flavonoidelor i capacitatea de a neutraliza anumii radicali s-au efectuat numeroase studii, cel mai recent fiind cel pus la punct de Rice Evans i colab. i care stabilete o ierarhie a acestei capaciti speciale.

Studiul cerceteaz abilitatea unui compus antioxidant de a determina neutralizarea, la pH = 7,4, unui radical cationic performant, cromofor al acidului 2,2 azinobis (3 etil benzotiazolin 6 - sulfonic) (ABTS+) n relaie cu acidul 6 hidroxi 2,5,7,8 tetrametil croman 2 carboxilic (Trolox), un analog solubil al vitaminei E.

Echivalentul capacitii antioxidante a troloxului (TEAC) se definete ca i concentraia de Trolox, cu aceeai poten antioxidant ca i a compusului de cercetat aflat n concentraie de 1mM.Jovanovic i colab. au adoptat aceeai tehnic de investigare ca aceea folosit pentru determinarea prioritii perechilor de radicali i a evaluat potenialul antioxidant in vitro al flavonoidelor pe baza potenialului reductor pentru 1 electron la pH =7 al perechii Fl - O- /Fl - OH.n contrast, jumtate din valoarea potenialului oxidativ al flavonoidelor (Ep/2) a fost propus ca parametru pentru evaluarea activitii de neutralizare a radicalilor liberi, ceea ce duce la concluzia ca ambele procese oxidative - att oxidarea

FlOH FlO + e-+ H+ct i donarea unui atom de hidrogen

FlOH FlO + e-+ H

Capacitatea TROLOX echivalent, mM, E7 (V) i Ep/2 (V).

Flavonoli

TEAC (m/M)E7 (V)Ep/2

Quercetina4,70,330,06

Kaempferolul1,340,750,12

Flavanonoli

TEAC (m/M)E7 (V)Ep/2

Taxifolina1,90,50,0615

Catechine

TEAC (m/M)E7 (V)Ep/2

Taxifolina0,40,570,16

Datele obinute din cele trei studii diferite comentate anterior pun clar n eviden c activitatea de neutralizare a radicalilor depinde de structura i de substituenii nucleului B. Mai specific, gruparea care genereaz aceast capacitate este gruparea catechol de pe nucleul B, care prezint proprieti de donor de electroni i legtura dubl ntre C2 C3, conjugat cu o grupare 4 - oxo , responsabil pentru delocalizarea electronului.Prezena unei grupri 3 hidroxil pe nucleul heterociclic crete activitatea flavonoidelor, n timp ce gruparea hidroxil sau metoxi n poziiile 3, 5, 7 ale nucleelor A i C par a determina o scdere a acesteia.Aceste trsturi structurale contribuie la stabilitatea radicalului aroxil, i.e. la aciunea antioxidant a flavonoidului de baz.

n concluzie, flavonolii i flavonele coninnd o grupare catechol pe nucleul B sunt mai active, iar flavonolii au poten superioar fa de flavonele corespunztoare, fapt datorat prezenei gruprii 3 hidroxi, prin glucozilarea creia activitatea scade mult. Prezena unei grupri hidroxil adiionale pe nucleul B, (grupul pirogalolului miricetina) determin creterea potenei antioxidante pe cnd prezenta unei singure grupe hidroxil pe acelai inel are efect contrar.Flavanonolii i flavanonele, din cauza lipsei conjugrii legturii duble din poziiile 2-3 cu gruparea 4 - oxo au aciune antioxidant mai slab.Prezena unei grupri pirogalol pe nucleul B (ca n cazul epigalocatechinei) sau galotilarea gruprii 3 hidroxi (rezultnd galatul de epigalocatechina) determin creterea activitii de neutralizare a radicalilorliberi.Antocianozidele i antocianii sunt echipotente cu quercetina i galatiicatechici, fapt demonstrat de o structur de tip catechol prezent pe inelul B. O nlturare a gruprii hidroxilice din poziia 3 de pe acest inel (ex. pelargonina) reduce activitatea antioxidant la nivelul kaempferolului ( care difer de quercetin prin prezena unei singure grupri OH pe nucleul B).Aceste date aduc nc o dovad c structurile de tip catechol ataate nucleului B sunt imperios necesare i determinante pentru capacitatea de neutralizare a radicalilor liberi de ctre flavonoide.n ceea ce privete izoflayonele, localizarea nucleului B n poziia 3 a ciclului heteroatomic are o deosebit importan n modificarea activitii flavonelor.Gruparea hidroxil n poziia 4' este necesar pentru pstrarea activitii, iar metoxilarea ei diminueaz aceast trstur. Inelul A - 5,7 dihidroxi este de asemenea important.Acest lucru a fost evideniat prin comparaia ntre.perechile genisteina/ daidzeina i biochaninia A/ formonetina. Ca i n cazul altor clase de flavonoide, glicozilarea influeneaz negativ capacitatea de neutralizare a efectelor radicalilor liberi.Un alt mod de a aprecia potenialul antioxidant al flavonoidelor se refer la abilitatea lor de a crete rezistena LDL izolate la oxidarea cu cupru, in vitro.Aceast apreciere pleac de la teoria oxidativ aterogenetic, care stipuleaz c nu LDL sau VLDL sunt aterogenetice, ci formele lor oxidate. ntr-adevr, mai multe studii au demonstrat c cele mai numeroase flavonoide provenite din diet au activitate efectiv asupra modificrilor in vitro ale LDL, rezultnd astfel c sunt prezente nainte de iniierea oxidrii. Ceea ce prezint interes este c cele mai active flavonoide posed trsturi asemntoare cu cele care garanteaz eficacitatea TEAC sau poteniale redox sczute.Potenialul antioxidant al flavonoidelor in vivo;

