FeSBE 2012

Resumo: 20.001

A DESNUTRIÇÃO PROTÉICA INTRAUTERINA AFETA DIFERENTEMENTE O METABOLISMO LIPÍDICO DE RATOS MACHOS NA VIDA ADULTA.

Autores 1MENDONÇA, L. A. C.

1, PINHEIRO, D. F.

1, VICENTINI-PAULINO, M. L. M.

1, SARTORI, D. R.

S. 1 Fisiologia - UNESP-IBB

Apoio Financeiro: FAPESP

Resumo Objetivos Vários estudos suportam a hipótese da existência da programação fetal, segundo a qual condições adversas durante a gestação interferem na programação e desenvolvimento fetal de tecidos. Em humanos, a desnutrição durante a gestação está associada à maior incidência de doenças na vida adulta como a obesidade e doença metabólicas. Contudo, ainda não está claro se a pré-programação fetal decorrente da restrição protéica sofrida pela mãe durante a gestação pode afetar diferentemente o metabolismo lipídico e a predisposição ao desenvolvimento de sobrepeso ou obesidade na vida adulta de ratos machos e fêmeas. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da desnutrição protéica no período pré-natal sobre os níveis de lipídios plasmáticos (CL=colesterol total e TG=triglicerídeos) e hepáticos e os depósitos de gordura (visceral e perigonadal) em ratos machos e fêmeas adultos (16 semanas de idade). Métodos Ratas fêmeas Wistar, após confirmação de prenhez, foram distribuídas em um dos dois grupos experimentais que diferiram quanto à dieta até o nascimento da prole: Grupo C (controle, N=8) - animais alimentados com dieta normoprotéica (17%PB) e Grupo R (restrito, N=8) - animais alimentados com dieta hipoprotéica (6%PB). Durante a lactação, as ratas-mãe foram alimentadas com ração normoproteica. Ao desmame, um filhote macho e uma fêmea de cada mãe foram mantidos em gaiolas individuais sendo alimentados com ração normoproteíca ad libitum até atingirem 16 semanas de idade. Os animais foram sacrificados por decapitação e em seguida o sangue coletado para a determinação dos lipídios plasmáticos. Os depósitos de gordura visceral (VIS) e perigonadal (PG) e o fígado foram retirados, pesados, sendo o fígado congelado para posterior determinação de gordura. A comparação entre os grupos R e C foi feita pelo teste T ( P < 0,05).O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética CEEA/IBB (277/2011). Resultados Comparado com o grupo controle, machos (M) e fêmeas (F) que sofreram restrição de proteínas na vida fetal não apresentaram diferenças no peso corporal (M=422,32±14,29 x 411,89±15,09 e F=250,10±12,28 x 254,33±9,06 g, para C e R, respectivamente) e no ganho de peso no período de 3 a 16 semanas de idade (M=374,82±13,49 x 374,56±20,98 e F=206,15±14,90 x 211,43±10,38 g). No entanto, machos nascidos de mães restritas na gestação (R) apresentaram aumento no teor de gordura hepática (4,76±0,56 x 5,43±0,50 %, para C e R, respectivamente) e das gorduras PG (4,37±0,85 x 5,67±0,37g) e VIS (2,24±0,37 x 2,83±0,29g) bem como teores plasmáticos elevados de colesterol total (61,37±5,30 x 71,97±6,45 mg/dl) e triglicerideos (70,16±17,02 x 86,73±10,37mg/dl). Nas fêmeas que sofreram restrição protéica na vida fetal, entretanto, nenhuma diferença foi observada nos teores de lipídeos plasmáticos (CL= 66,36±10,47 x 68,46±12,86 e TG=67,59±11,76 x 82,05±15,97mg/dl), e de gordura hepática (4,48±0,81 x 4,49±0,83 %) e nem nos

depósitos de gordura VIS (1,75±0,53 x 2,33±0,57g) e PG (3,69±1,45 x 4,89±1,50g) quando comparadas com os animais do grupo controle. Conclusão Os resultados obtidos no presente estudo mostram que a desnutrição protéica intrauterina afeta diferentemente o metabolismo lipídico de machos e fêmeas na idade adulta.

FeSBE 2012

Resumo: 20.002

Ausência de leptina causa deficiência na formação de múltiplos circuitos neuronais relacionados com o controle do balanço energético

Autores 1CARDINALI, L. I.

1, NAGAISHI, V. S.

1, JUNIOR, J. D.

1 Departamento de Fisiologia e Biofísica -

USP

Apoio Financeiro: FAPESP (2010/18086-0) e International Brain Research Organization (IBRO,

2012 Return Home Fellowship).

Resumo Objetivos Tem sido descrito que o hormônio leptina regula a formação de projeções de neurônios localizados no núcleo arqueado para o núcleo paraventricular do hipotálamo (PVH). Nesses estudos, empregaram-se técnicas ex vivo de implante de traçadores neuronais, como DiI. Contudo, essas técnicas apresentam limitações, como variações na difusão do traçador, inespecificidade das células atingidas e limitação na distância percorrida pelo traçador. Nosso objetivo foi gerar modelos de camundongos geneticamente modificados para o estudo de projeções neuronais de células que expressam o receptor de leptina (LepR). Posteriormente, investigamos o efeito da deficiência de leptina na formação de projeções neuronais de células que expressam o LepR para neurônios de segunda ordem regulados pela leptina. Métodos Número da aprovação do presente projeto (008/2012) no comitê de ética em experimentação animal do ICB/USP. Com o intuito de desenvolver técnicas mais precisas para o estudo de alterações nas projeções neuronais, utilizamos camundongos que expressam a enzima Cre recombinase condicionada à expressão do gene que codifica o LepR (camundongo LepRcre). Os camundongos LepRcre foram cruzados com animais que expressam a proteína fluorescente vermelha tdTomato, condicionada à expressão da Cre. Portanto, o resultado são camundongos na qual apenas células que expressam o LepR apresentam expressão da proteína tdTomato (camundongo LepRcre/tdTomato, n = 5), permitindo a visualização de fluorescência no pericário e em suas projeções neuronais. Para estudar o efeito trófico da leptina nesse modelo, camundongos LepRcre/tdTomato foram cruzados com animais knockout para a leptina (camundongos ob/ob, n = 4). Resultados Confirmando o resultado de trabalhos anteriores, observamos que o PVH de camundongos ob/ob recebe uma menor densidade de inervação proveniente de neurônios que expressam o LepR (11,6±0,7), em comparação a camundongos controles (Con, 26,9±4,0, P=0,01). Entretanto, também encontramos deficiência na inervação de diversas outras áreas, que não haviam sido descritas anteriormente, incluindo o núcleo central da amígdala (Con: 58,3±7,1; ob/ob: 36,3±1,9; P=0,03), o núcleo do trato solitário (Con: 2,3±0,1; ob/ob: 1,7±0,1; P < 0,01) e o núcleo periventricular anteroventral (Con: 9,5±1,6; ob/ob: 1,2±0,6; P < 0,01). Os efeitos tróficos da leptina são específicos na formação de projeções neuronais, visto que o número de células que expressam o LepR e a quantidade total de proteína tdTomato (Con: 1,00±0,08; ob/ob: 1,45±0,09; P < 0,01) encontrada no hipotálamo de camundongos ob/ob foi maior comparado a animais controle. Conclusão Demonstramos que camundongos geneticamente modificados que expressam proteínas fluorescentes em populações específicas de células podem ser utilizados para o estudo de alterações na formação de circuitos neuronais. Além disso, nossos resultados demonstram que o efeito trófico da leptina afeta um número maior de populações neuronais do que havia sido previamente demonstrado.

Resumo: 20.003

FeSBE 2012

AS RELAÇÕES ENTRE A GLICONEOGÊNESE HEPÁTICA E A OXIDAÇÃO DE ÁCIDOS GRAXOS EM MODELO DE OBESIDADE ANIMAL INDUZIDO POR DIETA DE CAFETERIA.

Autores

1CARREÑO, F. O.*

1, JÚNIOR, A. S. M.**

1, CASTRO-GHIZONI, C. V.**

1, GASPARIN, F. R. S.**

1, MEWES, J. M.*

1, CONSTANTIN, J.

1, MASQUETTO, F. B.*

1, ISHII-IWAMOTO, E. L.

1

Departamento de Bioquímica - UEM

Apoio Financeiro: CNPq, CAPES

Resumo Objetivos A obesidade é normalmente acompanhada de anormalidades no metabolismo de carboidratos e lipídios, afetando diretamente o fígado. Desta forma, torna-se importante investigar se há perturbações nas inter-relações metabólicas entre a gliconeogênese e o metabolismo dos ácidos graxos, já que este é um importante fenômeno fisiológico no jejum. Assim, o objetivo central deste estudo foi o de avaliar a gliconeogênese, na ausência e na presença de ácidos graxos exógenos, em fígados de ratos com obesidade induzida por dieta de cafeteria. Métodos 40 ratos machos Wistar, com 21 dias, tratados de acordo com o Comitê de Conduta Ética da Universidade Estadual de Maringá (parecer 113/2010) foram divididos em dois grupos Cafeteria (CAF) e Controle (CT) receberam dieta hipercalórica e/ou dieta padrão e tiveram o ganho de peso monitorado por 14 semanas. Ao final do tratamento os fígados dos animais, em jejum de 24 horas, foram perfundidos na presença de substratos gliconeogênicos exógenos (lactato 2,0 mM + piruvato 0,2 mM) bem como na ausência e na presença de ácidos graxos exógenos (estearato e octanoato). O perfusado efluente foi quantificados para: produção de glicose, corpos cetônicos e CO2. O consumo de oxigênio foi monitorado durante todo o experimento. A quantidade de tecido adiposo, teor de lipídeos e de proteínas hepáticas totais também foram determinados. As análises foram realizadas pelo teste t de Student e foi adotado p < 0,05 como critério de significância. Resultados O ganho de peso foi maior no CAF (n=21) 665±4.40 comparado ao CT (n=21) 434±8.20 (g), bem como a quantidade de tecido adiposo: CAF (n=10) 8.96 ± 0.49 e CT (n=10) 4.45 ± 0.28 (g de tecido adiposo/100g de peso corporal). O teor de lipídeos totais, foi três vezes maior nos animais obesos: CAF (n=4) 58,72±7,82 e CT (n=4) 19,16±0.77 (mg/g de peso úmido de fígado), não houve, entretanto, diferença no teor de proteínas: CAF (n=4) 173.5 ± 4.39 e CT (n=4) 177.5 ± 6.33 (mg/g de peso úmido de fígado). A capacidade gliconeogênica está diminuída quando da infusão de L- lactato + piruvato: CAF (n=4) 4.58±0.40 e CT (n=4) 7.84 ± 0.82 (μmol/g fígado), porém o estímulo na gliconeogênese após infusão do ácido graxo foi maior: CAF (n=4) 2.25±0.7 e CT (n=4) 0.51 ± 0.10 (μmol/g fígado). O consumo de oxigênio basal foi menor nos animais obesos: CAF (n=8) 15.3±0.34 e CT (n=9) 18.74 ± 0.66 (μmol/g fígado). A produção de CO2 , a partir do ácido graxo, foi menor tanto na ausência de substrato gliconeogênico: CAF (n=4) 10.7±0.60 e CT (n=4) 14.22 ± 1.02 (μmol/g fígado), quanto na presença: CAF (n=5) 4.75±0.4 e CT (n=4) 6.30 ± 0.54 (μmol/g fígado). A capacidade cetogênica a partir de substratos endógenos também foi menor: CAF (n= 9) 4.04±0.21 e CT (n= 8) 4.84 ± 0.19 (μmol/g fígado). Conclusão Na condição de jejum e na presença de substratos gliconeogênicos e ácidos graxos exógenos elevados, a produção de glucose é mais activa em ratos CAF do que nos CT, mas o consumo de oxigênio e a atividade do ciclo do ácido cítrico estão diminuídos. Todas estas alterações metabólicas parecem estar relacionados, sendo um desvio dos intermediários do ciclo cítrico para o citosol, provavelmente, um local principal de desregulação metabólica. A maior síntese endógena de ácidos graxos e o acúmulo de glicogênio podem contribuir para o desenvolvimento de esteatose e outras alterações metabólicas decorrentes da dieta de cafeteria, incluindo dislipidemia e hiperglicemia. Apoio Financeiro: CNPq,CAPES.

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Resumo: 20.004

INHIBITORY EFFECT OF TUMOR NECROSIS FACTOR α ON HEPATIC GLUCONEOGENESIS IS DEPENDENT ON THE PRECURSOR

Autores 1ROCHA, A. F.

1, LIBONI, T. F.

1, MIKSZA, D. R.

1, SOUZA, C. O.

1, KURAUTI, M. A.

1, SILVA,

F. F. 1, BORBA-MURAD, G. R.

1, SOUZA, H. M.

1 Ciências Fisiológicas - UEL

Apoio Financeiro: Fundação Araucária

Resumo Objetivos Tumor necrosis factor α (TNFα) is a cytokine involved in many metabolic responses in both normal and pathological states. Increased production of TNFα in cancer has been correlated to many metabolic abnormalities associated with this disease. Here, we examined the influence of TNFα on hepatic gluconeogenesis from various precursors of glucose. Métodos TNFα (10 μg/Kg) was administered intravenously in rats, and after 6 h, gluconeogenesis from alanine, lactate, glutamine and glycerol, and several related metabolic parameters, were evaluated in liver perfusion. Control rats were injected with saline. All protocols with animals were approved by the Ethics Committee for Animal Experimentation of the State University of Londrina, with registration number 116/09. Resultados Administration of TNFα, compared to saline, reduced the hepatic glucose production from alanine ( p < 0.001) (1,978 ± 0,546 vs 4,518 ± 0,314 μmol.g -1 ) and from lactate ( p < 0.01) (4,853 ± 0,915 vs 11,81 ± 1,727). TNFα, compared to saline, also increased ( p < 0.01) the liver production of pyruvate (10,17 ± 0,9467 vs 5,352 ± 0,8263 μmol.g -1 ), tended to increase the lactate production (7,537 ± 0,8941 vs 5,891 ± 0,9362 μmol.g -1 ) and had no effect on the urea production (9,414 ± 1,531 vs 9,937 ± 1,224 μmol.g -1 ) from alanine and on the pyruvate production (9,422 ± 1,132 vs 10,60 ± 1,181 μmol.g -1 ) from lactate. In addition, TNFα did not alter the hepatic glucose production from glutamine (11,27 ± 0,9625 vs 8,736 ± 1,027 μmol.g -1 ) nor from glycerol (7,051 ± 1,089 vs 6,941 ± 0,8790 μmol.g -1 ), compared to saline. Conclusão It can be concluded that TNFα inhibited hepatic gluconeogenesis from alanine and lactate, but not from glutamine and glycerol, evidencing a precursor-dependent effect of TNFα on gluconeogenesis. These results reproduce the inhibition of gluconeogenesis that has been observed in perfused liver of Walker-256 tumor-bearing rats, suggesting the involvement of TNFα on changes of the gluconeogenesis induced by tumor.

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Resumo: 20.005

COMPARISON OF PARAOXONASE (PON1) AND OF MYELOPEROXIDASE (MPO) ACTIVITY IN OBESE AND EUTROPHIC CHILDREN

Autores

1HIX, S.

1, BRAGATTO, F. B.

1, SEVILHANO, L. V.

1, CORREIA, M. S. G.

3, SOUZA, F. I. S. D.

4,

FONSECA, F. L. A. 2, D’ALMEIDA, V.

3, SARNI, R. O. S.

1 Morfologia e Fisiologia - FMABC,

2

Psicobiologia - UNIFESP, 3 Pediatria e Puericultura - FMABC,

4 Laboratório de Análises Clínicas -

FMABC

Apoio Financeiro: NEPAS e FAPESP

Resumo Objetivos Evaluate the seric activity of paraoxonase 1 (PON1), an antiatherogenic HDL-associated enzyme, in children and teenagers with severe obesity, comparing them with eutrophic controls and with lipid parameters. Compare the levels of the pro-oxidative seric enzyme myeloperoxidase (MPO) in children and teenagers with severe obesity with eutrophic controls. Métodos A transversal study was performed in children and teenagers between 7 and 15 years from the Obesity and Dyslipidemia Ambulatory of the Pediatry Department of Faculdade de Medicina do ABC, selected from a group enrolled previously in a homocysteine study. The participants, 22 obeses (9 girls, 13 boys) and 5 eutrophic (3 girls, 2 boys), were submitted to anthropometric, nutritional, economic and social evaluations. Fasting glucose levels, total seric cholesterol and fractions, seric triglycerides and serum paraoxonase activity and myeloperoxidase levels were measured. Resultados Serum activity of PON1 enzyme using paraoxon as substrate in the presence of salt (PONSAL) in obese and eutrophic children were respectively 183±25 U/mL and 301±85 U/mL and without addition of sodium chloride (PON) 150±45 U/mL and 135±19 U/mL respectively. Arilesterase activity (ARI) of PON1 using phenylacetate as substrate in obese and eutrophic children was respectively 73±6 U/mL and 93±16. Although no statistical differences between PON activities were found, owing to the small sample (22 obese and 5 eutrophic controls) and the large variation of the PON1 activity, PON1 activity showed a tendency to be lower in the obese group than in the eutrophic group. We also compared the relation of PON1 activity/HDL of the obese and eutrophic groups. The median values of the relations PONSAL/HDL in obese and eutrophic controls were respectively 3,16 and 6,40 and of PON/HDL 8,76 and 59,69. The median values of the relations ARI/HDL in obese and eutrophic controls were respectively 1,22 and 1,81. The relations PON activity/HDL were lower in the obese group compared with the controls groups, but only the relation PON/HDL was statistically significantly lower in the obese groups (p=0,013). The levels of MPO on the other hand were higher in the obese group (578±135 ng/mL) than in the control group (203±55 ng/mL). CEP 3432007. Conclusão Obesity is a multifatorial disease, whose incidence has increased not only among adults but in children as well and which increases cardiovascular risk. Obese children showed a tendency of a higher pro-oxidant profile than eutrophic children as seen by their lower activities of the antioxidant PON enzyme and higher levels of the pro-oxidative enzyme MPO. The correct orientation and treatment of obese children may avoid the development of adult obesity and of other associated diseases.

FeSBE 2012

Resumo: 20.006

Hepatocyte Growth Factor Plays a Key Role in Insulin Resistance-Associated Compensatory Mechanisms

Autores

1ARAÚJO, T. G.

1, OLIVEIRA, A. G.

1, CARVALHO, B. M.

1, GUADAGNINI, D.

2, PROTZEK, A.

O. P. 2, BOSCHERO, A. C.

1, SAAD, M. J. A.

1 Medicina Interna - FCM - UNICAMP,

2 Biofísica e

Fisiologia - IB - UNICAMP

Apoio Financeiro: Fapesp and CNPQ

Resumo Objetivos Insulin resistance is present in obesity and in type 2 diabetes, and is associated with islet cell hyperplasia and hyperinsulinemia but the driving forces behind this compensatory mechanism are incompletely understood. Previous data have suggested the involvement of an unknown circulating insulin resistance-related beta-cell growth-factor. In this context, looking for candidates to be a circulating factor, we realized that hepatocyte growth factor (HGF) is a strong candidate as a link between insulin resistance and increased mass of islets/hyperinsulinemia. Métodos For study this, we used male Wistar rats randomly assigned to two diet groups: either standard rodent chow and water ad libitum, or a cafeteria diet, for 60 days (DIO-60D). Second, the rats were treated with a pharmacological inhibitor of HGF receptor (SU11274) or purified recombinant active mouse HGF (rHGF). To perform the dose-response evaluation of treatment with rHGF, Swiss mice at six weeks were treated for five days with rHGF at concentrations of 0.05 mcg, 0.5 mcg, or 5.0 mcg/Kg/day. Approaches such as stereologic estimation of beta-cell mass, islet isolation and culture of pancreatic islets, ELISA, tissue extraction and immunoblotting also were realized. All animal protocols of the experiment were approved by the Animal Care and Use Committee at the State University of Campinas – UNICAMP (n.1962-1) and are in accordance with the guidelines for the Care and Use of Laboratory Animals. Resultados Our data showed: a) a strong and consistent correlation between HGF and the compensatory mechanism in animal model of insulin resistance (r=0.85, P < 0.0001 for HGF and insulin levels association; r=0.83, P < 0.0001 for HGF levels and beta-cell mass association); b) HGF increases beta-cell mass in a dose-dependent manner (beta-cell mass of 0.76 ± 0.25, 1.16 ± 0.11 and 1.51 ± 0.20 mg for 0.05, 0.5 and 5.0 mcg of recombinant HGF, respectively); c) blocking HGF shuts down the compensatory mechanisms (reduction of 48% ( P < 0.05) in beta-cell mass of SU11274 treated obese group when compared with non-treated obese group); d) an increase in HGF levels seems to precede the compensatory response associated with insulin resistance, indicating that these events occur in a sequential mode (increase of 2-fold ( P < 0.05) on HGF levels of obese group since 4th week in comparison with control group) . Additionally, blockages of HGF receptor (Met) worsen the impaired insulin-induced insulin signaling in liver of diet-induced obesity (DIO) rats. Conclusão Overall, our data indicate that HGF is a growth factor playing a key role in islet mass increase and hyperinsulinemia in DIO rats, and suggest a protective effect of the HGF–Met axis on insulin signaling in the liver.

FeSBE 2012

Resumo: 20.007

TUMOR NECROSIS FACTOR DECREASED THE SUPPRESSIVE EFFECT OF INSULIN ON HEPATIC GLUCOSE PRODUCTION AND GLYCOGENOLYSIS STIMULATED BY CAMP

Autores

1,1,1,1ROCHA, A. F. D.

1,1,1,1, LIBONI, T. F.

1,1,1,1, MIKSZA, D. R.

1,1,1,1, KURAUTI, M. A.