n ciuda numeroaselor evidene n ceea ce privete potenialul antioxidant in vitro al flavonoidelor, numai puine cunotine sunt disponibile despre eficacitatea lor in vivo i biodisponibilitatea n organismul uman.Recent a fost pus n eviden c flavonoidele provenite din alimentaie sunt absorbite astfel nct s produc un efect antioxidant. Conform celor mai muli autori, flavonolii, flavonele i izolavonele glicozidate sunt iniial hidrolizate agliconii respectivi. Dar, aa cum au demonstrat analize recente i glicozidele sunt bine absorbite fapt pus n eviden prin identificarea quercetin 3 - rutozidei n sngele voluntarilor, dup consumul de tomate i prin identificarea naringinei, (4, 5, 7 trihidroxiflavan -7- ramnozida) n urina subiecilor care au primit aceast substan pe cale oral.n ceea ce privete catechinele, galatul de epigalocatechin i galatul de epicatechin au fost semnalate n sngele subiecilor care au consumat ceai verde, extract de ceai verde decofeinizat i ciocolat.Dup consumul de vin rou au fost evideniate n plasm glucuronida i sulfaii conjugai ai + catechinei i 3-o- metilcatechina. Procentajul absorbiei, n mod normal, nu depete un mic procent din doza ingerat, determinat prin msurarea nivelelor sanguine ale flavonoidelor intacte i a compuilor lor de metabolizare.Compoziia alimentaiei poate fi un factor important ce ar afecta biodisponibilitatea. Proteinele se pot lega de polifenoli, reducndu-le disponibilitatea; n contrast, alcoolul are efect de mrire a acesteia, aa cum s-a pus n eviden dup consumul de vin rou fa de vinul rou desalcoolizat.O mai bun absorbie se face i n prezena grsimilor; catechinele din ceaiul verde, proantocianozidele din seminele de struguri i silibin sunt absorbite mult mai eficient atunci cnd sunt administrate mpreun cu complexe fosfolipidice dect singure.

n timpul absorbiei la nivel intestinal flavonolii, izoflavonele i catechinele sunt parial transformate n glucuronidele i sulfaii corespunztori. Aceast mic fraciune absorbit este metabolizat de enzimele hepatice, rezultnd compui cu polaritate mai mare care se excret n urin sau se ntorc n segmentul duodenal. Marea majoritate a flavonoidelor nu sunt absorbite ci sunt degradate de ctre microflora intestinal. Enzimele bacteriene catalizeaz mai multe reacii, incluznd hidroliza, deschiderea ciclului care conine oxigenul, dehidroxilare, decarboxilare.

Sunt produi mai muli acizi fenoli, depinznd de structura flavonoidelor implicate. Acetia pot fi reabsorbii i supui cojugrii i o-metilrii la nivelul ficatului i apoi reintrodui n circulaie. Acest aspect este relevant pentru protecia antioxidant, datorat, n principal, a dou aspecte. Primul se refer la faptul c acizii fenolici reprezint o mare parte a flavonoidelor (30 - 60%) iar cellalt la faptul c aceti acizi, datorit structurii de catechol, posed o capacitate de neutralizare a radicalilor liberi comparativ cu a precursorilor lor. Se deduce astfel c metaboliii iau parte la procesele de protecie antioxidat, cum de altfel este sugerat de valorile TEAC.Flavonoidele provenite din alimentaie i realizeaz efectul antioxidant mai nti la nivelul tractului digestiv, prin limitarea formrii ROS i neutralizarea acestora. Odat absorbite, fie ca gliconii sau glicozide fie c acizi fenoli (majoritatea), ei continu s manifeste efect antioxidant.Efectul in vivo poate fi evideniat prin msurarea nivelului potenialului total al plasmei dup o singura administrare de alimente, buturi sau extracte vegetale care conin mari cantiti de flavonoide.Flavonoidele plasmatice (i/sau metaboliii lor) i markerii specifici ai statusului antioxidant al organismului (malonaldehida, 8 -hidroxi doxiguanina) pot fi urmrite i n cazul n care se realizeaz consumul (n doze normale) pe o perioad mai lung de timp.n concordan cu aceste cercetri precum i cu studiile altor autori, s-a demonstrat c un consum ndelungat de ceai verde determin creteri ale nivelelor de -tocoferol n membranele eritrocitare i LDL. - Tocoferolul plasmatic i nivelul antioxidanilor hidrofili au rmas aproximativ constante, n timp ce tocoferolul a nregistrat o uoar cretere, probabil datorit proteciei la oxidare exercitat de -tocoferol.De asemenea, coninutul n acizi grai polinesaturai n membranele hematiilor a fost mai mare, confirmnd faptul ca -tocoferolul i -carotenul i catechinele (co-oxidani) acioneaz efectiv ca inhibitori ai lipid peroxidazei. Aceste rezultate sugereaz c, pe o perioad mai lung de timp, un aport mrit de ceai verde menine o concentraie mai mare de catechine i metabolii ai acestora n plasm, deci implic o cretere a nivelelor de vitamine lipofile. Modificarea se explic prin faptul c protecia antioxidant se realizeaz prin reacii n cascad, implicnd i prezena unor antioxidani endogeni, cu reactivitate diferit n funcie de polaritatea i potenialul lor redox. Mai precis, flavonoidele i metaboliii lor sunt capabile s reduc radicalii liberi ai oxigenului cu reactivitate mare, acetia transformndu-se n radicali aroxil, mai puin agresivi.Unii dintre acetia, cu E7 > 0,282 V, avnd caracter hidrofil, pot oxida ascorbatul, care este mai apoi regenerat de glutation.Aceasta ar putea fi explicaia faptului observat dup consumul unei singure doze de ceai verde (coninnd catechine libere sau sub form de compleci fosfolipidici) nivelul ascorbatului din plasm i glutationului total descresc. Procesul este influenat de concentraia plasmatic a catechinelor i determin creterea capacitii antioxidante a plasmei.Pe baza potenialului sau redox, -tocoferolul, E7= 0,5 V, poate fi oxidat de radicalii cu potenialul mai mare dect aceast valoare, devenind un potenial pro-oxidant.R + TOH RH + TO

TO- + LH(LDL) TOH + L LOO-Prevenirea acestor aciuni prooxidative depinde de eliminarea rapid a radicalului -tocoferoxil, ceea ce necesit prezena unui reductor YH capabil s interacioneze cu TO- lipofil. TO- + HY TOH + YHY trebuie s aib o capacitate reductoare puternic, avnd potenialul redox < 0,5 V, i genereaz un radical fr toxicitate, Y, prin aceasta prevenind formarea LOO-.Aceast funcie poate fi ndeplinit de o varietate de compui naturali cu capaciti reductoare, incluznd ascorbatul, 10-ubiquinolul, unele flavonoide i acizi fenoli.Dintre flavonoide, quercetina i catechinele din ceai (E7 = 0,22 V respectiv 0,4 V) sunt capabile s regenereze - tocoferolul din radicalul tocoferoxil: TO- + CatOH TOH + CatO-Aceasta explic creterea/meninerea nivelelor tocoferolului dup aport de ceai verde. Este uor de neles ca efectele acestui proces necesit un consum consistent de ceai, pe parcursul unei lungi perioade de timp. S-a demonstrat experimental c are loc recuperarea antioxidantului hidrofil.n ceea ce privete protecia LDL in vivo, situaia a fost clarificat de mai multe studii. Vinson i colab. au postulat c polifenolii coninui n vinul rou i ceai sunt absorbii i protejeaz att LDL ct i VLDL mpotriva oxidrii prin creterea nivelului de lipoproteine. Cu toate acestea, alte cteva cercetri in vivo au obinut rezultate contrare. Astfel s-a ajuns la ideea c polifenolii circul legai de proteinele plasmatice altele dect LDL fiind inacapabili s protejeze.Flavonoidele provenite din alimentaie sunt o important surs de antioxidani, la un aport de aproximativ 800 mg/zi. n ultimii ani s-au publicat numeroase articole despre capacitatea antioxidant a flavonelor in vitro i s-au stabilit corelaii ntre capacitatea antioxidant i structura chimic.Totui, eficacitatea in vivo a flavonoidelor este mai puin nsemnat deocamdat, posibil i datorit cunotinelor limitate despre farmacocinetica proceselor n care sunt implicate.Doar recent s-a demonstrat ca o mic parte din flavonoidele introduse n organism sunt absorbite sub form de aglicon sau sub form glicozidat, n timp ce marea parte sunt degradate rapid la diferii acizi fenoli.Ambele forme, flavonoidele i metaboliii lor au aciune antioxidant in vivo, care implic diferit antioxidanii fiziologici, rezultnd un efect asupra -tocoferolului i -carotenului.II.2.4.1. Flavonozidele