1, SOUZA,

H. M. D. 1,1,1,1

, SILVA, F. 1,1,1,1

, BORBA-MURAD, G. R. 1,1,1,1

, SOUZA, H. M. D. 1 Ciências

Fisiológicas - UEL

Apoio Financeiro: Capes

Resumo Objetivos Thus, the aim of this study was to investigate the influence of TNFα on the suppressive effect of insulin on hepatic glucose production (HGP) and glycogenolysis stimulated by cyclic adenosine monophosphate (cAMP). Métodos For this purpose, TNFα (10 μg/Kg) was endovenously administered in rats and after 1 or 6 h the livers were submitted to in

situ perfusion with cAMP (3 M), in the presence or absence of physiological (20 U/mL) or supraphysiological (500 U/mL) concentrations of insulin. All protocols were approved by the committee on animal experimentation at the state university of londrina CEEA 116/09. Resultados Control rats were injected with saline. Administration of TNFα, compared to saline, 1 h before perfusion, completely

abolished ( p < 0.05) the suppressive effect of insulin 20 U/mL on HGP (-5,756 ± 0,9135 vs -13,75 ± 2,714 mol.g-1) and

glycogenolysis (-6,887 ± 1,274 vs -15,35 ± 2,716 mol.g-1) stimulated by cAMP. In addition, administration of TNFα 6 h before perfusion, compared to saline, tended to reduce these effects of insulin on HGP (-9,827 ± 1,388 vs -14,51 ± 3,409

mol.g-1) and glycogenolysis (-13,82 ± 2,259 vs -16,96 ± 2,634 mol.g-1). However, the administration of TNFα, 1 h before

perfusion, only tended to reduce the inhibitory effect of insulin 500 U/mL on HGP (-14,34 ± 3,412 vs -16,65 ± 4,471 mol.g-

1) and glycogenolysis (-16,33 ± 3,212 vs -20,10 ± 4,095 mol.g-1) stimulated by cAMP and its administration, 6 h before

perfusion, did not influence these effects of insulin on HGP (-15,81 ± 1,735 vs -15,28 ± 2,095 mol.g-1) and glycogenolysis

(-16,27 ± 2,639 vs -14,67 ± 2,092 mol.g-1), compared to saline Conclusão In conclusion, TNFα decreased the suppressive effect of insulin on HGP and glycogenolysis stimulated by cAMP, 1 h after its administration, an effect that occurred for physiological concentration, but not for supraphysiological concentration of insulin. These results suggest that TNFα may be one of the factors that contributes to the increase of HGP in obesity, type 2 diabetes and cancer and indicate that high concentrations of insulin can reduce the inhibition of TNFα on hepatic effects of insulin.

FeSBE 2012

Resumo: 20.008

EFEITOS DA DESNUTRIÇÃO PROTÉICA PÓS-NATAL NO FUNCIONAMENTO DO EIXO HIPOTÁLAMO-HIPÓFISE-ADRENAL EM RATOS SUBMETIDOS AO ENRIQUECIMENTO AMBIENTAL

Autores 1SOARES, R. D. O.

2, RORATO, R.

2, ELIAS, L. L. K.

1, ALMEIDA, S. S.

1 Psicologia -

FFCLRP/USP, 2 Fisiologia - FMRP/USP

Apoio Financeiro: CAPES e CNPq

Resumo Objetivos Comparar em ratos submetidos à dieta pobre em proteína (M - 6% de proteína) e dieta controle (C - 16 % de proteína) os efeitos do enriquecimento ambiental, em relação às concentrações de corticosterona plasmática, expressão de receptores de glicocorticóides no hipocampo, e o desempenho no LCE aos 36 dias de idade. Métodos Número do processo aprovado na Comissão de Ética no Uso de Animais da USP-RP: 09.1.516.53.8. Ratos Wistar machos foram divididos no dia do nascimento, em dois grupos de acordo com a dieta (M e C) e subdivididos em grupos conforme a manipulação ambiental (E – estimulados e N – não estimulados). A manipulação ambiental (enriquecimento ambiental) foi realizada durante 1 hora por dia,entre o 8ºe 35º dia de vida. Após o teste do LCE, os animais foram decapitados e tiveram o seu sangue coletado e o cérebro removido. Para a análise de corticosterona plasmática (CORT), foi usada a técnica de radioimunoensaio. Para a quantificação dos receptores glicocorticóides (GR)e CRF, no hipocampofoi realizada a análise quantitativa de expressão gênica por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. Resultados Em relação aos dados de peso, animais M apresentaram menor ganho de peso corporal quando comparados com os animais C ( p < 0,001). Ratos M permaneceram uma maior porcentagem de tempo [F(1,44)=9,08; p < 0,01] e entraram [F(1,44)=9,01; p < 0,01] mais nos braços abertos em relação a C no teste do LCE. Animais ME apresentaram percentagem de tempo nos braços abertos (6% ± 2%) próximas aos animais CN (8% ± 2%) no teste do LCE. O grupo ME possui níveis de CORT (3,57±0,83) próximos de CE (2,07±0,58). A quantidade de receptores GR no hipocampo em ratos M é diferente em comparação com C (t(10)=2,37; p < 0,05) após a exposição ao LCE; e diferente entre os grupos M e ME (t(11)=4,48; p < 0,05). Conclusão Os dados do presente estudo sugerem que animais desnutridos se expõem a mais situações de risco quando comparados com controle. Também é possível observar que o enriquecimento ambiental, realizado no período crítico de amadurecimento do SNC foi eficaz para amenizar as alterações produzidas pela desnutrição no comportamento de avaliação de risco observado no LCE. Os dados também mostraram que a desnutrição e o enriquecimento ambiental podem alterar a resposta de estresse mediada pelo eixo HPA após exposição do teste do LCE. Desta maneira, a estimulação ambiental confere ao cérebro, mais precisamente às células do hipocampo, uma proteção diferencial em relação aos efeitos deletérios da desnutrição protéica.

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Resumo: 20.009

EFEITOS DE DIFERENTES DIETAS COM RESTRIÇÃO PROTEICA SOBRE O PROCESSO DE REPARO EM LESÕES CUTÂNEAS, INDUZIDAS EXPERIMENTALMENTE, EM FÊMEAS JOVENS DE RATOS WISTAR (Rattus novergicus).

Autores 1PENTEADO, M. V.

1, PEROTTI, T. L.

1, SCABORA, J. E.

1, ESQUISATTO, M. A. M.

1 Programa

de Pós-graduação em Ciências Biomédicas - UNIARARAS

Apoio Financeiro: Fundação Hermínio Ometto

Resumo Objetivos Os efeitos da dieta com restrição proteica têm sido investigados em diferentes modelos experimentais. Contudo, estudos envolvendo o reparo de feridas cutâneas em fêmeas jovens são escassos na literatura. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos da dieta normo (NP – 17% em peso) e hipoproteica (HP – 6% em peso) na organização estrutural do tecido cicatricial durante o processo de reparo de lesões cirúrgicas experimentais em fêmeas de ratos Wistar. Métodos O período experimental dos animais utilizados neste estudo foi dividido em quatro partes: gestacional(G), lactação (L - 20 dias), puberdade (P - 35 dias) e experimental (E - 15 dias). Quarenta e cinco fêmeas de ratos Wistar (Rathus novergicus) foram selecionados a partir de quatro diferentes gestações em três grupos de 15 animais tratados, durante 70 dias, nas seguintes condições: G1: G - mãe com dieta NP/L - mãe NP/P+E –NP; G2: G+L–NP/P+E-HP e G3:G+L+P+E – HP. Após anestesia, com o auxílio de um punch, uma lesão de 8mm de diâmetro foi feita na pele da região do dorso de todos os animais aos 55 dias de idade. Cinco animais de cada grupo foram sacrificados no 3º, 9º e 15º dias para remoção da área de lesão e preparo do tecido para análise estrutural e morfométrica. Foi aferida, em cada amostra, o número de células fibroblásticas e inflamatórias (n. em 104μm2), número de vasos neoformados (n. em 104μm2), espessura do epitélio (μm) e a porcentagem ocupada por fibras colágenas birrefringentes em relação à área de tecido. Os dados foram comparados estatisticamente utilizando ANOVA e pós-teste de Tukey ( p < 0,05). O protocolo experimental foi aprovado pelo CEUA/UNIARARAS (Processo n. 079/2011). Resultados O tecido de reparo apresentou diferenças importantes entre os grupos estudados. A quantidade de células fibroblásticas nos períodos experimentais de G1 foi 13,1 ± 2,8, 16,9 ± 4,5, 18,7 ± 5,1, respectivamente. Em G2, os dados levantados foram 12,2 ± 3,8, 15,1 ± 4,6, 17,4 ± 3,8. Em G3, os valores encontrados foram 7,7 ± 2,7, 11,8 ± 1,3, 11,7 ±2,8. Os valores apresentados por G3 foram significativamente menores em relação aos demais em todos os tempos experimentais. O número de células inflamatórias encontrado em G1 foi 21,5 ± 2,9, 17,8 ± 2,5, 8,5 ± 1,9, respectivamente. Em G2, os dados foram 20,9 ± 4,1, 17,1 ± 3,2, 9,7 ± 2,3. Em G3, os valores foram 14,8 ± 2,4, 13,9 ± 2,4, 15,2 ±3,9. Os valores de G3 foram semelhantes entre os períodos experimentais e significativamente menores que os observados em G1 e G2. A espessura da epiderme em G1 foi 6,9 ± 2,6, 14,9 ± 3,5, 17,7 ± 3,5, respectivamente. Em G2, os dados apurados foram 7± 2, 14,8 ± 2,7, 18,9 ± 3,8. Em G3, os valores foram 6,8 ± 2,7, 7,8 ± 2,5, 15,9 ±2,9. G3 apresentou valores significativamente menores que os observados nos outros grupos. A porcentagem de fibras colágenas birrefringentes, observada nas amostras do tecido em reparo, atingiram, respectivamente, 29±5; 48±9 e 78±5, para G1; 34±5; 47±2 e 81±6, para G2 e, 18±6; 21±6 e 24±5, para G3. Os valores de G3 foram significativamente menores que os apurados no G1 e G2, em todos os tempos experimentais. Não foram observadas áreas de necrose ou calcificação em todos os grupos. As fibras elásticas não apresentaram modificações significativas em relação aos grupos e tempos experimentais. Conclusão Os dados levantados neste trabalho demonstraram que a dieta com restrição proteica retarda o processo de reparo de lesões cutâneas experimentais em fêmeas jovens de ratos.

FeSBE 2012

Resumo: 20.010

AVALIAÇÃO DO ESTRESSE OXIDATIVO EM FÍGADOS ESTEATÓTICOS DE CAMUNDONGOS MACHOS E FÊMEAS COM OBESIDADE INDUZIDA POR DIETA DE CAFETERIA.

Autores

1GASPARIN, F. R. S.**

1, CASTRO-GHIZONI, C. V.**

1, CARREÑO, F. O.*

1, MEWES, J. M.*

1,

MASQUETTO, F. B.* 1, CONSTANTIN, J.

1, FERNANDES, L.*

1, COMAR, J. F.

1, BRACHT, A.

1,

ISHII-IWAMOTO, E. L. 1 DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA - UEM

Apoio Financeiro: CAPES

Resumo Objetivos Dietas inadequadas, ao longo de um período prolongado, estão associadas à obesidade e ao desenvolvimento de fígado esteatótico, que pode promover anormalidades metabólicas e funcionais. No entanto, não está claro se as alterações metabólicas hepáticas da obesidade, induzida por dietas hipercalóricas, representam lipotoxicidade, proteção e/ou uma resposta adaptativa para uma nova condição metabólica. Uma estreita associação entre obesidade e produção de radicais livres tem sido descrita. Considerando o menor volume de relatos na literatura, envolvendo o gênero feminino, este estudo pretendeu correlacionar medidas de marcadores do estresse oxidativo, em fígados de camundongos machos e fêmeas, com obesidade induzida por dieta de cafeteria. Métodos 64 camundongos machos e fêmeas da linhagem Swiss de 21 dias de idade, tratados de acordo com o Comitê de conduta ética (parecer 113/2010), foram divididos em 4 grupos e receberam dieta de cafeteria e/ou dieta balanceada por 14 semanas: cafeteria macho (CafM) e fêmea (CafF); controle macho (CM) e fêmea (CF). Ao final, os animais pesando entre 45 e 60 g foram decapitados, seus fígados removidos e utilizados para as seguintes análises: substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), tióis totais (TT), níveis de glutationa reduzida (GSH), atividade da catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx) e superóxido dismutase (SOD) foram analisados em homogenato; determinação da geração de ROS em mitocôndrias isoladas. Foi adotado p < 0,05 como critério de significância e as análises foram realizadas pelo teste t de Student. Resultados Para TBARS os valores em nmol MDA/mg proteína (n=6) foram: CafM (1,45 ± 0,085); CM (1,075 ± 0,06); CafF (1,80 ± 0,08) e CF (1,46 ± 0,09). Os valores de TT em nmol grupos SH/mg de proteína (n=6) foram: CafM (0,05±0,003); CM

(0,03±0,001); CafF (0,06 ± 0,002) e CF (0,08 ± 0,01). Os valores em g GSH/mg de proteína (n=6) foram: CafM (1,74± 0,075); CM (2,01 ± 0,1); CafF (2,69 ± 0,15) e CF (3,53±0,22). As atividades catalíticas (n=6) em µmol/min/mg de proteina da CAT, GPx e em USOD/mg proteina para SOD resultaram, respectivamente: CafM (547,7 ± 23.6; 118,8 ± 8,2; 1,817 ± 0,20), CM (665,2 ± 30,28; 203,1 ± 13,42; 1,607 ± 0,18); CafF (117,4 ± 2,99; 40,19 ± 4,08; 1,80 ± 0,20); CF (163,4 ± 6,08; 94,35 ± 2,07; 1,72 ± 0,128). A geração de ROS mitocondrial apresentou os seguintes valores na ausência de inibidores; na presença de rotenona; rotenona+antimicina; aminotriazol: CafM (0,298 ± 0,03; 0,326±0,02; 0,341±0,01; 0,359 ± 0,03), CM (0,227 ± 0,01; 0,226 ± 0,01; 0,261 ± 0,01; 0,291 ± 0,04), CafF (0,428 ± 0,04; 0,408±0,02 e 0,443±0,01; 0,373 ± 0,01) e CF (0,303 ± 0,05; 0,305 ± 0,02; 0,362 ± 0,03; 0,284 ± 0,02 nmols/min.mg; n=4). Conclusão Há uma boa correlação entre a instalação da obesidade e o estresse oxidativo, sendo muito mais proeminente em animais do gênero feminino. O aumento dos níveis de marcadores do estresse oxidativo (TBARS, TT e ROS mitocondrial) e a redução da atividade do sistema antioxidante (atividade da CAT e GPx; níveis de GSH) são indicadores desta análise. Estudos em andamento, em nosso Laboratório, sugerem que o estresse oxidativo maior, detectado em fêmeas, pode ser resultante de uma atividade mitocondrial aumentada, já que várias alterações mitocondriais morfológicas e funcionais parecem estar envolvidas no processo da obesidade. Apoio financeiro: CAPES

FeSBE 2012

Resumo: 20.011

EFEITO DA HOODIA GORDONII NO METABOLISMO DE RATOS WISTAR SUBMETIDOS A UMA DIETA HIPERLIPÍDICO-PROTEICA.

Autores 2,3

TEIXEIRA, L. B. 2, OLIVEIRA, W. S.

2, SOUSA, J. C.

2, de LIMA, A. C.

2, ABREU, M. T. C. L.

2,

Thedei Jr., G. 2, JUNIOR, G. T.

2 PROPEPE - UNIUBE,

3 Patologia - UFTM

Apoio Financeiro: PAPE-UNIUBE e FAPEMIG

Resumo Objetivos Dados da literatura indicam que o extrato de Hoodia gordonii, uma planta utilizada pelos Xhomani Bushmen da África com o objetivo de suprimir a fome e a sede antes de longas jornadas de caça, possui atividade supressora do apetite via inibição da ingestão alimentar, com consequente perda de peso, independente do tipo de dieta. Assim sendo, esse trabalho teve como objetivo determinar os efeitos da suplementação da H. gordonii a uma dieta hiperlipídico-proteica (DHLP), consumida por ratos Wistar adultos, sobre os seguintes parâmetros: peso corporal, consumo alimentar, peso dos órgãos e parâmetros bioquímicos. Métodos O protocolo experimental foi aprovado pelo Comitê de ética em experimentação animal da UNIUBE (nº 0016/2010). Vinte e um ratos Wistar adultos pesando 170 gramas foram submetidos durante oito semanas a uma dieta hiperlipídico-proteica pobre em carboidratos (DHLP, 45% proteína, 45%, TAG, 0,1% CHO), para indução de obesidade. Em seguida os animais foram divididos nos grupos EC, que passou a receber dieta balanceada, EE, que permaneceu com a DHLP e EH, que passou a receber a DHLP acrescida de H. gordonii (22mg/dia/animal). O peso e consumo alimentar dos três grupos foi monitorado por seis semanas. Resultados O ganho de peso absoluto (em gramas) foi de 35,85±14,66, 121,33±42,46 e 94,57±34,13 para os grupos EC, EE e EH, respectivamente. O consumo alimentar foi de 154,88±16,74, 114,45±7,73 e 102,02±5,80 para os grupos EC, EE e EH respectivamente, com diferença estatisticamente significativa apenas na comparação do grupo EC com os demais. Os valores de glicose plasmática (mg/dL) foram 252,4±94,24, 230,3±94,0 e 234,8±106,8 para os grupos EC, EE e EH respectivamente, não tendo sido observado diferença significativa entre os grupos. Os valores de colesterol total (mg/dL) foram de 91,24±26,5, 99,5±37,5 e 80,9±22,2 para os grupos EC, EE e EH respectivamente, não ocorrendo diferença estatisticamente significativa. Os valores de HDL (mg/dL) dos grupos EC, EE e EH foram de, respectivamente, 60,0±8,9, 65,6±11,6 e 50,6±10,8, observando uma diminuição ( p < 0,05) nas dosagens de HDL do grupo EH quando comparado com os grupos EC e EE. Os valores de LDL (mg/dL) dos grupos EC, EE e EH foram de 22,0±10,4, 32,9±27,3 e 16,4±8,7 respectivamente, não havendo diferença significativa entre os grupos. Conclusão Contrariando alguns dados da literatura, esses resultados sugerem que a adição do extrato de H. gordonii a uma dieta hiperlipídico-proteica não teve efeito na redução do peso corporal ou na supressão do apetite. Além disso, a suplementação não afetou os parâmetros glicose, colesterol total e LDL de animais alimentados com a DHLP, mas levou a redução nos níveis de colesterol HDL, sugerindo que a dieta é um fator que afeta a possível eficácia desse extrato.

FeSBE 2012

Resumo: 20.012

A ASSOCIAÇÃO DE VITAMINA E AO ÓLEO DE PEIXE NA DIETA DIMINUI A PRODUÇÃO DE TNF-α E ALTERA PARÂMETROS DA MECÂNICA RESPIRATÓRIA EM RATOS ASMÁTICOS.

Autores 1MIRANDA, D. T. D. S. Z.

1, ZANATTA, A. L.

1, MACHADO, P.

1, VIEIRA, F. F.

1, FOGAÇA, R.

T. H. 2, MAURER, J. B. B.

1, NISHIYAMA, A.

1 Fisiologia - UFPR,

2 Bioquímica - UFPR

Apoio Financeiro: UGF/SETI-Gov PR (CV 43-08)

Resumo Objetivos Suplementar a dieta de ratos asmáticos com óleo de peixe associado à vitamina E (α-tocoferol) e avaliar a concentração de citocinas inflamatórias no tecido pulmonar, a contração do músculo liso dos anéis de traquéia e a complacência pulmonar estática. Métodos Ratos Wistar machos (6-7 semanas) com 220 ± 20 g de massa corpórea (m.c.) foram aleatoriamente separados em cinco grupos: controle (C), suplementado com óleo de peixe (OP), asmático (A), asmático suplementado com óleo de peixe 1g/kg m.c. (AOP), asmático suplementado com óleo de peixe 1g/kg m.c. mais α-tocoferol 100mg/kg m.c. (AOPT). A suplementação foi realizada por 21 dias. A asma foi induzida nos grupos A, AOP e AOPT (sensibilização e desafio antigênico pulmonar com ovalbumina), culminando com o pico da inflamação no 22º dia. Nesse dia, os ratos foram anestesiados com uretana (dose letal de 3 mg/g de m.c.). Foram coletadas amostras do lobo inferior direito dos pulmões para dosagem das concentrações de TNF-α e IL-1β por kits de ELISA comercialmente disponíveis. Para avaliação da força de contração do músculo liso das vias aéreas, o tecido muscular isolado do anel de traquéia foi exposto à acetilcolina e adaptado a um transdutor de força (AD instruments), e a variável “ganho” de força foi registrada. A avaliação da complacência pulmonar estática foi realizada através da quantificação da alteração de pressão com a insuflação do pulmão dos animais experimentais com volumes conhecidos de ar, por meio de uma cânula acoplada a um transdutor de pressão (AD instruments). A pressão pulmonar apresenta uma relação inversa à complacência. Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal (CEEA) da UFPR – protocolo nº 468. Os dados foram expressos em média ± erro padrão da média e analisados por ANOVA. Resultados A concentração de TNF-α: aumentou ( < i> p < /i> < 0 ,05) no tecido pulmonar do grupo A (174,6 pg/ml ± 23,9, n=9) em comparação com o grupo C (92,2 pg/ml ± 8,2, n= 30); não diminuiu no grupo AOP (151,0 pg/ml ± 9,9, n=17), ficando maior ( < i> p < /i> < 0 ,05) que no grupo C; diminuiu ( < i> p < /i> < 0 ,05) no grupo AOPT (108,1 ± 8,9, n=15). A concentração de IL-1β: foi maior ( < i> p < /i> < 0 ,05) no grupo A (2832 pg/ml ± 482,1, n=11) em relação ao grupo C (762,7 pg/ml ± 36,47, n=8), mas não foi modificada pela suplementação. A contração do músculo liso traqueal, representada pelo ganho de força: diminuiu ( < i> p < /i> < 0 ,05) no grupo A (0,2812 ± 0,0556 gr/f, n=4) quando comparada ao grupo C (0,5298 ± 0,0281, n=6); diminuiu ( < i> p < /i> < 0 ,05) no grupo AOP (0,3025 ± 0,0418, n=4) em relação ao grupo C; aumentou ( < i> p < /i> < 0 ,05) no grupo AOPT (0,5838 ± 0,0222, n=4) em relação aos grupos A e AOP, e ficou igual ao grupo C; diminuiu ( < i> p < /i> < 0 ,05) no grupo OP (0,3558 ± 0,0499, n=4) em relação ao grupo C. A complacência pulmonar: diminuiu ( < i> p < /i> < 0 ,05) no grupo A (pressão de 35,84 cm de H20 ± 4,05, n= 6) em relação ao grupo C (pressão de 27,88 cm de H20 ± 1,48, n=9); não diminuiu no grupo AOP (pressão de 30,16 cm de H20 ± 2,62, n=5) e AOPT (32,70 cm de H20 ± 0,72, n=4) em relação ao grupo C. Conclusão A suplementação com óleo de peixe aumenta ou mantém a inflamação na asma, e a associação da vitamina E com óleo de peixe suplementado na dieta diminui parâmetros inflamatórios e modifica a contração da musculatura lisa das vias

FeSBE 2012

aéreas.