Flavonele, n sens larg, sunt substane fenolice naturale, de tip C6-C3-C6, derivai ai 2-fenilbenzopiranului (flavanului) sau 3-fenilbenzopiranului (izoflavanului), substituii cu diferii radicali: OH, OCH3, CH3, C2H5, isopentenil etc (13).

Figura 26 - Structura chimic a flavonelor

n funcie de gradul de nesaturare a segmentului C2-C3 i de prezena gruprii OH la C3, se deosebesc: flavone, flavonoli, flavanone, flavanololi.

Pn n prezent se cunosc aproximativ 3000 de astfel de compui, dintre care circa 500 se gsesc n stare liber, n plantele superioare (criptogame vasculare, gimnosperme, angiosperme); foarte rar se ntlnesc la alge (ex. peonidolul n specii de Chlamidomonas). Au fost semnalate n insecte i la fluturi unde provin din polenul sau nectarul florilor cu care acetia se hrnesc. Cele mai rspndite sunt flavonozidele, antocianozidele i catecholii (13).

Flavonoidele se gsesc att sub form de agliconi, ct i sub form glicolizat. Partea glucidic poate fi alctuit din una sau mai multe oze legate C-O-C la oricare OH de pe nucleu sau C-C.

Agliconii flavonozidelor sunt solubili n alcool, acetat de etil, solveni apolari, insolubili n ap. Datorit hidroxizilor fenolici sunt solubili i n soluii alaline. Heterozidele sunt solubile n ap, alcool concentrat i diluat, solubile specific n acetat de etil, aceton, insolubile n solveni polari (13).

Figura 27 - Reacia Shibata

Heterozidele se gsesc dizolvate n sucul celular, iar agliconii predomin n esuturile lignificate (vase de lemn, fibre, ideoblaste, cuticul etc.)

Figura 28 - Structura chelailor

Identificarea flavonozidelor poate fi efectuat datorit:

reducerii gruprii ceto de la C4 (reacia cianidolului sau Shibata);

formrii chelailor ntre gruparea ceto de la C4 i oxidrilii vicinali, n poziiile ,,orto i ,,para sau ntre dou grupri OH fenolice, de pe nucleul B (poziia para) (13);

transformrii fenolilor n fenoxizi, cu itensificarea culorii galbene .

II.2.4.2. Antocianozidele

Antocianozidele sunt pigmeni vegetali, derivai ai flavanului, care dau culoarea roie, violet sau albastr florilor, fructelor i altor organe; varietatea culorii este imprimat de pH-ul sucului celular i de microelementele din organismul vegetal, cu care se combin (7).

Antocianii sunt derivai hidroxilai, metoxilai i acilai ai 2-fenilbenzopirenului, glicozidai sau nu.

Heterozidele sunt substane solide, cristalizate, colorate n funcie de pH n rou, violet sau albastru, solubile n ap, alcool, ap acidulat i alcool acidulat (formeaz sruri de oxoniu colorate n rou intens, insolubile n solveni organici apolari). Antocianidolii sunt substane solide, cristalizate, colorate ca i

Figura 43 - Comportamentul antocianozidelor n soluie, la pH-uri diferte

antocianozidele, solubile n alcool concentrat sau diluat i n solveni organici apolari, la pH = 7, sunt insoluboli n ap.

Figura 44 - Structura unor antocianidoli

Identificarea antocianozidelor se bazeaz pe virajul culorii la trecerea de la pH acid la pH bazic. Modificarea culorii este insoit i de modificri structurale.

II.2.4.3. Proantocianozidele

Proantocianidolii (proantocianidinele), cunoscui sub denumirea de leucoantociani, sunt derivai ai flavan-3,4-diolilor.

Elementul structural de baz l formeaz flavan-3,4-diolii. Datorit mari lor reactiviti, imprimat de nucleul benzenic i de hidroxilul de la C4, se formeaz un carbocation care reacioneaz cu uurin cu atomii de carbon nucleofili C6 i C8 ai flavan-3-olilor i mult mai dificil cu carbocationii altor flavani-3,4-dioli, formnd oligo- i polimeri (12).

Figura 41 - Transformarea proantocianidolilor n antociani

Cei mai simpli dimeri sunt proantocianidolii B1, B2, B3 i B4. Acetia sunt constituii din dou subuniti. Dintre ele una este reprezentat de un flavan-3,4-diol, iar cealalt de 2R, 3R (-) epicatechol sau de 2R, 3S (+) catechol i sunt legate C4-C8 n configuraie (proantocianidol B1 i B2) sau (proantocianidol B3 i B4). Acetia exist n stare liber i au o larg rspndire (12).

Figura 42 - Structura proantocianidolilor

Proantocianidolii sunt substane solide, incolore, cristalizate sau amorfe, solubile n ap, aceton, alcool, acetat de etil, insolubile n solveni organici apolari. Prezint tendin mare de polimerizare, polimerii fiind insolubili.

Identificarea proantocianidolilor se bazeaz pe peacia cu acizii minerali la cald, cnd se transform n antociani (se observ apariia sau sau itensificarea culorii roii a soluiei extractive).

II.2.4.4. Taninurile nehidrolizabile

Taninurile nehidrolizabile sunt substane organice polifenolice (derivai ai 3-hidroxiflavanului, poliesteri), cu o mas molecular cuprins ntre 500 i 5000 de daltoni.

Taninurile catechice sunt derivai flavanici, mono- sau polimeri, constituii din entiti flavan-3-ol legate C-C.

Dup orientarea oxidrilului de la C3 se deosebesc dou serii de compui:

seria 2-R, 3-S (cu OH-ul de la C3 orientat ) care cuprinde afzelecholul, catecholul i galocatecholul;

seria 2-R, 3-R (cu OH-ul de al C3 orientat ) sau epi, incluznd epiafzelecholul, epicatecholul i epigalocatecholul.

Dintre acetia, catecholul i epigalocatecholul, galocatecholul i epigalocatecholul sunt uniti structurale de baz ale oligo- i polimerilor, care se formeaz prin condensarea succesiv a monomerilor. Legtura interflavanic este, n majoritatea cazurilor, de tip C4-C8 i aproape ntotdeauna trans n raport cu hidroxilul de la C3 (12).

Figura 36 - Structura chimic a taninurilor catechice

Taninurile mixte sunt esteri ai acidului galic cu catecholul, epicatecholul, galocatecholul i epigalocatecholul (galatul de catechol sau de epicatechol i galatul de galocatechol sau de epigalocatechol). Monomerii flavanici se pot lega i cu acidul cafeic, cu formare de lactone (12).

Taninurile se gsesc localizate n toate organele plantei; se acumuleaz n cantiti foarte mari n scoare (Cinchona sp., Quercus sp., Salix sp., Castanea sp.), organe subterane (Krameria triandra Ruiz et Pav.), lemn (Acacia catechu Willd.), frunze (Hamamelis virgiana L.), flori (Rosa centifolia L., Rosa galica L.), fructe imature (Sobus acuparia L., Rhamnus catharthica L.), semine (Cola nitida Schott et Endl., Cola acuminata Schott et Endl.), formaiuni patologice (Gallae). Sunt dizolvate n sucul celular (vacuolar), libere sau combinate cu proteine, alcaloizi, mucilagii.

Taninurile sunt substane solide amorfe. Combinaiile cu mas molecular mic pot cristaliza, fiind incolore. Taninurile se dizolv n ap la cald (mai greu la rece, formnd soluii coloidale, solubilitatea variind cu gradul de condensare), n alcool, aceton, acetat de etil; sunt insolubile n eter, cloroform, benzen, eter de petrol, sulfur de carbon i n ali solveni organici apolari. Fiind fenoli, au caracter reductor (reduc reactivii Tollens, Fehling, KMnO4, H2O2, etc.) i dau coloraii cu srurile de fer (III): verde negricioas taninurile catechice.

Taninurile sunt considerate a fi antioxidani cu aciune superioar, oxidarea lor ulterioar ducnd la oligomerizare, prin cuplarea gruprilor fenolice i creterea numrului de grupri reactive, particularitate ce nu a fost observat pn acum n cazul flavonoidelor.

II.2.5. Cumarinele

Cumarinele sunt substane lactonice naturale, cu structur -benzopironic, rezultate prin deshidratarea acizilor o-hidroxi-Z-cinamici, glicozidate sau neglicozidate. n funcie de structura lor chimic, cumarinele se pot clasifica n:

cumarine simple i dimeri;

furanocumarine;

piranocumarine;

izocumarine;

cumestani.

Cu excepia cumarinei, majoritatea acestor compui sunt derivai de substituie ai -benzopironei cu grupri hidroxil, metoxil, izoprenil, fenil etc. Cumarinele pot prezentao structur simpl, uneori dimerizat, sau o structur mai complex, rezultat prin sudarea la nucleul benzenic a unui heterociclu (furan sau piran) (7).