FeSBE 2012

Resumo: 20.013

EVOLUÇÃO PONDERAL, TOLERÂNCIA À GLICOSE E INSULINA EM RATAS ADULTAS SUBMETIDAS A UMA DIETA PALATÁVEL HIPERLIPÍDICA DURANTE A GESTAÇÃO E LACTAÇÃO.

Autores

1PEREZ, G. D. S.

1, MORAIS, G. L.

1, LIMA, M. D. S.

1, PEREIRA, B. G. A.

1, SANTOS, T. L. D.

1,

MEDEIROS, J. M. B. 1, SANTOS, L. S. D.

1, CORDEIRO, G. D. S.

1, OLIVEIRA, T. W. S. D.

1,

DEIRÓ, A. Q. S. 1, DEIRÓ, T. C. B. D. J.

1 Departamento da Ciência da Nutrição - ENUFBA

Apoio Financeiro: CNPq, CAPES, Procad

Resumo Objetivos Avaliar os efeitos de uma dieta palatável hiperlipídica durante a gestação e lactação sobre a evolução ponderal, tolerância à glicose e insulina em ratas adultas. Métodos Protocolo CEEA / UFBa: 20/10. Foram utilizadas fêmeas de Rattus norvegicus, da linhagem Wistar com 90 a 100 dias de vida, mantidas durante todo o experimento em ciclo claro e escuro de 12 horas e temperatura 23 ± 2ºC. Durante a gestação e lactação, as ratas foram isoladas em caixas individuais e divididas em dois grupos, segundo a manipulação nutricional. As ratas foram alimentadas com dieta palatável hiperlipídica (GT=10) e dieta padrão (GC =10) durante a gestação e lactação. Durante esse período o peso corporal foi avaliado em dias alternados, e imediatamente após o período da lactação foi realizado o teste de tolerância a glicose (TTG) e o teste de tolerância a insulina (TTI) nos tempos de 0, 30, 60 e 120 minutos. A constante de redução da glicemia (K-ITT) foi calculada utilizando a fórmula 0,693/t1/2. Para a comparação dos grupos foi utilizado o teste t-Student ( p < 0,05). Os resultados foram apresentados pela Média±EPM. Resultados Não houve diferença na evolução ponderal entre as ratas do grupo teste e controle. O ganho ponderal das ratas expostas à dieta hiperlipídica foi apenas 4,73% maior que o grupo controle durante a gestação (GT= 329,7±11,03; GC= 314,09±7,27) e 4,43% maior durante a lactação (GT= 314,18±9,83; GC= 300,27±8,12). O TTG, apresentou um aumento da glicemia nos primeiros 30 minutos, seguido de decréscimo nos demais tempos avaliados até a normalização dos níveis sanguíneos de glicose em ambos os grupos(0': GT= 72,1±3,0; GC= 83,1±5,5; 30’: GT=123,7±12,5; GC=134,2±7,8; 60’: GT=107,0±10,2; GC=107,2±7,6; 120’: GT=78±7,4; GC=87,6±6,6) porém, não foi observada nos pontos estudados nenhuma diferença entre os grupos. Entretanto, os animais do grupo teste apresentaram no TTI uma taxa de remoção da glicose sérica 52,81% maior quando comparado ao grupo controle (GT= 51,5 ± 4,98; GC= 24,3 ± 7,83) com p < 0,05. Conclusão A ingestão de uma dieta palatável hiperlipídica durante a gestação e lactação não alterou a evolução ponderal e o TTG quando comparada ao grupo controle, no entanto, foi verificada uma maior sensibilidade à insulina em ratas adultas. Apoio Financeiro: CNPq, CAPES, Procad.

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Resumo: 20.014

CONSUMO DE DIETA PALATÁVEL HIPERLIPÍDICA DURANTE A GESTAÇÃO E LACTAÇÃO: EFEITOS SOBRE PARÂMETROS DE CRESCIMENTO E CONCENTRAÇÃO SÉRICA DE PROTEÍNAS TOTAIS EM RATOS NEONATOS.

Autores

1PEREIRA, B. G. A.

1, FREITAS, M. C.

1, OLIVEIRA, T. W. S.

1, CORDEIRO, G. S.

1, SANTOS, L.

S. 1, MEDEIROS, J. M. B.

1, SANTOS, T. L.

1, SANTOS, A. Q.

1, DEIRO, T. C.

1, PEREZ, G. S.

2

Ciência da Nutrição - UFBA

Apoio Financeiro: CNPq, UFBA

Resumo Objetivos Investigar os efeitos do consumo de dieta palatável hiperlipídica durante a gestação e lactação sobre parâmetros do crescimento e concentração sérica de proteínas totais em ratos neonatos. Métodos Aprovado pelo Comitê de Ética da Faculdade de Odontologia da UFBA, Protocolo: 12/08. Foram utilizados ratos neonatos, cujas mães consumiram dieta palatável hiperlipídica (grupo teste - GT) ou dieta padrão (grupo controle - GC) durante o período perinatal. A avaliação do crescimento foi realizada durante o período de aleitamento em dias alternados, através das medidas de peso corporal (PC), eixo longitudinal (EL), comprimento da cauda (CC), medidas dos eixos médio-lateral (ELLC) e ântero-posterior do crânio (EAPC). Ao desmame (22º dia), após 4 horas de jejum, as proteínas totais foram analisadas. Para estatística foi utilizado o teste-t de Student ( p < 0,05). Resultados O peso corporal do grupo exposto à dieta hiperlipídica foi 36% maior do que o grupo exposto à dieta padrão ( p < 0,001). Do mesmo modo, as médias do EL, CC e ELLC do grupo teste (EL=94,4±0,02; CC=53,1±0,03; ELLC=16,1±0,00) foram superiores as do grupo controle (EL=86,9±0,04; CC=42,4±0,03; ELLC=15,6±0,00) (p < 0,001). Contudo, o EAPC (GT=30,9±0,00; GC=15,6±0,00; p > 0,05) não apresentou diferença entre os grupos. Além disso, as concentrações séricas de proteínas totais não diferiram entre os grupos: GC (4,97 g/dl, ± 0,4), GT (5,05 g/dl, ± 0,36; p > 0,05). Conclusão Os resultados indicam que a exposição materna à dieta palatável hiperlipídica durante o período perinatal pode alterar parâmetros de crescimento, mas não a concentração sérica de proteínas totais em fase precoce da vida. CNPq, UFBA

FeSBE 2012

Resumo: 20.015

ALTERAÇÕES ESTRUTURAIS DO PROCESSO DE REPARO EM LESÕES EXPERIMENTAIS NA PELE DE RATOS WISTAR MACHOS (Rattus novergicus) SUBMETIDOS A DIFERENTES CONDIÇÕES DE DIETA PROTEICA.

Autores 1PEROTTI, T. L.

1, PENTEADO, M. V.

1, SCABORA, J. E.

1, ESQUISATTO, M. A. M.

1 Programa

de Pós-graduação em Ciências Biomédicas - UNIARARAS

Apoio Financeiro: Fundação Hermínio Ometto

Resumo Objetivos Estudos sobre os efeitos da restrição proteica no reparo de feridas cutâneas, em diferentes períodos da vida de animais jovens, são raros na literatura. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos da dieta normo (NP – 17% em peso) e hipoproteica (HP – 6% em peso) na organização estrutural do tecido cicatricial durante o processo de reparo de lesões cirúrgicas experimentais em ratos Wistar machos. Métodos O ciclo de vida dos animais neste estudo foi dividido em quatro períodos: gestacional(G), lactação (L - 20 dias), puberdade (P - 35 dias) e experimental (E - 15 dias). Quarenta e cinco ratos machos da linhagem Wistar (Rathus novergicus) foram selecionados a partir de diferentes gestações em três grupos de 15 animais tratados, durante 70 dias, nas seguintes condições: G1: G - mãe com dieta NP/L - mãe NP/P+E –NP; G2: G+L–NP/P+E-HP e G3:G+L+P+E – HP. A lesão experimental, utilizando punch de 8mm, foi feita na pele da região do dorso de todos os animais aos 55 dias de idade, previamente anestesiados. Cinco animais de cada grupo foram sacrificados no 3º, 9º e 15º dias para remoção da área de lesão e preparo do tecido para análise histopatológica e morfométrica. Foi aferida, em cada amostra, o número de células fibroblásticas e inflamatórias (n. em 104μm2), número de vasos neoformados (n. em 104μm2), espessura do epitélio (μm) e a porcentagem ocupada por fibras colágenas birrefringentes em relação a área de tecido. Os dados foram comparados por Análise de Variância e pós-teste de Tukey ( p < 0,05). Este estudo foi aprovado pelo CEUA/UNIARARAS (Processo n. 079/2010). Resultados A organização estrutural do tecido de reparo apresentou diferenças entre os grupos estudados. O número de células fibroblásticas do G1 no período experimental foi 12,2 ± 3,2, 17,4 ± 4,8, 18,1 ± 5,4, respectivamente. Para G2, os dados apurados foram 10,2 ± 4,2, 14,4 ± 3,7, 16,1 ± 2,9. Já para G3, os valores encontrados foram 8,2 ± 3,2, 11,1 ± 1,8, 12,5 ±2,4. Os valores de G3 foram significativamente menores em relação aos demais em todos os tempos experimentais. O número de células inflamatórias em G1 foi 22,3 ± 2,8, 18,3 ± 2,8, 8,9 ± 1,4, respectivamente. Para G2, os dados apurados foram 20,2 ± 3,2, 16,2 ± 3,3, 10,1 ± 1,9. Já para G3, os valores encontrados foram 16,2 ± 2,1, 15,8 ± 2,8, 14,9 ±3,4. Os valores de G3 se mantiveram constantes entre os períodos experimentais e menores que os observados nos outros grupos. A espessura da epiderme em G1 foi 7,3 ± 2,3, 14,3 ± 2,5, 18,9 ± 2,6, respectivamente. Para G2, os dados apurados foram 7,2 ± 2,2, 15,2 ± 2,9, 19,7 ± 2,9. Em G3, os valores encontrados foram 5,8 ± 1,7, 8,2 ± 2,1, 16 ±2,7. G3 apresentou valores significativamente menores que os observados em G1 e G2. A porcentagem da área ocupada por fibras colágenas birrefringentes, nas amostras do tecido em reparo, atingiram, respectivamente, 32±8; 44±6 e 75±7, para G1; 33±7; 49±9 e 63±6, para G2 e, 14±3; 20±2 e 22±8, para G3. Os valores apurados para G3 foram significativamente menores que os observados nos demais grupos em todos os tempos experimentais. Não foram observadas áreas de calcificação ou necrose nos diferentes grupos. A organização das fibras elásticas não apresentou alteração importante em relação aos grupos e tempos experimentais. Conclusão Nossos estudos demonstraram que a restrição proteica promove perturbações severas no processo de reparo tecidual em

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lesões experimentais na pele de ratos machos jovens.

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Resumo: 20.016

Efeitos da silibilina sobre o metabolismo hepático da glicose

Autores

1MEWES, J. M.

1, COLTURATO, C. P.

1, CONSTANTIN, R. P.

1, JÚNIOR, A. S. M.

1,

CONSTANTIN, R. P. 1, CONSTANTIN, J.

1, YAMAMOTO, N. S.

1, BRACHT, A.

1, ISHII-

IWAMOTO, E. L. 1 Departamento de Bioquímica - UEM

Apoio Financeiro: CNPq, CAPES e Fundação Araucária.

Resumo Objetivos A ação anti-hiperglicemiante da flavolignana silibinina vem sendo estudada. Considerando sua similaridade estrutural com os flavonóides quercetina e fisetina, que se apresentam ativos nos processos hepáticos reguladores da glicemia, este estudo objetivou investigar, de forma comparativa, os efeitos da silibilina em vias metabólicas responsáveis pela manutenção da glicemia, particularmente glicogenólise e gliconeogênese em fígados de ratos em perfusão. A atividade de enzimas-chave destas vias e parâmetros energéticos mitocondriais também foram avaliados. Métodos Foram utilizados 4-5 ratos machos Wistar pesando 180-220 g (parecer 014/2009), em média, por série experimental. Seus fígados foram perfundidos na presença e ausência de silibilina (50-600 μM). Utilizou-se: fígados de ratos em jejum (24h) para avaliar gliconeogênese na presença de 2,0 mM de lactato e/ou 0,2 mM de piruvato e fígados de ratos alimentados para análise da glicogenólise e glicólise. Fluxos metabólitos foram calculados a partir do perfusado. O consumo de oxigênio foi monitorado por polarografia. Ainda foram avaliados: níveis de nucleotídeos, metabolismo energético mitocondrial bem como a atividade de enzimas-chave. Foi adotado p < 0,05 como critério de significância e as análises realizadas pelo teste t de Student. Protocolo nº 002/2009; Parecer 014/2009. Resultados a gliconeogênese foi inibida 89% e 57% com silibinina 300 μM e 50 μM, respectivamente e o consumo de oxigênio teve inibição de 55% e 78% com 50 μM e 100 μM de silibinina respectivamente, atingindo valores de 62% abaixo do basal na concentração de 300 μM. A silibilina 300 μM provocou inibição de 36%, 41% e 21% na glicogenólise, glicólise e consumo de oxigênio respectivamente. A produção do lactato e piruvato foi acentuadamente reduzida, refletindo na diminuição da razão citosólica NADH-NAD+. A silibilina não inibiu frutose-1,6-bisfosfatase, mas na concentração 100 μM diminuiu a atividade da glicose-6-fosfatase em 50%. A silibilina 175 μM inibiu 50% a atividade da piruvato carboxilase em mitocôndrias intactas, sem efeito sobre mitocôndrias rompidas. Na respiração mitocondrial dirigida por alfa-cetoglutarato, os valores de controle respiratório (RC) de: 0 μM = 4,87 ± 0,38; 100 μM = 3,98 ± 0,60; 200 μM = 2,94 ± 0,35; 300 μM = 2,04 ± 0,32, sem alteração na razão ADP/O. Na respiração mitocondrial dirigida pelo succinato, os valores do RC foram 100 μM = 6,11 ± 0,40; 200 μM = 4,47 ± 0,32 e 300 μM = 2,79 ± 0,16. Conclusão A silibinina possui ação anti-hiperglicêmica pela diminuição da gliconeogênese glicólise e glicogenólise, uma efeito, em parte, secundário ao comprometimento no metabolismo celular energético e seu potencial pró-oxidativo, achados que devem ser considerados para uso terapêutico. Por fim, os efeitos da silibinina sobre o fígado perfundido e mitocôndrias são muito similares aos da fisetina e quercetina, mas a silibinina inibi fortemente o consumo de oxigênio, em animais alimentados e em jejum, efeito atribuído ao grupo químico adicional fenilpropanóide da silinilina. Devido a esta propriedade, a silibinina não parece ser a melhor escolha em comparação com a quercetina e a fisetina, como agente hipoglicemiante.

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Resumo: 20.017

CHRONIC STRESS AND/OR HYPERCALORIC DIET: EFFECTS ON BEHAVIOR

Autores

1,4,3SCARABELOT, V. L.

1,2,3, OLIVEIRA, C.

1,2,3, OLIVEIRA, C. M.

1,2,3, SOUZA, A.

1,3,4,

MACEDO, I. C. 1,3,4

, MEDEIROS, L. F. 1,2,3

, ADACHI, L. N. S. 1, SILVA, F. R.

1,2,3, FILHO, P. M.

2,

SOUZA, I. C. C. 1,2,4,3

, TORRES, I. L. S. 2, CAUMO, W.

1 Departamento de Farmacologia -

ICBS/UFRGS, 2 FAMED/UFRGS - PPGCM-UFRGS,

3 HCPA/UFRGS - UEA HCPA/UFRGS,

4

Fisiologia - PPGFISIO- UFRGS

Apoio Financeiro: Pos-graduate Research Group (GPPG) at Hospital de Clínicas de Porto Alegre

(Dr I.L.S. Torres– Grant 10-0382); CNPq, CAPES.

Resumo Objetivos It is known that levels of anxiety are related to eating disorders and that hypercaloric diets are widely used in research. The exposure to stress and/or elevated stress hormone levels are known to alter emotional responses. Repeated episodes of chronic stress have been shown to be capable of modifying eating patterns and glucocorticoids have been associated with increased palatable food intake. The aim of this study was evaluate the effect of exposure at 80 days to hypercaloric diet and/or chronic stress on the behavior of rats in open field (OF) and elevated plus-maze (EPM) tests. Métodos The experiments were carried out on 96 male Wistar with 60 day-old (200-250 g) rats that was randomized and housed in groups of four. They were maintained under a standard L/D 12:12 cycle (lights-on at 07:00h and lights-off at 19:00h), in a controlled environment (22±2°C), with rat water and chow available ad libitum (fed cafeteria diet and/or standard chow). The animals were divided into two groups: control and stress model. Each group was subdivided in more two groups: standard food (control - C, stress - S) or hypercaloric food (hypercaloric food - HD and stress plus hypercaloric food –SHD), according to chronic stress exposure and type of diet used (hypercaloric diet and/or standard chow). The model of restraint stress was applied one hour/day between 9am and 12pm, 5 days/week. After eighty-days of treatments, the rats were exposure the apparatus of tests (open-field and plus-maze). Results are expressed as mean ± standard error of the mean. Data and interactions were evaluated by two-way ANOVA followed by a Bonferroni test for multiple comparisons Differences were considered significant for P < 0.05. This study was approved by Ethics Committee in the use of animal (GPPG-HCPA: 100382). Resultados In the open field test stress exposure produced a significant increase in the latency to leave the first quadrant (S=14.96+1.72, two-way ANOVA, P < 0.05); There is significant effect of hypercaloric diet in outer crossings (HD=86.04+3.98, two-way ANOVA, P < 0.05), In addition, in ration of inner crossings we observed an interaction between stress and diet (SD= 3.80+0.65, two-way ANOVA, P < 0.05), associated to no effect of stress or of hyper caloric diet exposure (S=2.04+0.65 and HD=3.50+0.66, respectively, two way ANOVA P > 0.05 for both). In the total crossings we observe significant effect of hypercaloric diet (HD=89.54+4.16, two-way ANOVA, P < 0.05). In the plus-maze test, we observed a stress significant effect in time spent in open arms (S=21.09+4.97, two-way ANOVA, P < 0.05), parameter indicative of increased in the levels of anxiety-like behavior in these animals. There were effects of stress and diet in the rearing (S=18.48+2.21 and HD=26.92+2.17, respectively, two-way ANOVA, P < 0.05). Conclusão Our results showed an increase on parameters indicatives of anxiety-like behavior. Some studies have indicated a strong correlation between stressful events and the development of behavioral abnormalities such as anxiety disorders. In this study we suggest that stress effect is altered by high calorie diet that it appears to minimize the effect of stress.

FeSBE 2012

Resumo: 20.018

CATABOLISMO DE AMINOÁCIDOS EM FÍGADOS DE RATOS COM OBESIDADE INDUZIDA POR DIETA DE CAFETERIA

Autores

1GHIZONI, C. V. D. C.

1, GASPARIN, F. R. S.

1, MAEDA JÚNIOR, A. S.

1, CARREÑO, F. O.

1,

CONSTANTIN, R. P. 1, BRACHT, A.

1, ISHII-IWAMOTO, E. L.

1, CONSTANTIN, J.

1

BIOQUÍMICA - UEM

Apoio Financeiro: Fundação Araucária, Capes e CNPq

Resumo Objetivos A maior parte dos estudos que utilizam dietas hipercalóricas para a indução de obesidade foca o metabolismo de carboidratos e lipídios. Menos atenção tem sido dada ao metabolismo de aminoácidos, a despeito de evidências de alterações no metabolismo do nitrogênio, derivado dos aminoácidos, em indivíduos obesos. Assim, este trabalho objetiva avaliar o metabolismo de aminoácidos em fígados de ratos esteatóticos, cuja obesidade foi induzida por dieta de cafeteria. Métodos Rattus Norvegicus machos albinos Wistar com 21 dias, tratados de acordo com o Comitê de conduta ética (parecer 113/2010), foram divididos em dois grupos e tratados por 14 semanas: grupo controle (C) tratados com ração balanceada e água ad libitum e grupo cafeteria (Ca) tratados com dieta de cafeteria além da dieta padrão.Foram realizadas dosagens sanguíneas de glicose (Gl), triacilglicerol (Tg), colesterol (Co), lipoproteína de alta densidade (HDL) e as atividades da aspartato aminotransferase (AST) e da alanina aminotransferase (ALT). Secções do fígado foram coradas com a técnica histoquímica Sudam III. Foram avaliadas a gliconeogênese, a ureagênese e o consumo de oxigênio em fígados perfundidos de ratos em jejum, com a infusão de glutamina ou alanina 2,5 mM, glutamina 0,6 mM mais cloreto de amônio 1,0 mM ou cloreto de amônio 1,0 mM. Foram determinadas as atividades das enzimas AST, ALT, glutamato desidrogenase (Gldh) e glutaminase (Gse) hepáticas. Foi adotado p < 0,05 como critério de significância e as análises foram realizadas pelo teste t de Student. Resultados Pesos corporais finais em g (n=7) foram C (391.2±9.4) e Ca (489.3±9.6). Pesos dos fígados finais em g (n=7) foram C (11.7±0.3) e Ca (13.0±0.3). Os consumos em kcal/semana/rato (n=7) foram C (84.2±1.4) e Ca (108.2±1.0). As porcentagens de inclusões lipídicas (n=4) foram C (2.5±0.8) e Ca (11.5±2.2). Dosagens sanguíneas em mg/dl (n=6) foram Gl C (97.6±2.4) e Ca (108.4±4.2); Tg C (72.0±6.8) e Ca (113.9±10.0); Co e HDL não tiveram diferenças significativas. Dosagens sanguíneas das atividades da AST e ALT em U/l (n=6) foram, respectivamente, C (142.2±13.7; 35.7±5.0) e Ca (86.5±7.6; 17.2±1.2). A gliconeogênese e a ureagênese, a partir de glutamina e alanina 2,5 mM foram significativamente menores no Ca, já na presença de cloreto de amônio não houve diferença significativa entre os grupos. As unidades de carbono (Cb) e nitrogênio (Nt) em μmol/g de fígado (n=5-6) com glutamina 2,5 mM foram C (Cb: 5.7±1.0 e Nt: 19.5±2.0) e Ca (Cb: 2.2±0.3 e Nt: 8.5±2.2) e com alanina 2,5 mM foram C (Cb: 26.7±3.2 e Nt: 15.5±2.0) e Ca (Cb: 11.7±0.8 e Nt: 9.1±0.3). A atividade da Gldh não apresentou diferença significativa entre os grupos. As atividades da Gse no fígado em nmol/min.mg de proteína (n=4) foram C (40.2±5.3) e Ca (23.7±1.2). As atividades das enzimas AST e ALT no homogenato de fígado em μmol/min.mg de proteína (n=7) foram, respectivamente, C (0.22±0.01; 0.19±0.01) e Ca (0.09±0.01; 0.08±0.01). Conclusão Os fígados de ratos com obesidade induzida por dieta de cafeteria exibem uma limitação nos passos iniciais da metabolização de aminoácidos.

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Resumo: 20.019

IN VITRO EFFECT OF 1α,25-DIHYDROXYVITAMIN D3 ON OXIDATIVE STRESS PARAMETERS IN SLICES OF ADULT RAT HEART.

Autores 1KUDO, K. Y.

1, MARCELINO, T. B.

1, SILVA, V. S.

1, dos SANTOS, A.

1, de ASSIS, A.

1, RECH,

A. 1, MATTÉ, C.

1, LEIPNITZ, G.

1, MATTÉ, C.

1 DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA - UFRGS

Apoio Financeiro: CNPq, PROPESQ /UFRGS, FAPERGS

Resumo Objetivos Vitamin D deficiency has been well studied, presenting among the major symptoms the reduction of serum calcium levels, chronic inflammation and oxidative stress. Several cardiovascular diseases, such as hypertension, congestive heart failure and stroke were increased by low levels of vitamin D. Moreover, it is believed that the increase in concentration of the vitamin D metabolites, 1&alpha,25-dihydroxyvitamin D3 (VitD3), may present toxicity by lipid peroxidation and activation of the vitamin D receptor (VDR) in target cells, as myocytes. In our study we assessed the effect of VitD3 on redox status in heart’s slices of adults Wistar male rats. Métodos This study was approved by Ethic commission (CEUA/UFRGS) under the number 20613. Sixty days-old male Wistar rats

(approximately 250g) were sacrificed by decapitation, and heart was sliced (400 m). Tissue was incubated in Dubbeco buffer pH 7.3 for an hour with different concentrations of VitD3 (0nM, 50nM, 100nM, 500nM and 1000nM). Vitamin D was solubilized in ethanol, and the highest dose contained 10% ethanol, which was used for appropriate controls. After incubation, the slices were washed with Dubbeco buffer pH7.3, homogenized and used in the following determinations: thiobarbituric acid reactive substances (TBA-RS), oxidation of dichlorofluorescein (H2DCF), sulfhydryl content, reduced glutathione (GSH), and activities of superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx) and catalase (CAT). Data were analyzed by one-way ANOVA, followed by the Duncan’s multiple test when F was significant. Differences were considered statistically significant if p < 0.05. Results were expressed as percent of respective control. Resultados We found that VitD3, in the concentration of 1000nM, caused a significant increase in levels of TBA-RS, an index of lipid peroxidation (n=6-7, C=100%±0; 1000nM=156%±30), while reduced the levels of H2DCF (n=6-7, C=100%±0; 1000nM=75%±17). On the other hand, VitD3 increased the levels of the most important non-enzymatic antioxidant GSH (n=5-7, C=100%±0; 1000nM=149%±57), and sulfhydryl content (n=5-7, C=100%±0; 500nM=139%±50). In addition, antioxidant enzymes were also altered by VitD3 incubation in heart slices. SOD activity was increased by 50, 100 and 1000 nM (n=7, C=100%±0; 50nM=129%±10; 100nM=150%±9; 1000nM=112±7), while CAT activity was increased by VitD3 50nM (n=5-7, C=100%±0; 50nM=124%±23) and reduced in the concentration of 500nM (n=5-7, C=100%±0; 500nM=86%±27). GPx activity was modulated only by high VitD3 concentrations (n=5-7, C=100%±0; 500nM=71%±24; 1000nM=129%±52). Conclusão Although our results have showed an increased lipid peroxidation induced by high levels of VitD3, we observed a reduction in reactive species and a compensatory effect of antioxidant status, increasing SOD and GPx activities, as well as GSH content. In addition, normal concentrations of this vitamin promote an increase in antioxidant defenses, and appear to protect heart from damage. These results could contribute to clarify the effect of vitamin D in cardiovascular diseases, acting as a protective approach.

FeSBE 2012

Resumo: 20.020

EFFECT OF DIFFERENT CONCENTRATIONS OF CALCITRIOL ON OXIDATIVE STRESS PARAMETERS IN WISTAR RATS PREFRONTAL CORTEX.

Autores 1STONE, V.

1, DOS SANTOS, A.

1, KUDO, K. Y.

1, MARCELINO, T. B.

1, DE ASSIS, A.

1,

MATTÉ, C. 1 Departamento de Bioquímica - UFRGS

Apoio Financeiro: CNPq, PROPESQ/UFRGS.

Resumo Objetivos Objective: Calcitriol is essential for keeping the mineral equilibrium of the body. It is synthesized in the skin by the action of UV radiation, or it is obtained from ingestion of sources like salt water fish. Although there are no limits established for maximum ingestion, its toxicity mechanism has been studied for some researchers. Vitamin D metabolites bind to its receptor VDR promoting alterations in the gene expression. Considering that have been suggested that calcitriol could be related to redox alterations, the objective of this work is to determine the ex-vivo effects of different doses of calcitriol on oxidative stress parameters in rats prefrontal cortex. Métodos Methods: Adult male Wistar rats were sacrificed, prefrontal cortex was dissected and sliced (400µm). Slices were incubated in Dubecco buffer (pH 7.3) for one hour in metabolic bath at 37ºC with crescent concentrations of calcitriol: 0nM, 50nM, 100nM, 500nM and 1000nM. Calcitriol was solubilized in ethanol (up to 10%), for which were utilized appropriated controls. After incubation, samples were washed with Dubbeco buffer, and were homogenized in appropriated buffer pH 7.4 to biochemical measures. We evaluated thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), dichlorofluorescein (DCF) oxidation, sulfhydryl content, glutathione (GSH) levels and the antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx). Results were analyzed by one-way ANOVA, followed by the Duncan’s multiple test when F was significant. Differences were considered statistically significant if p < 0.05. Results were expressed as percent of respective control. The experiments were approved by the Ethics commission (CEUA/UFRGS) under the number 20613. Resultados Results: Our results showed that calcitriol, in the concentration of 100nM, promoted an increase in reactive species production in prefrontal cortex, identified by DCF oxidation (n=6-7; C=100%±0; 100nM=161%±61). Lipid peroxidation, estimated by TBARS, was increased in the concentration of 50nM (n=6-7; C=100%±0; 50nM=120%±16). Antioxidant defenses was altered by calcitriol, as demonstrated by the elevation of GSH content (n=5-7; C=100%±0; 100nM=160%±41; 500nM=164%±47), increased SOD activity (n=7; C=100%±0; 100nM=121%±12), reduced GPx activity (n=5-7; C=100%±0; 50nM=72%±11; 100nM=57%±12; 500nM=44%±12; 1000nM=78%±21), and inhibited CAT activity (n=5-7; C=100%±0; 500nM=45%±20; 1000nM=62%±21). Nevertheless, the ratio SOD/CAT+GPx was also increased (n=5-7; C=0.5±0; 100nM=0.84±0.14; 500nM=0.98±0.21). Conclusão Conclusion: Our data showed that calcitriol altered the oxidative status of the prefrontal cortex, increasing the reactive species production and lipid peroxidation, as well as unbalancing antioxidant defenses. In conclusion, calcitriol in physiological (normal) and supraphysiological (high) concentrations seems to be deleterious to brain, at least in our methodological conditions, acting by modulation of cellular redox status.

FeSBE 2012

Resumo: 20.021

Óleo de peixe (fonte de ácidos graxos n-3) e resposta inflamatória em modelo de asma em camundongos

Autores 1BARGUT, T. C. L.

2, FERREIRA, T. P. T.

2, SILVA, P. M.

1, AGUILA, M. B.

1, MANDARIM-DE-

LACERDA, C. A. 1 Departamento de Anatomia - UERJ,

2 Instituto Oswaldo Cruz - Fiocruz

Apoio Financeiro: CNPq, Capes, Faperj

Resumo Objetivos A asma é uma doença crônica das vias aéreas que se caracteriza pela estimulação do sistema imune através dos linfócitos T helper tipo 2, que desencadeiam uma resposta inflamatória típica. O óleo de peixe é rico em ácidos graxos poli-insaturados n-3 e vem sendo descrito como anti-inflamatório. Dessa forma, objetivamos avaliar a influência do óleo de peixe sobre a resposta inflamatória em camundongos submetidos a modelo de asma. Métodos Camundongos A/J machos com 4 semanas de idade (peso:18g±1,5) receberam dieta padrão (C, com óleo de soja) ou dieta peixe (Px, com óleo de peixe) durante 8 semanas. Na 5ª semana, iniciou-se o protocolo de indução da asma: dia 0 – sensibilização com ovoalbumina (OVA) subcutânea (50 μg com 5 mg de Al(OH)3), dia 14 – reforço da sensibilização e dias 21 e 22 – desafio por instilação nasal (25 μg em 25 ml de solução salina). No dia 21, os grupos foram subdivididos em sham-desafiado e desafiado com OVA, totalizando 4 grupos: C, OVA, Px e Px-OVA (n=10 cada). A ingestão alimentar (IA) foi avaliada diariamente e a massa corporal (MC), semanalmente. No dia 23, a função pulmonar (resistência - R e elastância - E) foi avaliada por pletismógrafo de corpo inteiro invasivo em momento basal e em doses crescentes de broncoconstrictor (3, 9 e 27 mg/ml) e foi realizado lavado bronco-alveolar (BAL) para contagem de leucócitos e ELISA para eotaxina 2. Em seguida, os animais tiveram o tórax exposto e os pulmões perfundidos, dissecados e fixados. O tecido pulmonar foi processado e corado (PAS, Tricrômico de Gomori e Sirius Red pH 10,2). Foram avaliadas área de muco e área de deposição de matriz peribronquiolar através de imagens digitais e software de análise de imagens e os infiltrados de eosinófilos e neutrófilos foram quantificados através da estereologia. CEUA 24/11. Resultados Não houve diferença na IA e MC entre os grupos. Os valores de R e E foram maiores no grupo OVA do que no C, tanto no momento basal quanto nas diferentes doses de broncoconstrictor (+60%, p < 0,01, para R e +65%, p < 0,01, para E, na dose de 27 mg/ml). O grupo Px-OVA apresentou diminuição dos valores quando comparado ao OVA, especialmente na maior dose (-29%, p < 0,05 para R e -33%, p < 0,05 para E). O grupo OVA apresentou maior número de leucócitos totais no BAL, quando comparado com C (+130%, p < 0,001) e o grupo Px-OVA apresentou redução quando comparado com OVA (-52%, p < 0,001). Resultados semelhantes foram vistos para as subpopulações (eosinófilos, neutrófilos e células mononucleadas). O grupo OVA apresentou maior área de muco ( p < 0,001), maior deposição de matriz peribronquiolar (+205%, p < 0,01) e maior infiltrado de eosinófilos ( p < 0,001) e neutrófilos (+430%, p < 0,001). O óleo de peixe amenizou esse quadro (-72%, p < 0,001; -61%, p < 0,01; -55%, p < 0,01; -56%, p < 0,01; respectivamente). A eotaxina 2 foi maior no grupo OVA em comparação com C (+88%, p < 0,001) e o óleo de peixe reduziu esses valores em comparação ao OVA (-25%, p < 0,05) mas não suficiente para igualar ao controle Px (+36%, p < 0,05). Conclusão O óleo de peixe foi capaz de atenuar o processo inflamatório típico da asma.

FeSBE 2012

Resumo: 20.022

Evaluation of the Oxidative Stress in Diabetics Pregnants Rats Treated with Quercentin.

Autores 1BARBANERA, P. O.

1, BRAGA, C. P.

1, PEIXOTO, F. B.

1, MOMENTTI, A. C.

1, SANTOS, K. C.

1,

FERNANDES, A. A. H. 1 Química e Bioquímica - UNESP

Apoio Financeiro: CAPES

Resumo Objetivos The present study evaluated the effect of quercetin on oxidative stress in pregnant rats with diabetes mellitus type1 (DM1). Métodos The experimental condition was approved by the Committee Ethics and Animal Experimental of the Institute of Biosciences UNESP “Botucatu Campus” (Protocol No. 268).Thirty-two female Wistar rats were divided into four groups (n=8): G1=untreated control; G2=control treated with quercetin; G3= untreated diabetic and G4=diabetic treated with quercetin. Diabetes mellitus type 1 was induced by administration of streptozotocin (STZ; 60mg/kg, i.p.; single dose). Quercetin (50mg/kg) was administered by gavage in 7-day intervals, during pregnancy. Resultados The quercetin administration in diabetic animals showed significant decrease of glucose levels compared to G3, but did not differ ( p > 0,05) in comparation of G1 and G2 (G1=110,93±21,58; G2=110,93±9,80; G3=309,20±56,26; G4=163,71±41,00 mg/dL). Serum protein levels decreased in STZ-diabetic rats (G3=5,02±0,72g/dL), whereas the quercetin increased ( p < 0,05) (G4=6,62±1,02g/dL). Serum concentrations of lipid hydroperoxide (HP) significantly increased in untreated diabetic rats (G3=9,84±0,78nmol/mL) when compared with diabetic rats treated with quercetin (G4=7,99±0,88nmol/ml). The serum activity of glutathione peroxidase (GSH-Px) was reduced ( p < 0,05) in pregnant diabetic rats (G3=80,21±3,32U/mL). Quercetin increased of the activity GSH-Px in diabetic pregnant rats, but had no effect on activity superoxide dismutase (SOD). Conclusão Quercetin showed antidiabetogenic effect and oxidative stress control in pregnant rats with STZ-induced DM1.

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Resumo: 20.023

PAPEL DO ÓLEO DE COPAÍBA NO METABOLISMO HEPÁTICO DE RATOS

Autores 1DIAS*, F. C.

2, KOUYOUMDJIAN, M.

3, BORGES, D. R.

1, NAGAOKA, M. R.

1 Biociências -

UNIFESP, 2 Bioquímica - UNIFESP,

3 Medicina - UNIFESP

Apoio Financeiro: CNPq (Edital Universal/2008), Bolsa PIBIC/CNPq 2011-2012, Jovem

Pesquisador FAPESP 08/55928.

Resumo Objetivos O óleo de copaíba é extraído dos troncos das árvores copaíbas e apresenta propriedades medicinais, dentre as quais as mais empregadas são as suas atividades antiinflamatórias e antitumorais. Em relação ao fígado, poucos estudos existem do efeito do óleo de copaíba no metabolismo bem como em patologias associadas. Araujo-Jr et al (2005) estudaram o efeito do óleo de copaíba em fígados de ratos submetidos a isquemia e reperfusão e não verificaram efeito do óleo neste modelo através da análise das alanina e aspartato aminotransferases. Assim, o objetivo deste trabalho é estudar o papel do óleo de copaíba no metabolismo de fígados isolados e perfundidos de ratos normais e submetidos à resposta de fase aguda Métodos (CEP0724/09). Foram utilizados ratos Wistar machos (245 a 370 g) de aproximadamente 8 semanas. A resposta de fase aguda (FA) foi induzida através da injeção sc de 0,5 ml de óleo de terebentina em cada flanco do animal. A seguir os animais receberam ou não óleo de copaíba (350 µl/Kg peso animal) uma vez ao dia por gavagem. Os animais foram divididos em três grupos experimentais conforme o período de administração do óleo de copaíba por gavagem: 1. 5 dias antes da indução da FA (grupo pré), 2. imediatamente após indução da FA (2 dias) (grupo pós) e 3. durante todo o período (grupo óleo). Animais controle receberam apenas água. A perfusão de fígado foi realizada após 48hs da indução da FA com solução de Krebs/BSA. Os parâmetros de metabolismo hepático estudados foram: liberação de glicose, secreção de bile, depuração de bromosulfaléina (BSP) e a dosagem das aminotransferases AST, ALT e LDH no soro dos animais. Os resultados foram expressos por média ± EPM e analisados pelo programa GraphPad Prism (version 5.0). Resultados Os grupos experimentais estudados não apresentaram diferença entre o peso dos animais e do fígado. Os dados referentes às ALT e ALT séricas, demonstraram que o grupo pré-tratado com óleo apresentaram ligeira diminuição (ALT: 39±4U/L, n=4; AST: 129±38U/L, n=4) em relação ao seu grupo controle (ALT: 71±26U/L, n=4; AST: 168±46U/L, n=4). No grupo pós, não observamos diferença entre o grupo tratado e controle em relação à AST, ALT e LDH. Em relação ao metabolismo hepático, verificamos que o processo inflamatório não alterou a secreção de bile nas condições estudadas, entretanto os grupos pré inflamação tiveram a secreção biliar (&mu/min/g fígado) diminuída (controle água: 3,2±1,4; copaíba: 4,7±1,7) referente aos grupos pós inflamação (controle: 7,0±3,6; copaíba: 6,7±2,6). No grupo pré, verificamos que a liberação de glicose (mg/g fígado) nos animais controle (0,8±0,3) foi semelhante ao grupo copaíba (1,4±0,2). O grupo pós também não apresentou diferença significativa na liberação de glicose (mg/g fígado) pelo fígado (controle: 2,0±0,9; copaíba: 2,0±0,7). Em relação à BSP, verificamos que o óleo de copaíba não altera a depuração hepática nos grupos estudados: média da meia vida de eliminação da BSP variou de 2,0 a 2,7 min. Conclusão Nossos resultados sugerem que o pré-tratamento com óleo de copaíba pode proteger o organismo das alterações sistêmicas causadas pela resposta de fase aguda induzida e que o óleo estudado não interferiu no metabolismo hepático tanto em animais normais quanto em FA.

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Resumo: 20.024

A SUPLEMENTAÇÃO DA DIETA COM ÓLEO DE PEIXE DIMINUI A PRODUÇÃO DE HIDROPERÓXIDOS LIPÍDICOS, MAS MANTÉM A PRODUÇÃO DE NITRITOS E A ATIVIDADE DA CATALASE EM MODELO ANIMAL DE INFLAMAÇÃO PULMONAR INDUZIDA POR OVOALBUMINA

Autores 1ZANATTA, A. L.**

1, MIRANDA, D. T. S. Z.**

1, DIAS, B. C. L.*

1, NISHIYAMA, A.

1 Fisiologia

- UFPR

Apoio Financeiro:

Resumo Objetivos A hipótese deste trabalho é que os ácidos graxos polinsaturados presentes no óleo de peixe suplementado na dieta podem sofrer oxidação e alterar a resposta inflamatória pulmonar, como resultado do estresse oxidativo. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar a produção de hidroperóxidos lipídicos e nitritos, a atividade da enzima catalase e a concentração de proteínas totais, como conseqüência da inflamação pulmonar em ratos asmáticos submetidos a uma dieta suplementada com óleo de peixe. Métodos Foram utilizados ratos Wistar machos adultos (200±30 g), divididos em 4 grupos: Controle (C); controle suplementado com óleo de peixe (S); asmático (A); asmático suplementado com óleo de peixe (AS). Os procedimentos foram previamente aprovados pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal da UFPR, protocolo nº 468, processo nº 23075.029677/2010-31. Os ratos foram suplementados, durante 21 dias, com 1 g/kg de óleo de peixe, e a indução da asma foi feita com ovoalbumina (OVA). No 5º e 12º dia de suplementação foi realizada a sensibilização com OVA (1mg/mL). No 19º, 20º e 21º dia de suplementação os animais foram nebulizados, sendo os grupos C e S nebulizados apenas com solução salina de fosfato tamponada (PBS) e os grupos A e AS nebulizados com PBS + OVA. No 22º dia os ratos foram ortotanasiados por dose letal de uretana e então, coletado o lavado broncoalveolar (LBA) e os pulmões. A dosagem de proteínas totais foi realizada no LBA, utilizando o reativo de Bradford e leitura da absorbância a 595 nm. A produção de óxido nítrico (NO) foi determinada também no LBA utilizando o reativo de Griess e leitura da absorbância a 550 nm. 400 mg do lobo pulmonar inferior direito foram utilizados para a quantificação de hidroperóxidos lipídicos, ensaio este baseado na especificidade da trifenilfosfina (TPP) em reduzir hidroperóxidos. A determinação da atividade da enzima catalase foi realizada tanto no tecido pulmonar como no LBA e baseia-se no consumo de peróxido de hidrogênio, presente no meio reacional, na presença da amostra. Os dados foram expressos nos gráficos como média ± erro padrão da média (EPM). As comparações entre os grupos foram realizadas pela análise ANOVA one-way seguida pelo pósteste de Tukey. As diferenças foram consideradas estatisticamente significativas para P < 0,05. Resultados Observou-se que houve um aumento significativo de proteínas totais no grupo AS (229,1±27,53 µg/mL) em relação ao A (133,2±20,39 µg/mL). A geração de NO aumentou no grupo A (11,39±1,25 µmol/mL) em comparação ao C (7,38±0,59 µmol/mL), mas no grupo AS não houve diferença em relação ao A (9,65±0,63 e 11,39±1,25 µmol/mL, respectivamente). A concentração de hidroperóxidos aumentou no grupo A (120,2±11,27 nmol/mg de proteína) em relação ao C (74,77±9,32 nmol/mg de proteína) e com a suplementação dos animais asmáticos, grupo AS, este parâmetro retornou aos padrões encontrados no C (72,19±7,33 nmol/mg de proteína em AS). A atividade da enzima catalase não foi diferente entre os grupos quando determinada no homogenato do tecido pulmonar; entretanto, no LBA encontrou-se reduzida nos animais do grupo A em 50,2% e em 38,8% no grupo AS quando comparado com o grupo C. Conclusão Os resultados indicam que a inflamação pulmonar aumentada resultante da suplementação com óleo de peixe pode estar relacionada à diminuição da produção de hidroperóxidos lipídicos e à manutenção da produção de nitritos e da atividade da

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enzima catalase.