Figura 32 - Structura chimic a diferitelor tipuri de cumarine

Furanocumarinele sunt compui triciclici lactonici naturali n urma sudrii unui ciclu furanic poziiile (1, 5) sau (2, 3) la un benzopiren poziiile, (6,7) pentru a forma stucturi lineare (psoralen, bergapten, xantotoxin) i n poziiile (7,8) pentru a forma structuri unghiulare (izopsoralen sau angelicin, izobergapten).

Dup modul de nchidere al ciclului furanic se cunosc trei tipuri de structuri furanocumarinice i anume:

Seria normal (6,7-furanocumarina = psoralen);

Seria izo (7,8-fuanocumarina = izopsoralen);

Seria allo (5,6-furanocumarina = allopsoralen)

Substituia se face de obicei la C5, C8, dar i la C3 sau pe nucleul furanic cu hidroxil, metoxi, dimetialil sau alte terpene.

Cumarinele n general sunt substane solide, cristalizate, sublimabile, cu miros caracteristic, aromat care emit radiaii caracteristice n UV (fluoresce verzuie, albastr sau violet, mai intens dup alcalinizare) (12).

Furanocumarinele (psoralen, bergapten, xantotoxin, imperatorin, izopimpinelin) fiind compui hidroxilai i neglicozidai sunt solubili n solveni apolari. Nucleul benzenic le confer ns i un grad redus de hidrofilie fiind deci solubili i n alcool. Toate cumarinele, propriu zise prezint spectre de absorbie n UV caracterizate printr-o larg band n zona lungimii de und de 320 nm, pe cnd furanocumarinele prezint o deplasare a benzii caracteristice ctre 300-310 nm n IR benzile de absorbie caracteristice sunt plasate la 1740 i 1620 cm 1 (12).

Figura 33 - Structura unor furanocumarine

Extracia cumarinelor glicozidate se efectueaz cu ap sau alcool diluat. Soluia extractiv se concentraz pn la reziduu.

Cumarinele nehetozidice pot fi extrase cu eter, cloroform, benzen, alcool sau NaOH soluie 1N (R) la cald. n acest caz se purific prin precipitare cu HCl (pH-4 , 5) i dizolvarea precipitatului n eter sau alcool. (1)

Identificarea cumarinelor se poate face prin determinarea fluorescenei n UV prin reacia Feigl-Anger-Frehden sau prin cuplare cu compui aromatici diazotai.

1. Determinarea fluorescenei n UV.

Prin alcalinizare (pH=9-10) datorit scindrii lactonei, cumarinele genereaz sruri ale hidroxiacizilor aromatici solubile n ap intens fluorescente n UV.