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Resumo: 20.025

MODIFICAÇÃO DO PERFIL CITOLÓGICO PULMONAR E REDUÇÃO DA ADESÃO E CAPACIDADE FAGOCITÁRIA DE MACRÓFAGOS ALVEOLARES DE RATOS ASMÁTICOS PROMOVIDA PELA SUPLEMENTAÇÃO COM ÓLEO DE PEIXE.

Autores 1DIAS, B. C. L*

1, MIRANDA, D. T. D. S. Z. **

1, ZANATTA, A. L. **

1, MASSARO, M. D. C. *

1,

CAMPOS, R. M. D. * 1, NISHIYAMA, A.

1 Fisiologia - UFPR

Apoio Financeiro:

Resumo Objetivos O óleo de peixe suplementado na dieta é fonte de mediadores lipídicos com baixo potencial antiinflamatório o que poderia modular a resposta inflamatória e a funcionalidade celular. Assim, esse estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da suplementação com óleo de peixe sobre o perfil citológico pulmonar e sobre a capacidade de adesão e fagocitose de macrófagos alveolares em ratos asmáticos. Métodos Foram utilizados ratos machos Wistar, pesando 220 ± 20g, de acordo com aprovação do Comitê de Ética em Experimentação Animal (CEEA) da UFPR, protocolo nº468. Eles foram separados em grupos controle (C); asmático (A); óleo de peixe (OP) e asmático suplementado (AS). Os grupos OP e AS receberam óleo de peixe (1g/kg peso corporal) suplementado na dieta, enquanto os grupos C e A receberam água na mesma dose, durante 21 dias. Para a indução de asma, foi feita sensibilização e exposição a aerosol de ovalbumina nos grupos A e AS. Foram utilizadas doses letais de uretana um dia após a última exposição. O lavado bronco alveolar (LBA) foi coletado, as células viáveis foram contadas e utilizadas para os ensaios de adesão e fagocitose. Foram confeccionadas lâminas para contagem diferencial, utilizando-se INSTANT PROV Conjunto de corantes. No ensaio de adesão, os macrófagos foram fixados e corados com Giemsa. O corante impregnado nos macrófagos foi solubilizado com metanol e a absorbância da solução foi obtida em espectrofotômetro (550 nm). No ensaio de fagocitose, os macrófagos foram incubados com zimosan corado com vermelho neutro, e fixados. A seguir, foi adicionada solução de extração do corante e a leitura da absorbância da solução formada foi obtida em 550 nm em espectrofotômetro. Os resultados foram expressos em média ± desvio padrão e analisados por ANOVA. Resultados O número total de células no LBA do grupo C (1,29 x 106 ± 0,64) foi menor ( p < 0,05) que do grupo A (3,33 x 106 ± 2,04), demonstrando aumento da inflamação na asma. O número de células no grupo OP (1,74 x 106 ± 0,85) não foi diferente do grupo C. O número de células no grupo AS (2,04 x 106 ± 0,81) foi menor ( p < 0,05) que no grupo A, demonstrando que o óleo de peixe diminuiu a quimiotaxia de leucócitos para os pulmões na asma. A contagem de eosinófilos foi de 0,56% ± 0,14 no grupo C, 0,83% ± 0,35 no grupo OP, 19,07% ± 1,9 no grupo A e 38,68% ± 6,65 no grupo AS. O aumento significativo ( p < 0,05) do número de eosinófilos do LBA caracteriza esse modelo de animal asmático. O óleo de peixe, embora tenha diminuído o número total de células, aumentou o número de eosinófilos. As absorbâncias obtidas no ensaio de adesão foram de 0,1276 ± 0,05, 0,1348 ± 0,06, 0,2203 ± 0,07 e 0,1678 ± 0,09, para os grupos C, OP, A e AS, respectivamente. Assim sendo, o óleo de peixe mostrou ser capaz de reduzir ( p < 0,05) a capacidade de adesão do macrófago, que estava aumentada ( p < 0,05) no grupo A em relação ao grupo C. No ensaio de fagocitose, a absorbância do grupo C resultou em 0,1239 ± 0,04, do OP em 0,1382 ± 0,07, do A em 0,1875 ± 0,09 e do AS em 0,1289 ± 0,04, revelando que o óleo de peixe reduziu ( p < 0,05) a atividade fagocítica do macrófago que estava aumentada ( p < 0,05) no grupo A em relação ao grupo C. Conclusão O óleo de peixe suplementado na dieta reduziu a resposta celular inflamatória pulmonar e a capacidade de adesão e

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fagocitose de macrófagos, sugerindo seus efeitos anti-inflamatórios na asma.

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Resumo: 20.026

EFEITOS DO TREINAMENTO FÍSICO MODERADO SOBRE A MORFOMETRIA E MORFOLOGIA DA PAREDE DO VENTRICULO ESQUERDO DE RATOS ADULTOS DESNUTRIDOS DURANTE A GESTAÇÃO E LACTAÇÃO.

Autores

1NASCIMENTO, L. C. P.

2, MORAIS, D. S. C.

2, BARRETO, M. D. P.

2, PALMEIRA, A. D. A.

3,

LIU, Y. U. H. 3, FILHO, R. C. S.

1, SILVA, A. B.

1, FREITAS, C. M.

3, LAGRANHA, C. J.

3,

LEANDRO, C. V. G. 1 Núcleo de Nutrição - CAV/ UFPE,

2 Departamento de Patologia - CCS/UFPE,

3

Núcleo de Educação Física e Ciências do Esporte - CAV/UFPE

Apoio Financeiro: FACEPE E CNPq

Resumo Objetivos Durante o período crítico de desenvolvimento, o organismo é passível de sofrer influências de fatores externos e vir a apresentar modificações bioquímicas e estruturais no tecido cardíaco. Estudos propõem que mudanças no estilo de vida como uma dieta equilibrada e prática de exercício físico regular podem prevenir o aparecimento de doenças na vida adulta. O presente trabalho avaliou os efeitos da desnutrição perinatal e do treinamento físico moderado sobre a morfologia do coração. Métodos Foram utilizados 27 ratos machos Wistar, seguindo as recomendações do COBEA e aprovação do Comitê de Ética em Estudos com Animais do Centro de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Pernambuco(Processo nº 23076.018163/2009-15).Os animais foram submetidos à desnutrição no período de gestação e lactação com dieta caseína à 8% e à 17% para animais controle. Após a lactação, os filhotes passaram a receber dieta padrão do biotério- LABINA. Aos 60 dias de idade os ratos foram subdivididos de acordo com a realização do treinamento físico: a) grupo controle (C: caseína 17%, n=08); b) grupo desnutrido (D: caseína 8%, n=04); c) grupo treinado (T: caseína 17%, treinamento físico, n=08) e d) grupo desnutrido treinado (DT: caseína 8%, treinamento físico, n=07). A análise morfométrica dos cortes histológicos transversais do coração através de um microcomputador avaliou a área da cavidade do VE, a espessura de sua parede e a área do cardiomiócito pelo programa ImageJ. Os valores foram expressos em Média e EPM. O nível de significância foi mantido em 5% ( p < 0,05). Resultados Em relação ao peso (g), aos 21 dias, os animais do grupo D apresentaram um valor menor (26,09 ± 1,93) quando comparados aos animais do grupo C (37,70 ± 3,06) seguido de aumento no percentual de ganho de peso corporal (%GPC) tanto no período da lactação (C=214,19 ± 32,63; D=142,68 ± 26,87) quanto no período pós-desmame (C=458,81 ± 28,3; D=630,72 ± 36,16) (22 – 60 dias). Quanto à área da cavidade do VE (mm2), o grupo DT apresentou menor valor (29,42 ± 2,40) quando comparado ao C (71,58 ± 6,13) e ao D (83,28 ± 13,74). A espessura da parede do VE (mm2) mostrou-se maior no grupo DT (6,95 ± 4,06) quando comparado aos grupos C (4,67 ± 4,65) e D (3,98 ± 2,46). A nível celular houve diminuição da área (mm2) do cardiomiócito no grupo D (0,31 ± 0,98) relacionado ao C (0,44 ± 0,29) e aumento em DT (0,43 ± 0,27) relacionado ao D (0,31 ± 0,98). Em todos os resultados o nível de significância foi mantido em 5% ( p < 0,05). Conclusão A desnutrição promoveu um déficit no peso corporal dos animais no período da lactação e uma hipotrofia dos cardiomiócitos. O treinamento físico, porém, reverteu esta última alteração. O que é relevante para elucidar benefícios do treinamento físico moderado a nível celular sobre a morfologia cardíaca de animais que foram desnutridos na gestação e lactação.

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Resumo: 20.027

SEX-SPECIFIC EFFECT BY MATERNAL PROTEIN RESTRICTION ON LIVER MITOCHONDRIAL OXIGEN CONSUMPTION IN RAT OFFSPRING

Autores 1SILVA*, E. V. C.

1, MORAES**, C. D.

1, REBELATO**, H. J.

1, CATISTI, R.

1 Programa de Pós-

Graduação em Ciências Biomédicas - UNIARARAS

Apoio Financeiro: FAPESP, FHO/UNIARARAS and PROSUP/CAPES

Resumo Objetivos The dietary limitation during pregnancy influences the growth and development of the fetus and offspring and their health into adult life. The biological mechanisms involved remain ambiguous. Studies in numerous species have linked mitochondrial parameters with both embryo competence and diseases in early life. Hence, we had investigated whether low protein diet intake during pregnancy could alter the offspring’s liver mitochondrial metabolism by oxygen uptake measurements. Métodos The pregnancy dams were divided in two groups: with normal protein diet (pups named NP; 17% protein) or low protein diet (pups named LP; 6% protein) during all pregnancy. After weaning, offspring were allowed free access to standard diet (Nuvital, Nuvilab CR1, Brazil) containing 21.6% protein and 4.0% lipid. Liver was collected from fasted animals, in 30-day-old offspring, and mitochondria were isolated by conventional differential centrifugation. The oxygen consumption was recorded over 10 min, to the temperature-controlled (28oC) chamber of Clark-type electrode (Oxytherm System, Hansatech Instruments, Norfolk, UK). Data were analyzed using GraphPad Prism. Student's t test, unpaired, with a significance level of 5% ( p < 0.05) were used and expressed as mean ± standard deviation (M ± S.D.). Experiments were approved by CEUA, 257/2010. Resultados The effect of maternal protein diet on offspring growth, at 30 days postnatal life, observed significant decrease on males LP body mass (63.42 ± 2.782 g; NP 72.15 ± 1.667 g, n = 10, p < 0.05). Females showed no difference in body weight (NP, 64.93 ± 0.9447 g; LP, 64.55 ± 1.783 g, n = 10). The lipid peroxidation process was measured by quantification of TBARS production by mitochondria. The results showed a significant inhibition in TBARs formation on female LP group. The values (nmolTBARS/mg prot/10 min) were NP group (males 3.973 ± 0,000577; females 3.147 ± 0,001528) and LP group (males 4.037 ± 0,07848; females 2.850* ± 0,1232). It was observed significant decrease in liver mitochondrial O2 consumption in LP group, especially in female. The values were in males (n=6, NP 185,7 ± 8,988 nmoles de O2 mg-1min-1; LP 150,3 ± 3,180 nmoles de O2 mg-1min-1) and in females (n=6, NP 124,7 ± 2,603 nmoles de O2 mg-1min-1; LP 101,3 ± 5,812 nmoles de O2 mg-1min-1). Conclusão Maternal protein restriction during pregnancy alters hepatic metabolism and protects the liver against adverse oxidative stress conditions; this protection differs between males and females, and females demonstrated be more resistant.

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Resumo: 20.028

EFFECT OF MOMORDICA CHARANTIA IN BIOCHEMICAL AND HISTOLOGICAL ALTERATIONS IN MICE WITH NON ALCOHOLIC FATTY LIVER DISEASE (NAFLD).

Autores 1TEIXEIRA, K. B.

1, LEMOS, B. S. D. O.

2, PINTO, M. E. A.

2, LIMA, L. A. R. D. S.

2, PINTO, F. D.

C. H. 1, MARTINS-SANTOS,M.E.S

1 BIOQUÍMICA - UFSJ,

2 FARMÁCIA - UFSJ

Apoio Financeiro: CNPq, UFSJ.

Resumo Objetivos NAFLD demonstrates a high prevalence in the population. It is close related to obesity, type II diabetes and insulin resistance. The aim of this work was to determine the effect of Momordica charantia on blood levels of glucose and lipids and also in NAFLD induced in mice by administration of a high hyperlipidic diet (HL). Métodos Experiments were performed in Swiss male mice fed for 8 weeks with a HL or control (C) diets (n = 6/group). Extract of M.charantia (fruits), was obtained by extraction with methanol and was administered intraperitoneally to the animals treated with HL diet (HLT) by 5 days at a dose of 5mg/body weight. Blood samples were collected and analyzed for glucose (GLU), alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), triglycerides (TAG), total cholesterol (CTO) and HDL using commercial kits. VLDL was calculated by Friedewald equation: VLDL= TAG/5. We also collected and weighed the epididymal and retroperitoneal tissues. Liver were analyzed microscopically for the presence of NAFLD, steatosis, necrosis and inflammation. The results were analyzed by Student's t test ( P < 0.05) and expressed as mean ± standard error. All procedures were approved by CEPEA/UFSJ Nº.40/2010. Resultados Animals HL showed increase in body weight (g) (C 35,08 ±0,86 vs HL 48,33 ±1,05 ), total liver weight (g) (C 1,70 ±0,07 vs HL 2,62 ±0,01), retroperitoneal weight (g) (C 0,17±0,01 vs HL 0,65±0,06 ), GLU(mg/dl) (C 562,11 ±13,40 vs HL 701,82 ±20,1), ALT (U/L) ( C 57,37 ±6,4 vs HL 105,12 ±6,1 ), CTO(mg/dl) (C 145,89 ±9,95 vs HL 195,25 ±14,99), HDL cholesterol (mg/dl) (C 107,70 ±7,69 vs HL 171,92 ±8,70 ), VLDL (mg/dl) (C 21,54 ±1,54 vs HL 34,81 ± 6,88 ) and TAG (mg/dl) (C 75,09 ±6,68 vs HL 171,51 ±34,4) in comparison to C. The administration of the extract of M. charantia for 5 days was able to decrease levels of GLU (HL 701,82 ±20,1 vs HLT 306,72 ±31,0 ), CTO (HL 195,25 ±14,99 vs HLT 103,69 ±4,61), VLDL (HL 34,81 ± 6,88 vs HLT 8,68 ± 0,53 ), HDL cholesterol (HL 171,92 ±8,70 vs HLT 97,17 ±7,84), TAG (HL 171,51 ±34,4 vs HLT 43,43 ± 2,65), total liver weight (HL 2,62 ±0,01 vs HLT 1,75 ±0,13), retroperitoneal weight (HL 0,65 ±0,06 vs HLT 0,43 ±0,05) and increased AST (HL 118,94 ±9,2 vs HLT 174,73 ±9,5 ) and ALT (HL 105,12 ±6,1 vs HLT 346,09 ±28,4) in comparison with HL animals. Histological analysis: significant improvement was observed in liver from animals fed a HL diet (with NAFLD) when they were treated with the extract of M. charantia for 5 days. Conclusão The extract of M. charantia was effective in reducing blood glucose and lipids levels as well as showing great potential in reducing liver fat content promoting an improvement in NAFLD.

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Resumo: 20.029

DIETA A BASE DE OKARA MODULA A EXPRESSÂO GÊNICA DE ENZIMAS CHAVES DO METABOLISMO HEPÁTICO DE LIPÍDEOS

Autores 1CARLI, A. P.

1, LIMA, F. M.

1, PACHECO, N. C. S.

1, LEMES, S. F.

1, REIS, S. R. D. L.

1,

LATORRACA, M. Q. 1, VELOSO, R. V.

1 Departamento de Alimentos e Nutrição - UFMT

Apoio Financeiro: FAPEMAT, CAPES

Resumo Objetivos Avaliar a expressão dos genes das enzimas hepáticas estearoil coenzima A dessaturase (SCD-1), acetil-CoA carboxilase 1 (ACC1) e proteína quinase ativada por AMP (AMPK&alpha) envolvidas no metabolismo de lipídeos, em ratos mantidos com dieta à base de okara. Métodos Foram utilizados ratos machos Wistar, recém-desmamados (25 dias, ±43g) distribuídos em cinco grupos: proles de ratas alimentadas com dieta controle caseína (17% proteína) ou hipoprotéica caseína (6% de proteína) durante a prenhez e a lactação que foram mantidas com dieta com 17% de proteína à base de caseína (grupos CC e RC) ou de okara (grupos CO e RO), ou com dieta hipoprotéica caseína (grupo HP) desde o desmame até os 90 dias de vida. As respectivas dietas foram analisadas quanto à composição em ácidos graxos. Após sacrifício o sangue foi obtido para a determinação de ácidos graxos livres (AGL). O fígado foi extraído para determinação do conteúdo lipídico por método gravimétrico e expressão de genes envolvidos no metabolismo de lipídeos, pelo método de PCR em tempo real.Os resultados estão expressos em média e desvio padrão. Os resultados foram avaliados por ANOVA a dois fatores, seguido de teste de comparação múltiplas de médias, quando necessário. Em todos os casos foi estabelecido um nível de significância para rejeição da hipótese de nulidade de 5% ( P < 0,05). CEUA 24/11. Resultados Os animais okara independente do estado nutricional ingeriram maior quantidade (em gramas) de lipídeos saturados (CC=18,09±1,37; CO=30,74±1,29; RC=12,82±0,80; RO=25,8±3,74; HP=6,75±0,30; n=9), monoinsaturados (CC=26,26±1,99; CO=43,47±1,83; RC=18,61±1,17; RO=36,55±5,28; HP=10,34±0,46; n=9) e poliinsaturados (CC=41,34±3,14; CO=80,74±3,40; RC=29,29±1,85; RO=67,89±9,81; HP=15,17±0,68; n=9), quando comparados com os animais que consumiram caseína. Independente do estado nutricional houve aumento dos ácidos graxos livres (mmol/L) nos ratos mantidos com okara em relação a animais que consumiram caseína, porém HP foi maior que os recuperados (CC=0,25±0,07; CO=0,40±0,09; RC=0,28±0,09; RO=0,29±0,10; HP=0,47±0,14). O conteúdo de lipídios hepáticos (mg/g) foi similar entre os grupos CC, CO, RC e RO, e maior no grupo HP em comparação aos grupos RC e RO (CC=38,7±14,9; CO=43,6±9,4; RC=35,8±9,9; RO=37,2±8,3; HP=77,9±21,0; n=5). O consumo de okara reduziu a expressão do RNAm de SCD-1 (CC=1,43±0,33; CO=0,11±0,10; RC=1,66±0,78; RO=0,02±0,01; HP=0,27±0,10; n=4) e ACC1 (CC=0,02±0,01; CO=0,01±0,006; RC=0,02±0,009; RO=0,01±0,005; HP=0,03±0,01; n=4) independente do estado nutricional. O RNAm de SCD-1 do grupo RO foi menor que HP. A expressão do RNAm de ACC1 em RC foi similar a RO e a HP. O RNAm de AMPKα foi maior nos grupos okara em relação aos caseína e os animais recuperados foram maiores em relação aos seus respectivos controles, porém quando comparados com o grupo HP, RC e RO foram similares e maiores que HP (CC=0,02±0,007; CO=0,03±0,008; RC=0,03±0,004; RO=0,04±0,008; HP=0,02±0,003; n=4). Conclusão Assim, o consumo de ácidos graxos poliinsaturados presentes na dieta okara modulou negativamente a expressão gênica de SCD-1, favorecendo a expressão de genes envolvidos com a oxidação e inibindo a expressão de genes relacionados com a síntese de ácidos graxos.

FeSBE 2012

Resumo: 20.030

EFEITO DA DIETA HIPOPROTÉICA-HIPERGLICÍDICA NA DEGRADAÇÃO DE PROTEÍNAS EM MÚSCULO ESQUELÉTICO DE RATOS EM CRESCIMENTO.

Autores

1BATISTELA, E.

1, PEREIRA, M. P.

1, SIQUEIRA, J. T.

1, DECHANDT, C. R. P.

2, PAULA-

GOMES, S. 2, ZANON, N. M.

2, KETTELHUT, I. C.

1, ANDRADE, C. M. B.

1, KAWASHITA, N. H.

1, BAVIERA, A. M.