Figura 34 - Transformarea cumarinei n sare a acidului hidroxamic

Aciune

Unele cumarine diminu permeabilitatea capilar i cresc debitul limfatic i venos (melilotozida); venoton i vasoprotectoare (esculozida); antibiotic (novobiocina); bacteriostatic (umbeliferona); coleretic (izofraxozida, scopoletolul, umbeliferona); diuretic cu favorizarea eliminrii acjdului uric (fraxozida); antimitotic de tip mitoclazic; analgezic (dafnoretina); antiinflamatoare (calofilolida, inofilolida, dafnoretina); antispastic (visnagina, samidina); anticoagulant, trombolitic (dicumarol); oestrogen (cumestrol); fotosensibilizatoare (psoralen, bergapten, xantotoxina); ecranante mpotriva radiaiilor solare (cumarina i derivai), antihelmintic, inhibitoare a formrii celulelor gigante n urma infectrii cu virusul HIV a culturilor de celule (licoarilcumarina din Glycyrrhiza uralensis).Unele produse vegetale coninnd furanocumarine. {Angelica sp., Pastinaca sativa L., Heracleum sphondylium L., Ruta graveolens L.) determin fenomene de fototoxicitate (dermite acute nsoite de bule i vezicule, uneori chiar de o hiperpigmentare care poate persista mult timp). Acestea apar dup contactul cu plantele respective i expunerea la soare, fiind favorizate de umiditate. Toxicitatea acestora se datoreaz cicloadiiei la dublele legturi din poziiile 3,4 sau 4',5' a bazelor pirimidinice din structura ADN. Cicloadiia poate fi mono- sau difuncional. n acest ultim caz se pot forma legturi ncruciate ntre perechile de baze ale acizilor nucleici, fenomenul inducnd leziuni ale genomului manifestate prin proprieti mutagene i cancerogene.Prezint fototoxicitate i preparatele de parfumerie, cosmetologie i dermatologie, care conin uleiuri volatile cu derivai cumarinici. Dintre acestea menionm uleiurile volatile obinute din pericarpul sau florile unor specii de Citrus, n special Aetheroleum Bergamottae sau extractele din diferite Apiaceae (Apium graveolens L., Angelica archangelica L., Foeniculum vulgare Mill, Anthriscus sp., Daucus carota L., Pastinaca sativa L., Heracleum sphondylium L.), Rutaceae (Ruta graveolens L., Dictamnus albus L.) Asteraceae (Achilea millefolium L.), Moraceae (Ficus carica L.), Chenopodiaceae (Chenopodium sp.) i Rosaceae {Agrimonia eupatoria L.).Fototoxicitatea furancumarinelor este mai mare n seria normal dect n seria izo sau allo, la derivaii 5 i 8-metilai sau metoxilai fa de cei hidroxilai; alungirea radicalului alchilic descrete activitatea fotosensibilizatoare.Rolul protector (ecranant) fa de radiaiile U.V. al unor cumarine se explic prin creterea concentraiei de acid urocainic, cu rol filtrant, eliminat prin transpiraie, de la 10 mg % (concentraia normal) la 500 -1000 mg % i prin formarea de melanozomi (granule de melanin polimerizat, legat de proteine) care se depun n jurul nucleului celulelor epidermice sub form de clopot. Acidul urocainic rezult prin dezaminarea histidinei, component al cheratinei din epiderm iar melanina se formeaz prin oxidarea tirozinei sub aciunea tirozinazei.Cumarinele simple mai ales derivaii polihidroxilai i metoxilai, absorb cea mai mare parte a radiaiilor nocive (290 - 320 nm lungime de und), lsnd libere radiaiile din zona UV-A (320 - 400 nm lungime de und) care pigmenteaz pielea (UV - B = 280 - 320 nm i UV - C = 200 - 280 nm produc eriteme).Aciunea anticoagulant se datoreaz. reducerii sintezei hepatice a factorilor de agregare plachetar, prin blocarea vitaminei K (cu rol de coenzim).

Piranocumarinele se gsesc n Ammi visnagae fructus, alturi de furanocromone, unde contribuie la aciunea antispastic a produsului vegetal. Visnadina prezint o aciune de 3 ori mai puternic dect papaverina i este un coronaro - dilatator superior kelinei.Unele izofuranocumarine, cum sunt aflatoxinele elaborate de unele ciuperci inferioare (Aspergillus), care se dezvolt pe produse vegetale insuficient uscate sau meninute n condiii de temperatur i umiditate necorespunztoare, sunt cancerigene.

Intrebuinri. Cumarinele sunt utilizate n tratamentul trombozelor venoase i pulmonare, infarctului miocardic acut pentru prevenirea emboliilor la bolnavii cu fibrilaie atrial, n chirurgia cardiac, boli vasculare cerebrale (dicumarolul i derivaii si); la confecionarea de ecrane anti-UV, n tehnic i n industria optic, ns absorbia radiaiilor i din zona de pigmentare (rein radiaiile pn la 370 nm) le reduce aplicaiile; la obinerea unor preparate pentru bronzat.n tratamentul fotochimioterapic (PUVA-terapie) al psoriazisului i al leucodermiilor (vitiligo), se administrez oral preparate cu xantotoxin n doze unice de 20 40 mg i dup 2 ore se expune bolnavul la lumin solar sau la lumin UV-A (320 380 nm lungime de und), timp de 10 15 minute. Procedura comport riscul inducerii cancerului de piele i pulmonar i poate determina tulburri digestive, mbtrnirea accelerat a cristalinului, fotosensibilizare. Este contraindicat la femei gravide i copii, la bolnavii cu insuficien renal i cardiac.

Cumarinele antibacteriene (novobiocina) se folosesc n: septicemii, pneumonie, abces pulmonar, endocardit, limfangit, enterit, flegmon, furunculoze, piodermite, osteomielit etc. Aciune. Unele cumarine diminu permeabilitatea capilar i cresc debitul limfatic i venos (melilotozida); venoton i vasoprotectoare (esculozida); antibiotic (novobiocina); bacteriostatic (umbeliferona); coleretic (izofraxozida, scopoletolul, umbeliferona); diuretic cu favorizarea eliminrii acjdului uric (fraxozida); antimitotic de tip mitoclazic; analgezic (dafnoretina); antiinflamatoare (calofilolida, inofilolida, dafnoretina); antispastic (visnagina, samidina); anticoagulant, trombolitic (dicumarol); oestrogen (cumestrol); fotosensibilizatoare (psoralen, bergapten, xantotoxina); ecranante mpotriva radiaiilor solare (cumarina i derivai), antihelmintic, inhibitoare a formrii celulelor gigante n urma infectrii cu virusul HIV a culturilor de celule (licoarilcumarina din Glycyrrhiza uralensis).Unele produse vegetale coninnd furanocumarine. {Angelica sp., Pastinaca sativa L., Heracleum sphondylium L., Ruta graveolens L.) determin fenomene de fototoxicitate (dermite acute nsoite de bule i vezicule, uneori chiar de o hiperpigmentare care poate persista mult timp). Acestea apar dup contactul cu plantele respective i expunerea la soare, fiind favorizate de umiditate. Toxicitatea acestora se datoreaz cicloadiiei la dublele legturi din poziiile 3,4 sau 4',5' a bazelor pirimidinice din structura ADN. Cicloadiia poate fi mono- sau difuncional. n acest ultim caz se pot forma legturi ncruciate ntre perechile de baze ale acizilor nucleici, fenomenul inducnd leziuni ale genomului manifestate prin proprieti mutagene i cancerogene.Prezint fototoxicitate i preparatele de parfumerie, cosmetologie i dermatologie, care conin uleiuri volatile cu derivai cumarinici. Dintre acestea menionm uleiurile volatile obinute din pericarpul sau florile unor specii de Citrus, n special Aetheroleum Bergamottae sau extractele din diferite Apiaceae (Apium graveolens L., Angelica archangelica L., Foeniculum vulgare Mill, Anthriscus sp., Daucus carota L., Pastinaca sativa L., Heracleum sphondylium L.), Rutaceae (Ruta graveolens L., Dictamnus albus L.) Asteraceae (Achilea millefolium L.), Moraceae (Ficus carica L.), Chenopodiaceae (Chenopodium sp.) i Rosaceae {Agrimonia eupatoria L.).Fototoxicitatea furancumarinelor este mai mare n seria normal dect n seria izo sau allo, la derivaii 5 i 8-metilai sau metoxilai fa de cei hidroxilai; alungirea radicalului alchilic descrete activitatea fotosensibilizatoare.Rolul protector (ecranant) fa de radiaiile U.V. al unor cumarine se explic prin creterea concentraiei de acid urocainic, cu rol filtrant, eliminat prin transpiraie, de la 10 mg % (concentraia normal) la 500 -1000 mg % i prin formarea de melanozomi (granule de melanin polimerizat, legat de proteine) care se depun n jurul nucleului celulelor epidermice sub form de clopot. Acidul urocainic rezult prin dezaminarea histidinei, component al cheratinei din epiderm iar melanina se formeaz prin oxidarea tirozinei sub aciunea tirozinazei.Cumarinele simple mai ales derivaii polihidroxilai i metoxilai, absorb cea mai mare parte a radiaiilor nocive (290 - 320 nm lungime de und), lsnd libere radiaiile din zona UV-A (320 - 400 nm lungime de und) care pigmenteaz pielea (UV - B = 280 - 320 nm i UV - C = 200 - 280 nm produc eriteme).Aciunea anticoagulant se datoreaz. reducerii sintezei hepatice a factorilor de agregare plachetar, prin blocarea vitaminei K (cu rol de coenzim).

Piranocumarinele se gsesc n Ammi visnagae fructus, alturi de furanocromone, unde contribuie la aciunea antispastic a produsului vegetal. Visnadina prezint o aciune de 3 ori mai puternic dect papaverina i este un coronaro - dilatator superior kelinei.Unele izofuranocumarine, cum sunt aflatoxinele elaborate de unele ciuperci inferioare (Aspergillus), care se dezvolt pe produse vegetale insuficient uscate sau meninute n condiii de temperatur i umiditate necorespunztoare, sunt cancerigene.

.

II.2.6. Cromonele

II.2.7. Lignani

Aciune: lignanii cu structur aril naftalenic i dibenzocicloctanic au proprieti antimitotice, unele dintre acestea fiind folosite n chimioterapia antineoplazic (derivai de semisintez ai podofilotoxinei) sau aflndu-se n curs de experimentare (matairezinolul din Forsythia viridissima Vahl. i Podocarpus spicatus i austrobailignanele din Austrobaileya scandens White, substane active fa de carcinomul Eagle i cel nasofaringian KB, n leucemia limfocitara P-388); altele au proprieti imunostimulatoare (cleistantina din Cleisthanthus coelinus, eleuterozida E i siringarezinolul din Viscum album L. i Eleutherococcus senticosus Maxim), antimicrobiene (L-azarinina din. Asarum sp. i guajacina = acid dehidroguajairetic din Guajacum officinale L.), hepatoprotectoare (flavanonol lignanii - americanin A