1 Departamento de Química - UFMT,

2 Departamento de Bioquímica e

Imunologia - FMRP/USP

Apoio Financeiro: Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado do Mato Grosso/FAPEMAT

Resumo Objetivos Resultados prévios de nosso laboratório mostraram que ratos em crescimento recebendo dieta hipoprotéica-hiperglicídica (H) por 15 dias apresentaram menor ganho de peso corporal, explicado em parte pela perda de massa muscular, que pode ser uma consequência de alterações nos processos de síntese e/ou degradação de proteínas, processos estes que são finamente regulados por diversos fatores hormonais, dentre eles a insulina. O estudo teve como objetivo avaliar as alterações na velocidade de proteólise total e nos diferentes processos envolvidos na degradação de proteínas em músculo soleus de animais adaptados à dieta H, bem como investigar o envolvimento da insulina e AMPK no perfil de resposta apresentado. Métodos O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da UFMT (23108.043335/08-1). Ratos Wistar machos (5-7 animais/grupo) com 30 dias de idade (100g) foram alimentados com dieta H (6% proteína, 76% carboidrato) ou controle (C - 17% proteína, 65% carboidrato) por 15 dias e ao final foram eutanasiados para coleta do músculo soleus. A velocidade de proteólise total foi determinada pela medida de tirosina liberada no meio (método fluorimétrico) após 2 horas de incubação dos músculos sob condições apropriadas. As atividades das proteases catepsina B, calpaína, proteassoma (quimiotripsina-like) e caspase-3 foram avaliadas pela hidrólise de substratos específicos, com liberação de aminometilcumarina (AMC) quantificada por método fluorimétrico. Alterações nos níveis protéicos de IR, bem como no conteúdo e fosforilação de AMPK foram investigadas por Western blotting. Os resultados foram expressos como média ± EPM e avaliados por Teste t-Student ( p < 0,05). Resultados A velocidade de proteólise total (nmol Tyr/mg/2h) foi 36% menor ( p < 0,05) em soleus de animais do grupo H (0,269±0,013) em relação ao grupo C (0,422±0,024). Corroborando este resultado, observou-se uma diminuição das atividades (nmol AMC/mg proteína/min) do proteassoma (H: 29,62±2,03 vs C: 38,35±3,10) e caspase-3 (H: 10,08±0,227 vs C: 13,47±0,89, p < 0,05) em soleus de animais adaptados à dieta H em relação aos controles. Houve, entretanto, aumento na atividade da calpaína (H: 103,1±5,55 vs C: 86,56±3,82, p < 0,05) em soleus de animais do grupo H; nenhuma alteração foi observada na atividade da catepsina B entre os grupos. Os níveis proteicos de IR foram maiores em músculos de animais do grupo H (142,8±11,96%, p < 0,05) em relação ao grupo C (88,19±14,84%). Foi observada elevação nos níveis de fosforilação de AMPK em soleus de animais do grupo H (H: 295,4±41,69% vs C: 115,6±27,65%, p < 0,05) devido ao aumento de cerca de 4 vezes no conteúdo protéico da enzima nos animais H (355,5±27,05%, p < 0,05) em relação ao grupo C (77,78±13,23). Conclusão A redução da proteólise muscular observada nos animais alimentados com dieta H pode ser atribuída a um aumento na sensibilidade à insulina deste tecido promovida pela ativação de AMPK, sendo este um importante mecanismo de adaptação da musculatura esquelética, poupando proteínas musculares a fim de manter suas funções, considerando que a oferta de aminoácidos pela dieta está reduzida.

FeSBE 2012

Resumo: 20.031

MAY PERINATAL PROTEIN RESTRICTION INDUCE MITOCHONDRIAL DYSFUNCTION IN LIVER?

Autores

1SILVA FILHO, R. C.

2, LEITE, A. C. R.

3, SILVA, A. B.

3, NASCIMENTO, L.

3, FREITAS, C. M.

2,

MAIA, M. B. S. 1, LAGRANHA, C. J.

1, FERNANDES, M. P.

1 Department of Physical Education and

Sports Science - UFPE-CAV, 2 Department of Physiology and Pharmacology - UFPE,

3 Department of

Nutrition - UFPE-CAV

Apoio Financeiro: CNPq E FACEPE.

Resumo Objetivos The mechanism associating malnourish and risk of disease in adulthood remains controversial. Given that our aim was evaluate the effect of malnourish (i.e. protein restriction) during critic period of development in the liver mitochondrial bioenergetic. Métodos The manipulation with the animals followed the recommendations of COBEA and approval of the Ethics Committee for animal studies at the Center for Biological Sciences, Federal University of Pernambuco (n°23076.044262/2010-88). Male Wistar rats were used and divided according to the mother’s diet. Control group (animals from mothers that received 17% casein during the gestation and lactation period, n=6), and malnourished group (animals from mothers receiving 8% casein diet during the gestation and lactation period, n=6). After this period both groups were given standard animal house diet (Labina-Purina®). At 100 days of age the animals from both group were sacrificed, and the liver was quickly removed and the isolated mitochondria by differential centrifugation (Schneider & Hogeboom in Cancer Res 11:1-22, 1951). We evaluate protein concentration by Bradford method (Anal Biochem. 72:248-254, 1976), mitochondrial respiratory rates parameters (respiratory control, phosphorylating (State 3), resting (State 4) and uncoupled state) (Robison & Cooper in Anal Biochem 33:390-399, 1970) and mitochondrial swelling (Macedo et al. in J. Lemasters, Plenum 535-42, 1988). Resultados Our results showed a significant increase of the state 3 in malnourished group when compared to control group (Control group: 56.96 ± 4.57 nmolO2/mg/min vs malnourished group: 79.4 ± 8.81 nmolO2/mg/min, p < /i> < 0 .05); a significant increase of the state 4 (Control group: 20.07 ± 2.3 nmolO2/mg/min vs malnourished group: 28.45 ± 2.4 nmolO2/mg/min, p < /i> < 0 .05) and in uncoupled state (Control group: 66.18 ± 7.44 nmolO2/mg/min vs malnourished group: 94.83 ± 9.2 nmolO2/mg/min, p < /i> < 0 .05) were also found. There was no significant difference in respiratory control ration between the groups (Control group: 2.89 ± 0.46 vs malnourished group: 3.06 ± 0.61, p < /i>>0.05). Furthermore, liver mitochondria isolated from malnourished rats presented a higher resistance to calcium ion (30 &microM) than control group mitochondria (Control group: 0.37 ± 0.05 nm vs malnourished group: 0.99 ± 0.18 nm, p < /i> < 0 .05). Conclusão Our data suggest that protein restriction during critic period of development induce alteration in mitochondrial bioenergetics in a way that decrease electrons leaking in the electron transport chain (by increasing state 3 and state 4), preventing reactive oxygen species production and mitochondrial dysfunction.

FeSBE 2012

Resumo: 20.032

EFEITO DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNAS EM UMA DIETA HIPERLIPÍDICA E COM RESTRIÇÃO DE CARBOIDRATOS NO METABOLISMO DE RATAS GESTANTES E SUAS NINHADAS.

Autores 1,2

SOUZA, T. M. S. 1, ABREU, M. T. C. L.

1, BIANCHINI, F. P.

1, GUIMARÃES, K. C.

1, JÚNIOR,

G. T. 1, JÚNIOR, G. T.

1 PROPEPE - UNIUBE,

2 Patologia - UFTM

Apoio Financeiro: Universidade de Uberaba (UNIUBE)

Resumo Objetivos O presente trabalho visa a determinação do efeito da concentração de proteínas numa dieta hiperlipídica e restrita em carboidratos nos seguintes parâmetros: ganho de peso das mães na gestação, peso da ninhada ao nascer, ganho de peso da ninhada na lactação, paridade vivos, mortalidade ao nascer e durante a lactação. Métodos O protocolo experimental foi aprovado pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal da UNIUBE (nº 0015/2010). Foram utilizadas Ratas Wistar adultas (190-220 gramas), mantidas com água e ração “ad libitum”, temperatura entre 22 e 26ºC, iluminação de 12x12 hs (claro x escuro), durante a gestação e lactação. Utilizou-se dieta controle balanceada para ratos (C) e duas dietas restritas em carboidrato, hiperlipídicas e com diferentes concentrações de proteína: EI (77% de gordura, 3% carboidrato e 20% de proteínas) e EII (87% de gordura, 3% carboidrato e 10% de proteínas). O peso dos animais (mães e filhotes) foi monitorado semanalmente. A paridade de filhotes vivos (mães que pariram somente filhotes vivos), mortalidade ao nascer e a ocorrência de óbitos dos filhotes na lactação foi obtida pela contagem dos filhotes semanalmente. Os dados foram analisados no Programa GraphPad (Prism 4,0), com significância de p < 0,05. Resultados Não houve diferença significativa no peso das ratas ao longo do período gestacional, mas, ao parir, o grupo Controle apresentou peso significativamente maior (275,95+27,42g) que o grupo EII (243,71+40,71g). O peso ao nascimento foi maior no grupo Controle (5,6+1,2g) que nos grupos EI (5,1+1,0g) ( p < 0,05) e EII (5,1+1,7g) ( p < 0,01). Durante a lactação, os filhotes cujas mães receberam a dieta EII somente durante a gestação (36,7+6,36g) ou também na lactação (27,24+2,57g) tiveram um menor ganho de peso que os filhotes de mães que receberam somente dieta controle (48,31+13,42g) ( p < 0,01). Os filhotes cujas mães receberam dieta EI somente na gestação (37,65+9,62g) tiveram menor ganho de peso que aqueles cujas mães receberam a dieta na gestação e lactação (47,63+5,44g). A paridade foi significativamente maior no grupo C (n=20), que nos grupos EI (n=9) e EII (n= 10) ( p < 0,0405). A mortalidade ao nascer foi significativamente maior no grupo EII (n=7) ( p < 0,046) quando comparada aos grupos C (n=4) e EI (n=1). Não houve diferença significativa na mortalidade ao longo da lactação. Conclusão A deficiência de proteínas e de carboidratos (Dieta EII) afeta negativamente o peso materno ao final da gestação e a mortalidade ao nascer, mas o excedente de proteína (dieta EI) compensa a falta de carboidratos na dieta no que diz respeito ao ganho de peso materno e dos filhotes durante a lactação, mas não na mortalidade ao nascer. Finalmente, a restrição de carboidrato dietético, acrescida ou não de proteínas, não consegue adequar o peso dos filhotes ao nascimento e compromete a paridade. Em conjunto, esses dados permitem concluir que a proteína pode suprir a falta de carboidratos para o ganho de peso materno, o processo de fecundação e manutenção da prole na vida intrauterina, mas não é suficiente para a manutenção da prole nos primeiros momentos de vida nem para o adequado ganho de peso intrauterino.

Resumo: 20.033

FeSBE 2012

Suplementação de creatina por curto prazo reduz conteúdo de espécies reativas de oxigênio e modula a função contrátil do músculo esquelético

Autores

1,2GUIMARÃES-FERREIRA, L.

1, PINHEIRO, C. H. J.

1, GERLINGER-ROMERO, F.

1, VITZEL, K.

F. 1, NACHBAR, R. T.

1, CURI, R.

1, NUNES, M. T.

1 Departamento de Fisiologia e Biofísica - ICB -

USP, 2 Centro de Educação Física e Desportos - UFES

Apoio Financeiro: CAPES e Cnpq.

Resumo Objetivos Avaliar os efeitos da suplementação de creatina de curto prazo sobre a função contrátil e o conteúdo de espécies reativas de oxigênio (ROS) no músculo esquelético. Além disso, verificar se a molécula de Cr exerce ação direta de sequestro (ação scavenger) de ROS. Métodos Ratos Wistar (~250g) foram suplementados com creatina monohidratada (Cr; 5 g/Kg de peso; n=10) ou água (grupo controle; n=10) por 6 dias. Contrações musculares foram evocadas no tríceps sural, sóleo e extensor digitorum longus (EDL) por estimulação elétrica (EE) direta no nervo isquiático. Parâmetros de força foram mensurados através de um transdutor de força conectado à pata do animal. A resistência aguda à fadiga durante EE de alta frequência (100 Hz) foi avaliada. Os músculos sóleo e EDL foram incubados para avaliação do conteúdo de ROS através do reagente Amplex-UltraRed. A análise da expressão e atividade de enzimas antioxidantes foi realizada por Real Time PCR e ensaio enzimático, respectivamente. Além disso, a ação scavenger sobre o ânion superóxido e peróxido de hidrogênio foi avaliada através de experimentos cell-free. O presente estudo foi aprovado pelo comitê de ética para estudos em animais do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo (106/74, livro 02, 2009). Resultados A suplementação com Cr promoveu uma melhoria da resistência aguda à fadiga durante EE de alta frequência, mensurada através da queda de produção de força durante contrações isométricas sucessivas no tríceps sural (controle: 23%; Cr: 6,5%; p < 0,01), sóleo (controle: 27,1%; Cr: 14,9%; p < 0,05) e EDL (controle: 43,2%; Cr: 0,1%; p < 0,001). O conteúdo de ROS foi reduzido no sóleo (em 41%, p < 0,01) e EDL (em 33,7%; p < 0,05) no grupo Cr em relação ao controle. A suplementação não promoveu modificações na expressão e atividade das enzimas antioxidantes ( p > 0,05). A Cr exerceu ação scavenger direta sobre o ânion superóxido (nas concentrações de 20 e 40 mM de Cr; p < 0,05), mas não sobre o peróxido de hidrogênio. Conclusão Nossos resultados indicam que a suplementação de Cr reduz o conteúdo de ROS no músculo esquelético, possivelmente através de uma ação direta sobre o ânion superóxido. Esta ação pode contribuir para os efeitos da suplementação de Cr sobre a resistência aguda à fadiga. Estes resultados funcionais foram similares aos observados previamente com a administração de N-acetil-cisteína, um potente antioxidante, antes da EE.

FeSBE 2012

Resumo: 20.034

Efeito de bebidas à base de suco de uva e refrigerante à base de cola sobre a morfologia tibeal de ratos Wistar.

Autores

1BANDEIRA, R.

1, MARQUES, K. D. V.

1, LUCAS, F. F.

1, SILVA, R. J. D.

1, BOBNA, A. R. M.

1,

MARTINS, G. M. 1, SILVA, M. V. D.

1, FERREIRA, C. H. A. G.

1, LACCHINI, S.

1, LIBERTI, E. A.

1 Anatomia - ICB - USP

Apoio Financeiro:

Resumo Objetivos Avaliar a adaptação morfofuncional da tíbea em ratos Wistar tratados com refrigerante à base de cola e com suco de uva integral (contendo resveratrol). Métodos Foram usados ratos Wistar machos e fêmeas, com um ano de idade e pesos entre 250 e 500 gramas, divididos nos grupos: controle (Cont, recebendo água normal), grupo Cola (exposto a bebida de baixo valor nutricional a base de Cola), e o grupo Uva (ingestão de suco de uva integral) o número amostral é de 4 animais por grupo. Os animais receberam os tratamentos por oito semanas e, ao final foram avaliados: peso corporal (g); glicemia (de sangue capilar em medidor portátil, ng/dL); teste de esforço máximo (TEM, feito em esteira ergométrica, dados em minutos) e teste biomecânico, considerando as variáveis: Carga Máxima (CM, na unidade de N) e Módulo Elástico (ME, na unidade de N/mm),os dados apresentados são os valores totais e brutos e representam as médias e desvios padrão. Este trabalho foi abalizado bem como cadastrado no Comitê de Ética, sob nº 179, nas fls. 114 do livro 02 para uso de animais em experimentação, sob a responsabilidade do Prof. Edson Aparecido Liberti, aprovado pelo CEUA deste Instituto em 02.12.2011, com validade de 04 anos. Resultados Ao final do tempo experimental, verificamos não haver diferença no peso corporal de fêmeas e de machos, em função dos tratamentos. Já a glicemia apresentou redução significativa nas fêmeas tratadas com suco de uva, se comparadas às demais (Cont: 96±8,5; Uva: 79±1,4 e Cola: 94±2,8mg/dL); já os machos não apresentaram modificações. Quanto à performance avaliada pelo TEM, não verificamos mudanças significativas em relação ao tratamento nem em machos ou fêmeas. Com relação aos testes biomecânicos tivemos: nas fêmeas, quanto a CM (Cont: 1,20333±0,14844; Uva: 0,99±0,13 e Cola 1,08333±0,07371), e ME (Cont: 4,6566±1,21819; Uva: 4,82297±0,16403 e Cola: 4,92541±0,14075), aos animais machos tivemos, em CM (Cont: 1,04±0,01414; Uva: 0,96±0,05568 e Cola: 1,02±0,03464), em ME (Cont: 6,48838±1,82343; Uva: 7,19063±1,55529 e Cola: 7,98022±1,42312) Conclusão Embora ainda necessitem outras avaliações relacionadas à estrutura tibeal e seu metabolismo, os resultados apresentados sugerem que a ingesta de bebida dita funcional como o suco de uva pode melhorar variáveis metabólicas como a glicemia; contudo, tal consumo modulou de forma negativa, tanto CM quanto ME em ambos os sexos das amostras e ainda, o inverso foi verdadeiro para o consumo da bebida à base de Cola (modulando positivamente as variáveis CM e ME em ambos os sexos) o que sugere, mesmo de forma indefinida e parcial as mudanças na constituição óssea causadas por tais alimento de amplo consumo popular. A salientar, numa fase etária que refere-se à perturbações ósseas de impacto individual e social.

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Resumo: 20.035

Free radical formation and protein oxidation mediated by trivalent and hexavalent chromium.

Autores 1HEIBEL, A. B.

1, LOPES, A. C. F.

2, HERMES-LIMA, M.

1 Departamento de Nutrição - UnB,

2

Departamento de Biologia Celular - UnB

Apoio Financeiro: CNPq, INCT-Redoxoma (CNPq) and PPGNUT-UnB

Resumo Objetivos For more than 50 years trivalent chromium (CrIII) has been accepted as an essential human nutrient due to its regulatory effect on cellular glucose uptake in individuals with insulin resistance. Exposure to hexavalent chromium (CrVI), however, induces many health hazards, including mutagenic and carcinogenic processes. Once inside the cell CrVI is reduced to CrIII, in a process that may induce reactive oxygen species (ROS) formation mediated by intermediate oxidation states of chromium, CrV and CrIV. In addition, CrIII itself may be able to induce ROS formation and cellular oxidative stress. We have previously demonstrated (HEIBEL et al. 2011, South American FRBM Meeting, São Pedro, SP, Brazil, poster 112) that both CrIII and CrVI are able to produce hydroxyl radical formation in vitro in the presence of H2O2. CrIII is also able to mediate the longest-lasting Fenton-type reaction reported so far (10 days at the same rate, measured by 2-deoxyribose (2-DR) oxidation assay, confirmed by fluorimetric assay of terephthalic acid hydroxylation for 3 days in a CrIII: H2O2 ratio of 1:10). CrVI, on the other hand, induces H2O2-dependent hydroxyl radical formation within seconds. The dependence of H2O2 on 2-DR damage is bell shaped, declining at concentrations above 0.5 mM H2O2. The aim of this work is to further investigate the interaction of CrIII and CrVI with H2O2 and their ability to induce in vitro oxidative damage to proteins. Métodos H2O2 production was measured in vitro by horseradish peroxidase-mediated oxidation of phenol red by H2O2, resulting a compound with absorbance at 610nm. Protein oxidation was measured in vitro as protein carbonyl formation from BSA (or β-lactoglobulin) using derivatization with DNPH, acid precipitation and measurement at 370 nm. Resultados Although Fenton reaction mediated by FeII caused total H2O2 decomposition (0.5 mM (FeII:H2O2 at 2:1), reaction of H2O2 with CrVI produced no peroxide decomposition at any chromium concentration (0.1 to 1 mM; n=6-8). H2O2 decomposition was also tested in the presence of CrIII (0.05 to 1 mM, n=8). It reached ~10% and 60% decomposition at 8 h and 50 h incubation, respectively, however the effect was chromium-independent. Moreover, CrIII induced BSA oxidation in a dose-dependent manner; the process was H2O2-dependent (4 h incubation, n=5). CrVI-mediated carbonyl formation from BSA was also dose-dependent (10 min incubation, n=5), but either from BSA or β-lactoglobulin oxidation was H2O2-independent. Conclusão Reaction of CrIII with H2O2 may generate a balance of peroxide production and consumption, which could explain the duration of the reaction for over 10 days. A different mechanism should take place for CrVI, since the reaction is extinguished within seconds. Protein damage caused by CrIII appears to be mediated by ROS, whereas CrVI seems to generate direct oxidation of amino acid residues. H2O2 is essential for CrIII-mediated hydroxyl radical production (and so in the case of CrVI) and protein oxidation. Further studies are still needed to unearth the mechanisms of in vitro oxidative stress mediated by chromium ions. In any case, our observations indicate that both forms of chromium are potentially life threatening.

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Resumo: 20.036

O CONSUMO DE DIETA HIPERLIPIDICO-PROTEICA NA GESTAÇÃO E/OU LACTAÇÃO INDUZ ALTERAÇÕES ANATO-PATOLÓGICAS E NO GANHO DE PESO DE RATOS WISTAR AO NASCIMENTO E AO FINAL DA LACTAÇÃO

Autores

2ROCHA, M. G. M.

3, NOVAES, A. C. R.

3, SOUSA, K. B. F. D.

3, SILVA, M. F. I.

3, BARBOSA, R.

H. A. 1, JUNIOR, G. T.

3, ROSSI, T. C.

1, JUNIOR, G. T.

1 Pró-Reitoria de Pesquisa, Pós-Graduação e

Extensão - UNIUBE, 2 Patologia - UFTM,

3 Curso de Medicina - UNIUBE

Apoio Financeiro: PAPE/UNIUBE; FAPEMIG (Processo nº CDS 1282/05 e Processo APQ-2542-

4.08/07); CNPq.

Resumo Objetivos Determinar o efeito de uma dieta hiperlipídico-protéica restrita em carboidratos consumida durante a gestação e/ou lactação sobre o ganho de peso de ratas Wistar, número de componentes e peso das ninhadas, bem como nos parâmetros anatômicos e histopatológicos dos baços, cérebros, corações, rins e testículos dos filhotes ao nascimento e ao final da lactação. Métodos O projeto foi aprovado pelo Comitê de ética em Experimentação Animal da Universidade de Uberaba (protocolo 005/2008). Foram utilizadas 32 ratas Wistar, que no período de gestação receberam dieta controle balanceada (C) ou experimental (E, 5% CHO, 45% PTN e 45% TAG) e água filtrada ad libitum. No inicio da lactação, parte das ratas C passaram a receber dieta E e vice versa, formando 4 subgrupos (CC, CE, EE e EC). O número de componentes da ninhada bem como o peso das ratas e suas proles foi monitorado ao longo da lactação. Os animais sofreram eutanásia, sendo os órgãos retirados, pesados, fixados em formol tamponado e uma amostra foi submetida à análise histopatológica de rotina (coloração Hematoxilina-Eosina). Os dados histológicos foram analisados no software STSS 14.4 por meio do teste de Qui–Quadrado. Os dados quantitativos foram submetidos ao teste T de Student, a Análise de Variância One-Way ANOVA e Pós-teste Bonferroni, sempre considerando estatisticamente significativo o p < 0,05. Resultados Não foi encontrada diferença quanto ao número de componentes da ninhada entre o grupo C (n=14,42±1,08) e o grupo E (n=11,08±4,25) ao nascer e nem ao longo da lactação. Já o peso ao nascer foi significativamente maior no grupo C (6,41±0,77g) em relação ao grupo E (5,61±1,1g). Ao final da lactação, foi observada diferença significativa apenas entre os grupos CE x EC (47,93±5,63g x 61,9±13,28g, respectivamente) e CC x EC (56,73±9,82g x 61,90±13,28g, respectivamente). Mães do grupo E tiveram ganho de peso relativo significativamente maior que as do grupo C (26,75±3,86g x 12,92±10,14g, respectivamente). Ao final da lactação, não foi encontrada diferença significativa entre os grupos para o parâmetro “peso da mãe”. A análise histopatológica dos filhotes ao final da lactação evidenciou hiperplasia da polpa branca nos baços dos animais dos grupos EE e EC em relação ao grupo CC ( p < 0,05). Nos corações, evidenciou-se a ocorrência de inflamação com percentual significativamente maior nos subgrupos CE e EE (100%) em relação ao grupo CC (50%). Já análise anatomopatológica demonstrou redução significativa do peso dos cérebros no grupo CE (1,29±0,03g), quando comparado com o grupo CC (1,47±0,12g). As análises anatômicas e histopatológicas dos rins e testículos não mostraram alterações significativas. Conclusão O consumo da DHLP durante a gestação não compromete a capacidade reprodutiva das ratas, mas induz maior ganho de peso por elas e afeta negativamente o peso dos filhotes ao nascer. Além disso, a DHLP oferecida durante o período gestacional predispõe os filhotes ao maior ganho de peso ao final da lactação, independente da dieta ingerida pela mãe durante esse período. Ademais, o consumo da DHLP afeta negativamente o desenvolvimento e estrutura dos baços, cérebros e corações dos filhotes ao final da lactação. (b)Apoio Financeiro(/b): PAPE/UNIUBE; FAPEMIG (Processo nº CDS

FeSBE 2012

1282/05 e Processo APQ-2542-4.08/07); CNPq.

FeSBE 2012

Resumo: 20.037

IRON STATUS OF RATS FED HIGH-FAT DIETS

Autores

1GAIEVSKI, E. H. S.

1, LOBO, A. R.

1, SALES, A. L. C. C.

1, DE CARLI, E.

2, BORELLI, P.

2,

CRISMA, A. 2, NAKAJIMA, K.

4, GUERRA, L. M. T.

4, PEREIRA, R. M. R.

1, COLLI, C.

1

Alimentos e Nutrição Experimental - FCF, 2 Análises Clínicas e Toxicológicas - FCF,

4 Divisão de

Reumatologia - FM

Apoio Financeiro: Fapesp

Resumo Objetivos Obesity has been associated with changes in mineral status which could negatively affect some conditions related to increased adiposity, such as non-alcoholic fatty liver disease and insulin resistance. This study was designed to evaluate the effects of feeding a high-fat (HF) diet on iron status of rats. Métodos The experimental protocol was approved by the Commission on Ethics in Animal Experiments of the Faculty of Pharmaceutical Sciences of the University of São Paulo (CEEA 250/2009 FCF-USP) according to the guidelines of the Brazilian College on Animal Experimentation. Weanling male Wistar rats (n = 72) were assigned into control (ad libitum and pair-fed) and HF (60% lipids; soybean oil and lard) groups and euthanized at days 15, 30 and 60. An intraperitoneal insulin-tolerance test was performed in previously 12h-fasted animals at days 25 and 55. Body fat was evaluated by dual X-ray absorptiometry (DXA). Blood samples were collected for biochemical and hematological analysis. Total iron was measured in stools, liver and spleen by AAS. Resultados HF rats had greater adiposity compared to controls, more significant after 60 days (P < 0.01). There were no differences in insulin sensitivity among the groups. On the other hand, HF feeding influenced the body iron distribution, as showed by lower serum iron levels and higher iron contents in the liver and spleen. These effects occurred without affecting the erythropoiesis. The adiposity index was significantly correlated with spleen (day 15: r = 0.41, P = 0.04), serum (day 60: r = -0.54, P = 0.01) and liver (day 60: r = 0.56, P < 0.01) iron levels, suggesting compartmental susceptibility differences in response to the high-fat diet. Conclusão Moreover, the highest fecal iron excretion in the HF animals may have been influenced by: 1) interactions between iron and lipids in the intestinal lumen; or 2) increased circulating hepcidin (mediating ferroportin down-regulation). The latter probably as an attempt to maintaining iron homeostasis in the stress condition of excessive fat consumption. These findings, of course, demand further accurate investigation.

FeSBE 2012

Resumo: 20.038

EFFECT OF THE READAPTATION TO A BALANCED DIET AND TREATMENT WITH EXTRACT OF MOMORDICA CHARANTIA IN THE BIOCHEMICAL AND HISTOLOGICAL ALTERNATIONS CAUSED BY ADMINISTRATION OF A HIGH FAT DIET AS A MODEL OF NON-ALCOHOLIC FATTY LIVER DISEASE (NAFLD).

Autores 1LEMOS, B. S. D. O.

1, TEIXEIRA, K. B.

2, PINTO, F. C. H.

2, LIMA, L. A. R. D. S.

2, ARAUJO, S.

G. 2, OLIVEIRA, G. T. D.

1, MARTINS-SANTOS, M. E. S.

1 Bioquímica - UFSJ,

2 Farmácia - UFSJ

Apoio Financeiro: FAPEMIG

Resumo Objetivos The NAFLD is characterized by a pathologic accumulation of lipids in the liver. It affects 10-24% of world’s population and it is associated with obesity and insulin resistance. Based on this information, the objective of this work was to evaluate the effects of the readaptation to a normal caloric diet and the treatment with the extract of Momordica charantia on glucose levels and lipid metabolism along with the liver histology in mice with this pathology. Métodos Swiss male mice were adapted to a normal caloric diet (C) or a high fat diet (HL) for 8 weeks with the initial weight between 16-18g. HL animals were then reversed for 5 days (n = 6 animals/group) with a control diet. And they were also reversed and treated for 5 days with 5mg/body weight of the Momordica charantia extract. This extract was extracted with methanol and it was administered intraperitoneally in the animals. After the treatment, blood was collected for the analysis of glucose (GLU) (mg/dL), total cholesterol (CTO) (mg/dL), high density lipoprotein (HDL) (mg/dL), triacylglycerol (TAG) (mg/dL), aspartate aminotransferase (AST) (U/L) and alanine aminotransferase (ALT) (U/L). Very low density lipoprotein (VLDL) (mg/dL) was calculated by using the Friedewald equation (VLDL = TAG/5). The liver was removed for histological analysis. The results were analyzed using the Student t test ( P < 0.05) and expressed as mean ± standard error. All procedures were approved by CEPEA/UFSJ Nº.40/2010. Resultados There was an increase in the biochemical levels of the HL group compared to the C: GLI (C 562.113±13.380 vs. HL 701.828±20.148), CTO (C 145.890±9.952 vs. HL 195.256±14.991), HDL (C 107.702±7.696 vs. HL 171.925±8.702), VLDL (C 15.019±1.337 vs. HL 34.303±6.886), TAG (C 75.097±6.685 vs. HL 171.517±34.429) and ALT (C 70.810±14.402 vs. HL 105.120±6.129). These animals also showed extensive areas of macro vesicular and micro vesicular steatosis in the liver. The reversal diet for 5 days (HLR5) was able to decrease biochemical parameters, such as: GLI (HL 701.828±20.148 vs. HLR5 444.270±23.037), CTO (HL 195.256±14.991 vs. HLR5 131.091±8.778), HDL (HL 171.925±8.702 vs. HLR5 73.736±4.518) and ALT (HL 105.120±6.129 vs. HLR5 50.607±3.406), and it showed an improvement histologically. Reversing the diet along with the treatment for 5 (HLRT5) days caused a decrease in GLI (HLR5 444.270±23.037 vs. HLRT5 359.937±28.332) and VLDL (HLR5 88.854±4.607 vs. HLRT5 18.701±1.369). These animals also showed a reduction in the processes of micro and macro vesicular steatosis in the liver. Conclusão Reversing the diet with the administration of the extract of M. charantia seems to be the best protocol to reduce glucose levels. Moreover, the reversal was sufficient to improve lipemic fractions independently of the extract. It is possible that the administration of the plant’s extract in a higher concentration or for a longer period of time could enhance more these levels.

FeSBE 2012

Resumo: 20.039

PROTEIN RESTRICTION DURING EARLY LIFE INDUCES LONG-LASTING CHANGES ON THE FUNCTIONAL AND STRUCTURAL PROPERTIES OF RAT SKELETAL MUSCLE

Autores

1,2ARAGÃO, R. S.

2, GUZMAN-QUEVEDO, O.

2, PÉREZ-GARCIA, G.

3, TOSCANO, A. E.

1,

MANHÃES-DE-CASTRO, R. 2, BOLAÑOS-JIMÉNEZ, F.

1 Departamento de Nutrição - UFPE,

2

Physiologie des Adaptations Nutritionnelles - UN, 3 Núcleo de Enfermagem - CAV-UFPE

Apoio Financeiro: This work was partially supported by CAPES-COFECUB (Action Number Me

657/09).

Resumo Objetivos A large body of epidemiological and experimental data indicates that undernutrition during early life is a predisposing factor for the development of obesity and related metabolic diseases at adulthood. However, the cellular and molecular mechanisms underlying this enhanced pathological susceptibility remain largely unknown. The aim of this study was to determinate the long-term effects of protein restriction during perinatal development on the functional and structural properties of skeletal muscle. Métodos All experiments were performed in accordance with the European Communities Council Directive of 24/11/86 (86⁄609⁄EEC) regarding the care and use of animals for experimental procedures. The metabolic properties of soleus muscle derived from male adults rats born to dams fed a control (17% protein, C) or a low-protein (8% protein, LP) diet throughout pregnancy and lactation were evaluated by the measurement of the enzymatic activities of hexokinase (HK), β-hydroxyacyl CoA dehydrogenase (β-HAD) and citrate synthase (CS) as well as by profiling by real-time PCR the expression of several genes implicated in the regulation of the glycolytic and oxidative pathways. In addition, the effects of protein-restriction on muscle fiber type composition were evaluated by mATPase and NADH-Tetrazolium reductase (NADH-TR) staining. Results are expressed in mean±SEM. Statistical differences were assessed by unpaired Student’s t-test. Resultados Offspring born to LP mothers exhibited reduced body weight as compared with their control counterparts from weaning until the end of the experiment (body weight at weaning C=45.4±0.46g, n=12 versus LP=19.5±0.66g, n=12; body weigh at 120d C=385.4±7.10g, n=12 versus LP=319.1±15.17g, n=12, p < 0.001). A reduction in the enzymatic activity of HK with no change in β-HAD and CS under ad libitum feeding conditions was observed in LP rats as compared with controls (HK activity C= 1.50±0.13μmol/min/mg of protein versus LP=0.73±0.21μmol/min/mg of protein, n=6, p < 0.05). In the fed state, LP rats showed enhanced expression levels of key regulatory genes of mitochondrial metabolism including CPT1-a (+240%), UCP3 (+220%) and PGC1α (+300%) ( p < 0.05 and n=6 for both groups). There was no changes in fiber types proportion using mATPase staining ( p > 0.05). However, the muscle fibers of LP rats in the soleus exhibited reduced oxidative capacity as indicated by the decreased proportion of stained fibers (C=97.3±0.37%, n=8 versus LP=96.3±0.04%, n=8) and increased proportion of non-stained fibers using NADH-TR staining (C=2.27±0.06%, n=7 versus LP=3.71.±0.04%, n=6, p < 0.001). Conclusão We conclude that altered skeletal muscle function precedes and may contribute to development of metabolic disorders associated with perinatal malnutrition.

FeSBE 2012

Resumo: 20.040

EFEITO DO TREINAMENTO FÍSICO MODERADO NA MORFOMETRIA DA PAREDE ARTERIAL DE RATOS ADULTOS SUBMETIDOS À DESNUTRIÇÃO PERINATAL.

Autores

1LIU, Y. U. H.

2, BARRETO, M. D. P.

2, MORAIS, D. S. C. D.

3, FREITAS, C. D. M.

3,

NASCIMENTO, L. C. P. D. 1, FILHO, R. C.

3, SILVA, A. B. D.

4, PALMEIRA, A. D. A.

1,

LEANDRO, C. G. 1,4

, LAGRANHA, C. J. 1 Núcleo de Educação Física e Ciências do Esporte -

CAV/UFPE, 2 Departamento de Patologia, UFPE - UFPE,

3 Núcleo de Nutrição-CAV-UFPE -

UFPE/CAV, 4 Mestre em Patologia - UFPE

Apoio Financeiro: FACEPE e CNPq

Resumo Objetivos Analisar o efeito do treinamento físico moderado sobre a morfometria das artérias aorta torácico (AAT), aorta horizontal (AOH) e carótida comum esquerda (ACCE) de ratos adultos submetidos ou não à desnutrição proteica na gestação e na lactação. Métodos Foram utilizados ratos albinos da linhagem Wistar da colônia de criação do Departamento de Nutrição da Universidade Federal de Pernambuco. Os animais foram mantidos em sala com temperatura de 23 ± 2°C, ciclo claro-escuro invertido. Inicialmente, durante os períodos de gestação e lactação, as ratas e seus filhotes receberam dieta específica para formação de dois grupos experimentais: controle (caseína 17%) e desnutrido (caseína 8%). Após esse período somente os filhotes machos (Controle, n=12 e Desnutrido, n=10) permaneceram no experimento e passaram a receber dieta Labina. Aos 60 dias de vida, os grupos foram subdivididos de acordo com a realização do treinamento físico: Controle (C, caseína17%, n=06); Desnutrido (D, caseína 8%, n=04); Treinado (T, caseína17%, treinamento físico, n=06) e Desnutrido Treinado (DT, caseína 8%, treinamento físico, n=06). Os animais treinados foram submetidos a um programa de treinamento físico moderado, em esteira motorizada, segundo Leandro, et al., 2007. Os animais foram sacrificados aos 123 dias de vida. As análises da túnica média da parede arterial foram realizadas através de microscópio óptico, utilizando a média de aferição de quatro pontos, diametralmente opostos. Para análise do diâmetro luminal foi utilizada lupa e traçadas duas retas, de modo que elas se cruzavam formando 90° entre si. Com os dois valores do diâmetro obteve-se uma média. Os valores foram expressos em média ± EPM. Para a comparação entre os grupos foram utilizados o teste ANOVA one-way, seguido do pós-teste de Tukey para comparações múltiplas. O nível de significância foi mantido em 5% ( p < 0,05). Comitê de ética: 23076.018163/2009-15 Resultados A espessura da túnica média (μm) na AAT não apresentou diferença significativa entre os grupos (C=159,61±15,58; D=208,06±22,83; CT= 165,76 ± 6,76 e DT=179,39 ±11,88). Na AAH, o grupo DT apresentou menor valor de espessura da túnica média (232,16±27,96) comparado ao grupo desnutrido D (264,14±21,75). Em relação à ACCE, os grupos desnutrido D (52,88±6,49) e T (69,19±6,34) obtiveram menor valor quando comparados ao grupo C (90,96±6,22), já o grupo DT (46,93±2,99) apresentou menor valor em comparação com os grupos C e T. No que se refere ao diâmetro luminal (μm) das artérias AAT e AAH, os grupos não apresentaram diferença estatística entre si. Quanto à ACCE, o grupo D (123,55±5,50) apresentou menor valor do diâmetro luminal, em comparação ao grupo C (222,95±35,22). Conclusão A desnutrição provocou diminuição da espessura da parede da ACCE. O treinamento físico influenciou a redução da espessura da túnica média da AAH dos animais submetidos à desnutrição.

FeSBE 2012

Resumo: 20.041

Obesidade materna e Bezafibrato: reversão dos efeitos da programação metabólica sobre o remodelamento hepático da prole

Autores 1MAGLIANO, D. C.

1, BARGUT, T. C. L.

1, MANDARIM-DE-LACERDA, C. A.

1, SOUZA-

MELLO, V. 1 Laboratório de Morfometria, Metabolismo e Doença Cardiovascular - UERJ

Apoio Financeiro: CNPq, Capes, Faperj

Resumo Objetivos Nos últimos anos, a dieta humana mudou drasticamente culminando em diversas patologias associadas à obesidade dentre as quais se destaca a esteatose hepática. Entretanto, as complicações associadas a essa mudança de estilo de vida não só afetam a geração presente como também ameaça as gerações futuras. Diante deste contexto faz-se necessária a investigação de novas terapias para a esteatose programada intra-útero. Objetivamos avaliar se a administração de bezafibrato (BZ) aos três meses de idade é capaz de amenizar as alterações hepáticas em machos programados por dieta hiperlipídica perinatal. Métodos CEUA 012/11. Fêmeas virgens foram alimentadas com dieta controle (C, n=10) ou hiperlipídica (HL, n=10) por oito semanas e então acasalaram, permanecendo com as respectivas dietas durante toda gestação e lactação. A massa corporal (MC) das mães foi avaliada semanalmente e a ingestão calórica/alimentar através do Compulse. No período pré-acasalamento foi realizado o Teste Oral de Tolerância à Glicose (TOTG) das mães para verificar a Área Sob a Curva (ASC). Ao desmame, as proles de machos foram separadas em quatro grupos: C, C/BZ, HL e HL/BZ (n=10, por grupo), dos quais os grupos C/BZ e HL/BZ iniciaram o tratamento aos três meses de idade, permanecendo por três semanas. A prole teve sua MC aferida semanalmente e ingestão alimentar através do Compulse. Após duas semanas de tratamento, foi realizado o TOTG dos animais. Na terceira semana foi realizado o sacrifício em que o sangue foi coletado por punção cardíaca para posteriores análises bioquímicas (triglicerídeo plasmático) e o fígado foi dissecado para avaliação bioquímica (triglicerídeo hepático) e processado para microscopia de luz e realização de estereologia. Amostras de fígado foram armazenadas em freezer para posterior análise por Western-Blotting de proteínas ligadas a lipogênese e beta-oxidação. Resultados As fêmeas que receberam dieta HL tiveram um maior ganho ponderal (+29%, p < 0,0436), assim como apresentaram uma maior ingestão energética (+6%, p < 0,0302). Foi observada uma intolerância à glicose nas mães HL (+17% da ASC , p < 0,0202). A prole HL apresentou uma maior ingestão alimentar (+21%, p < 0,01) enquanto a prole HL/BZ uma menor ingestão alimentar (-14%, p < 0,05). O tratamento com bezafibrato mostrou redução da MC dos animais (-24% no grupo HL/BZ e -10% no grupo C/BZ, p < 0,01). Notou-se uma intolerância à glicose nos animais HL (+26% na ASC, p < 0,01) e uma melhora da tolerância dos animais HL/BZ (-27% da ASC, p < 0,001). O triglicerídeo plasmático e hepático apresentou-se elevado no grupo HL (+23%, +21%, respectivamente, p < 0,001) e diminuído no grupo HL/BZ (-26%, -16%, respectivamente, p < 0,001). Foi observada esteatose na prole HL (+143%, p < 0,001) que foi aliviada com o tratamento na prole HL/BZ (-85%, p < 0.001). O SREBP-1c apresentou-se maior na prole HL que do que no grupo C (+178%, p < 0,001). Os grupos tratados com bezafibrato não alteraram os níveis desta proteína quando comparados aos seus respectivos controles (C, 1.374±0.1478 u.a., C/BZ, 1.051±0.09 u.a., HL, 2.454±0.1313 u.a., HL/BZ, 2.395±0.2263 u.a.). O PPAR-alfa apresentou uma menor expressão na prole HL quando comparado a C (-72%, p < 0,001). Ambos os grupos tratados apresentaram um aumento de PPAR-alfa em relação ao seu respectivo controle (+215% do grupo C/BZ, +640% do grupo HL/BZ, p < 0,001). Conclusão O tratamento com bezafibrato foi capaz de aliviar as alterações hepáticas da prole ocasionadas pela obesidade materna induzida por dieta hiperlipídica.

FeSBE 2012

Resumo: 20.042

FeSBE 2012

AUMENTO DA EXPRESSÃO DE RNAm DAS CONEXINAS E CADERINAS EM FÍGADO DE RATOS SUBMETIDOS À RESTRIÇÃO CALÓRICA E SUPLEMENTADOS COM ÁCIDO LINOLÉICO CONJUGADO

Autores 1SPATTI, E. F.

1, PESTANA, N. F.

1, MORAES, C. D.

1, AMARAL, M. E. C. D.

1, CATISTI, R.

1,

OLIVEIRA, C. A. D. 1 Programa de Pós-Graduação em Ciências Biomédicas - FHO / UNIARARAS

Apoio Financeiro: Fundação Hermínio Ometto - FHO.

Resumo Objetivos As conexinas e caderinas são proteínas mediadoras da comunicação intercelular, sendo essencial para o funcionamento dos tecidos e desenvolvimento dos órgãos. O trabalho teve como objetivo investigar a expressão dos RNAm das conexinas 26, 32 e 43, e das caderinas N e E em fígado de ratos submetidos à restrição calórica (RC) associada ou não a suplementação de 1% de ácido linoleico conjugado (CLA). Métodos Foram utilizados ratos machos, Wistar, com 2 meses de idade, pesando 200-300g. Os animais foram tratados por 21 dias e divididos em 4 grupos experimentais: Controle (CTL) tratados com dieta “ad libitum”, RC receberam 60% da ingestão calórica do CTL, CLA receberam, via gavagem, 1% de ácido linoleico conjugado e RC/CLA submetidos à restrição calórica mais CLA. Após o período de tratamento, o RNA total, de 100mg de tecido hepático, foi extraído utilizando o reagente TRIzol. A síntese de cDNA ocorreu a partir de 2μg de RNA utilizando SuperScript II. Os transcritos dos genes Cx26, Cx32, Cx43, E-cad, N-cad e β-actina foram analisados por RT-PCR (Semi-Quantitative Reverse Transcriptase – PCR). A intensidade das bandas foi avaliada densitometricamente utilizando o Software Scion Image. Os dados foram expressos como média ± erro padrão e a análise estatística foi determinada utilizando ANOVA seguido de Bonferroni com nível de significância p < 0,05. O presente estudo foi aprovado no comitê de ética em experimentação animal da Uniararas (313/2009). Resultados Pode-se observar que todos os níveis de transcritos das conexinas e caderinas analisados foram similares entre os grupos CTL comparado ao RC. Foi verificado que o RNAm das conexinas 43 e 26 nos animais tratados com CLA foram significativamente maiores (Cx43= 1,07 ± 0,06; Cx26= 0,96 ± 0,08), quando comparados com os animais do grupo CTL (Cx43= 0,50 ±0,03; Cx26= 0,6 ±0,04). O aumento das conexinas 43 e 26 também foi observado no grupo CLA comparado com o RC (RC - Cx43= 0,65 ± 0,03; Cx26= 0,66 ± 0,05; CLA - Cx43= 1,07 ± 0,06; Cx26= 0,96 ± 0,08). Na análise entre os grupos CTL e RC/CLA observou-se aumento significativo em todas as conexinas e caderinas estudadas nos animais suplementados com CLA (CTL - Cx43= 1,07 ± 0,06; Cx26= 0,96 ± 0,08; Cx32= 0,85 ± 0,02; N-caderina= 0,73 ± 0,02; E-caderina= 0,89 ± 0,007; RC/CLA - Cx43= 1,41 ± 0,06; Cx26= 0,98 ± 0,07; Cx32= 1,39 ± 0,1; N-caderina= 1,25 ± 0,04; E-caderina= 1,38 ± 0,08). Resultado semelhante foi observado entre os grupos RC comparado ao RC/CLA (RC - Cx43= 0,65 ± 0,03; Cx26= 0,66 ± 0,05; Cx32= 0,91 ± 0,03; N-caderina= 0,68 ± 0,03; E-caderina= 0,09 ± 0,04; RC/CLA – dados acima). Notou-se um aumento significativo dos transcritos das conexinas 43 e 32 e da N-caderina no grupo RC/CLA versus CLA (CLA - Cx43= 1,07 ± 0,06; Cx32= 0,92 ± 0,03; N-caderina= 0,88 ± 0,06; RC/CLA – dados acima). Conclusão Nossos dados sugerem que o aumento dos níveis de RNAm das conexinas 43, 32 e 26 e das N e E-caderinas observado nos grupos CLA e RC/CLA deva-se a um mecanismo compensatório possivelmente em função de um efeito nocivo do CLA no fígado desses animais. Esses achados corroboram com a literatura que mostra que alimentos enriquecidos com CLA podem provocar aumento do estresse oxidativo, inflamação e esteatose hepática. No entanto observamos similaridade dos transcritos das conexinas e caderinas em animais CTL e RC sugerindo que o estado nutricional do animal não interfere na expressão dos RNAm analisados.

Resumo: 20.043

FeSBE 2012

AVALIAÇÃO DO METABOLISMO HEPÁTICO DE RATOS SUBMETIDOS À DESNUTRIÇÃO PERINATAL

Autores

1SILVA, A. B. D.

2, FILHO, R. C. D. S.

1, NASCIMENTO, L. C. P. D.

1, FREITAS, C. D. M.

3,

BENTO-SANTOS, A. 2, LEANDRO, C. G.

2, LAGRANHA, C. J.

2, FERNANDES, M. P.

1 NÚCLEO

DE NUTRIÇÃO - UFPE / CAV, 2 NÚCLEO DE EDUCAÇÃO FÍSICA E CIÊNCIAS DO ESPORTE -

UFPE / CAV, 3 DEPARTAMENTO DE NUTRIÇÃO - UFPE

Apoio Financeiro: CNPq e FACEPE

Resumo Objetivos Avaliar o efeito da desnutrição proteica no metabolismo hepático de ratos, como provável mecanismo molecular subjacente ao aparecimento de doenças metabólicas da vida adulta via programação nutricional perinatal. Métodos Foram utilizados ratos machos da linhagem Wistar. A manipulação e os cuidados com os animais seguiram as recomendações do COBEA e aprovação do comitê de ética em estudos com animais do Centro de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Pernambuco (n°23076.044262/2010-88). As ratas prenhas foram divididas em dois grupos de acordo com a dieta fornecida: controle (caseína a 17%) e desnutridas (caseína a 8%). Na lactação, as ratas continuaram recebendo dieta conforme o grupo experimental e após o desmame (21 dias de idade) os filhotes receberam dieta equilibrada padrão (74,5% de carboidratos, 23% de proteínas e 2,5% de lipídeos). As análises metabólicas ocorreram quando os animais completaram 100 dias. Para dosagem de albumina sérica também foram utilizados animais com 180 dias de idade. Foi avaliada a atividade de algumas enzimas metabólicas como citrato sintase (Alp et al. Biochem. J., 154: 689-700,1976) e β-hidroxyacil-CoA desidrogenase (Ito et al. Am J Physiol Heart Circ Physiol 298:1426–1437, 2010), além da dosagem sérica de albumina através de Kit colorimétrico da Labtest (Peters et al. Métodos selecionados de química clínica, 9:319, 1982). Resultados Os resultados mostraram que não há diferença na dosagem de albumina sérica entre os grupos controle e de animais com 100 dias de idade cujas mães sofreram desnutrição protéica durante a gestação (Controle: 2,65 ± 0,14 g/L (n=9) vs Desnutridos: 2,57 ± 0,1 g/L (n=7)). A fim de verificarmos se ocorreria hipoalbuminemia com o passar do tempo, também dosamos os níveis de albumina em animais com 180 dias de idade, e não foi verificada diferença significativa entre os grupos (Controle: 1,925 g/L ± 0,16 (n=4) vs Desnutrido: 2,09 ± 0,09 g/L (n=7)). Não houve diferença significativa na atividade da enzima citrato sintase entre os grupos avaliados (Controle: 478,4 ± 48,7 nmol/min/mg proteína (n=8) vs Desnutrido: 408,1 ± 25,39 nmol/min/mg proteína (n=8)). A atividade da enzima β-hidroxyacil-CoA desidrogenase foi significativamente maior nos animais que sofreram desnutrição perinatal (Controle: 5,01 ± 2,2 nmol/min/mg proteína (n=4) vs Desnutrido: 71,64 ± 14,6 nmol/min/mg proteína (n=5), p < /i> < 0 ,05). Conclusão Os dados obtidos sugerem que a desnutrição proteica perinatal durante o período crítico do desenvolvimento não altera os níveis séricos de albumina, que é a principal proteína de transporte sintetizada pelo fígado. Também não foi verificada alteração na atividade de uma enzima chave do ciclo de Krebs, a citrato sintase. No entanto, o aumento significativo na atividade da β-hidroxyacil-CoA desidrogenase, enzima que atua na β-oxidação de ácidos graxos, indica um aumento no metabolismo lipídico de animais submetidos à desnutrição perinatal.

FeSBE 2012

Resumo: 20.044

DIRECT PHOSPHORYLATION OF GLYCEROL PLAYS AN IMPORTANT ROLE IN THE METABOLISM OF LIPIDS IN THE LIVER OF RATS FED A LOW PROTEIN-HIGH-CARBOHYDRATE DIET

Autores

1MENEZES, A. L.

1, PEREIRA, M. P.

2, CHAVES, V. E.

1, FROELICH*, M.

1, BAVIERA, A. M.

1,

ANDRADE, C. M. B. 1, KAWASHITA, N. H.

1 Departamento de Química - UFMT,

2 Coordenadoria

de Enfermagem - UFSJ

Apoio Financeiro: FAPEMAT; CAPES; CNPq

Resumo Objetivos Previous studies performed in our laboratory showed that rats fed a low protein-high carbohydrate diet (LPHC- 6% protein, 74% carbohydrate) for 15 days during growth stage had higher food intake but a lower gain of weight, increased content of lipids in the liver, adipose tissues and carcass and significant loss of muscle mass. This diet also induces a decrease in post-prandial plasma insulin compared to rats fed control diet (C- 17% protein, 63% carbohydrate). Recently, we found that the increased in content of lipids in the liver of LPHC rats was accompanied by increase in total de novo fatty acid (FA) synthesis (154%) and that although the FA synthesis from glucose also had increased 270%, represents only 6% of the total synthesis. Liver of animals treated with LPHC diet also showed an increase glycerokinase (GyK) content, enzyme that catalyze glycerol phosphorylation to glycerol 3-phosphate and possibility its use in the generation of other metabolites, including fatty acids. The objective of this study was to evaluate the contribution of glycerol to the increase in de novo FA synthesis in LPHC rats and the content of the proteins of the insulin signaling pathway and the transcription factor SREBP-1c, directly associated with insulin and lipogenesis. Métodos This study was approved by ethics committee in animal research of the Federal University of Mato Grosso (23108.029611/09-7). Male rats Wistar (8-10 per group), in growing state (30 days) weighing approximately 100g, were fed LPHC or C diet for 15 days. FA synthesis from glycerol was evaluated in vitro by rate of incorporation of [U-14C]-glycerol into glyceride-FA in liver slices. After 60 minutes incubation, total lipids was extracted and saponified to isolate the fraction 14C-FAs. To investigate changes on protein insulin signaling pathway, the in liver was dissected and IR, AKT and the levels of basal and stimulated AKT phosphorylation (saline or insulin 4U/mL injected in the portal vein) were evaluated by Western blotting. The hepatic nuclear extract was used to evaluate the expression of SREBP-1c. Data were expressed as means ± SEM, statistically analyzed by Student t-test or ANOVA (p≤0.05). Resultados In vitro [U-14C]glycerol incorporation into glyceride-FA (μmol/g/h) was approximately 12x higher in liver slices from LPHC rats (126.4 ± 33) than in slices from the C rats (10.20 ± 3.58). The LPHC diet induced an increase of IR (35%), AKT (76%) and basal and insulin-stimulated AKT phosphorylation levels (LPHC- 157.4 ± 8.4%; 497.9 ± 44.5% and C-80.89 ± 3.83%; 244.0 ± 15.03%, respectively) when compared to C group. Also was observed an increase (56%) in hepatic SREBP-1c protein level on LPHC group, when compared with C group. Conclusão The data suggest that LPHC diet increases significantly the use of glycerol as substrate for FA synthesis and increased the phosphorylation levels of AKT basal and insulin stimulated, increasing the synthesis of total FA via SREBP-1c, despite lower levels of post-prandial plasma insulin.

Resumo: 20.045

FeSBE 2012

DEFINIÇÃO DO PERFIL LIPOLÍTICO NO TECIDO ADIPOSO BRANCO VISCERAL DURANTE O DESENVOLVIMENTO DA CAQUEXIA ASSOCIADA AO CÂNCER.

Autores

1KNOBL, P. V. *

1, SANTOS, K. B. N. H.

2,1, NEVES, R. X.

1, HENRIQUES, F. S.

1, FRANCO, F. O.

2, PROENÇA, A. R. G.

2,1, SERTIÉ, R. A. L.

2, LIMA, F. B.

1, BATISTA;M.L.Jr.

1 Núcleo Integrado

de Biotecnologia - UMC, 2 Instituto de Ciências Biomédicas - USP

Apoio Financeiro: FAPESP; CNPq; UMC/PIBIC

Resumo Objetivos A caquexia associada ao câncer é uma síndrome complexa, com acentuada desordem metabólica, que leva a depleção do tecido adiposo. Tal processo fisiológico é descrito pela inibição da lipogênese e a estimulação da lipólise, tendo o aumento da lipólise como principal indutor da atrofia dos adipócitos. Por outro lado, pouco se sabe acerca de tais alterações durante o desenvolvimento da síndrome. O presente estudo avaliou a lipólise no tecido adiposo branco visceral durante o desenvolvimento da caquexia nos tecidos retroperitonial (RP) e mesentérico (ME). Métodos Projeto aprovado pelo cômite de ética da Universidade Mogi das Cruzes (processo: 001/2012). Foram utilizados ratos da linhagem Wistars, pesando entre 350-400g., com 7 a 8 semanas de vida. Para avaliar a lipólise, os grupos experimentais foram divididos em 2 (n=5) sendo: câncer (CA), que foi aplicada injeção subcutânea contendo 2×10 7 células do tumor de Walker 256 em qs p < /i> 1 mL de solução salina (0,9%); e controle (CO), que receberam injeção subcutânea de veiculo. A lipólise foi mensurada durante o desenvolvimento da caquexia, 4 e 14 dias após a inoculação do tumor. O ensaio de lipólise foi realizado na ausência (basal) ou presença (máximo) de 10 -5 M de isoproterenol (agonista β-adrenérgico). Para tal, foram utilizados 40 μL de suspensão de adipócitos isolados, contendo 5 mM de glicose. A quantidade de glicerol liberada dos adipócitos no meio de incubação foi determinada pelo método enzimático colorimétrico (Sigma) e usada como um índice da taxa de lipólise. Os resultados expressos em nmol.10 -6 cels.h 1 e nível de significância estipulado em 0,05. Resultados Os resultados foram expressos através da comparação do grupo tumor com o grupo controle, nos respectivos 4º e 14º dia, verificando as taxas de lipólise basal e máxima. A lipólise basal realizada no tecido mesentérico no grupo tumor, apresentou queda no 4º dia e aumento no 14º dia ( P < 0,05 ) quando comparado com o grupo controle. Ainda no ME, a lipólise máxima reduziu no 4º dia e aumentou no 14º dia no grupo tumor ( P < 0,05). Já no tecido retroperitonial, não houve diferença significativa (P >0,05) comparando-se os grupos tumor e controle, 4 e 14 dias. Conclusão O presente estudo demonstrou que no tecido RP a lipólise se mantém significativamente estável, enquanto no tecido ME a lipólise tem sua diminuição no 4º dia e aumento no 14º dia. Infere-se, que no 14º dia, possa estar havendo uma tentativa do organismo em suprir as reservas energéticas aumentando a concentração de ácidos graxos livres, que no interior das células sofrerão oxidação e assim produzirá energia. Contrapondo a idéia de sempre haver aumento das taxas lipolíticas, essa pesquisa demonstrou uma diminuição da lipólise no 4º dia após inoculação do tumor.

FeSBE 2012

Resumo: 20.046

CURSO TEMPORAL DAS ALTERAÇÕES METABÓLICAS INDUZIDAS POR PRIVAÇÃO DE SONO PARADOXAL

Autores 1MORAES, D. A.

1, SUCHECKI, D.

1, SUCHECKI, D.

1 Psicobiologia - UNIFESP

Apoio Financeiro: FAPESP, AFIP e CNPq

Resumo Objetivos Avaliar o curso temporal das alterações de peso corporal e de consumo alimentar, durante 4 dias de privação de sono paradoxal (PSP) e investigar possíveis mecanismos responsáveis por essas alterações. Métodos Foram utilizados ratos machos Wistar (N=112), divididos em 2 grupos, controle (CTL) e PSP, sendo que a quarta parte de cada grupo foi eutanasiada em cada dia de PSP para obtenção de sangue e cérebros para posteriores avaliações. A PSP foi realizada pelo método da plataforma única, por um período de 96 h, o peso corporal foi avaliado pela manhã e o consumo de ração, em dois horários: 7h30min/18h30min, ao longo dos 4 dias de PSP. Todos os procedimentos foram aprovados pelo comitê de ética em pesquisa da UNIFESP (CEP: 1372/09). Para a análise estatística da variação de peso corporal e do consumo alimentar foi realizado o teste GLM para medidas repetidas, enquanto que para a glicemia foi utilizado o teste GLM univariado. O teste a posteriori de Bonferroni foi aplicado quando necessário e o nível de significância foi estabelecido em p < 0,05. Resultados Em relação à variação do peso corporal, o GLM revelou interação entre grupo e dia (F3,78 = 5,52; p < 0,004). O teste a posteriori mostrou que o grupo PSP perdeu peso ao longo dos quatro dias e que esta perda foi estatisticamente diferente entre o D1 e os demais dias (D1 = -5,99% ± 2,00; D2 = 0,92% ± 1,11; D3 = -0,01% ± 1,68; D4 = -0,88% ± 1,30; média da variação do peso corporal ± desvio padrão (d.p.) de cada dia). O mesmo foi observado para o grupo CTL (D1 = -1,80% ± 2,00; D2 = 0,99% ± 2,11; D3 = 0,76% ± 1,21; D4 = 0,16% ± 1,06; média da variação do peso corporal ± d.p. de cada dia). Além disso, houve diferença significativa entre os grupos CTL e PSP nos D1 e D2. No que diz respeito ao consumo alimentar, o GLM revelou interação entre grupo e dia para o período da manhã (F3,78 = 6,33; p < 0,002), em que ocorreu aumento progressivo do consumo alimentar dos animais PSP, com diferença significativa entre o D1 e os demais dias e o D2 em relação ao D4 (D1 = 4,09 ± 2,28; D2 = 7,17 ± 2,69; D3 = 8,83 ± 2,82; D4 = 10,65 ± 3,38; média do consumo alimentar do período da manhã ± d.p. de cada dia, em gramas). Por outro lado, o grupo CTL apresentou um padrão estável de consumo alimentar pela manhã (D1 = 3,02 ± 2,67; D2 = 4,14 ± 2,44; D3 = 5,05 ± 2,80; D4 = 5,04 ± 3,77; média do consumo alimentar do período da manhã ± d.p. de cada dia, em gramas). Além disso, houve diferença significativa entre os grupos nas manhãs dos dias 2, 3 e 4. Quanto à glicemia, não foram encontradas diferenças nem entre os grupos nem entre os dias (PSPD1 = 120,86 ± 23,5; CTLD1 = 116,86 ± 11,7; PSPD2 = 110,86 ± 15,0; CTLD2 = 125,43 ± 18,6; PSPD3 = 114,00 ± 10,6; CTLD3 = 116,57 ± 10,5; PSPD4 = 104,86 ± 8,66; CTLD4 = 112,86 ± 7,35; média ± d.p. da glicemia, em µg/µL). Conclusão A privação de sono produziu perda de peso corporal, aumento no consumo alimentar durante o período da manhã, sem alteração na glicemia, o que indica que o grupo PSP apresenta maior gasto energético e utilização da fonte energética. Perspectivas: Análises adicionais estão sendo realizadas para investigar possíveis mecanismos que expliquem essas alterações, como dosagem de leptina e GHrelina, western blotting para os receptores de leptina, de insulina e AMPK.

FeSBE 2012

Resumo: 20.047

EFFECTS OF BILE ACID RECEPTOR AGONISTS INT-747 and INT-777 ON ESTROGEN DEFICIENCY-RELATED POST-MENOPAUSAL OBESITY AND HEPATIC STEATOSIS

Autores

2,3OLIVEIRA, M. C. de

3, ISHII-IWAMOTO, E. L.

3, SALGUEIRO, C. L.

2, OUDE ELFERINK, R.

J.P 2, GAEMERS, I. C.

2 Tytgat Institute - Academic Medical Center - UVA,

3 Laboratory of

Biological Oxidations, Department of Biochemistry - UEM

Apoio Financeiro: CAPES

Resumo Objetivos Menopause is a physiological state characterized by estrogen deficiency. Estrogens have important effects on body fat distribution. Estrogen deficiency can result in increased visceral adiposity and related metabolic pathologies such as chronic adipose tissue inflammation and hepatic steatosis. Recently two bile acid (BA) receptors have emerged as putative therapeutic targets for obesity and the related metabolic disorders: the nuclear farnesoid-X receptor (FXR) and the protein G coupled receptor (TGR5). FXR is involved in lipid and cholesterol homeostasis, TGR5 is implicated in energy expenditure. The aim of this study was to evaluate the effects of estrogen deficiency on metabolism and the efficacy of the novel agonists INT-747 (for FXR) and INT-777 (for TGR5) as an alternative treatment for menopause pathologies. Métodos Female Swiss CD-1 mice (age 9-10wk, 24-28g, n=8/group) were ovariectomized (OVX); groups of SHAM operated mice served as controls. All mice were fed a high fat diet (HFD; 45% kcal fat) for a total of 5 weeks. For 2 groups of SHAM and 2 groups of OVX mice the diet was supplemented with either INT-747 or INT-777 and for 1 OVX group the diet was supplemented with 17&beta-estradiol (E2), as a positive control, for the last 4 weeks. Bodyweight and food intake were monitored weekly. After 5 weeks mice were sacrificed and tissues were immediately harvested. All experimental procedures were approved by the Institutional Animal Care and Use Committee of the Academic Medical Center, protocol number ALC 102377. Resultados At week 5, bodyweight gain in OVX mice was 90%&plusmn7,4 ( p < 0,0001) more than in SHAM mice. INT-747 and INT-777 treatment in OVX mice prevented bodyweight gain: at sacrifice it was 44%&plusmn10,2 and 38%&plusmn6,2 ( p < 0,01) less, respectively, compared to OVX mice. No significant differences were found in weekly food intake. Liver triglyceride (TG) and cholesterol (Chol) contents were measured in liver homogenates by colorimetric assays. Liver TG were increased in the OVX group (+100%&plusmn62,7 - p=0,01) compared with the SHAM mice, and decreased in the OVX-INT747 (-81%&plusmn25,2 - p < 0,001), OVX-INT777 (-64%&plusmn43 - p < 0,001) and OVX-E2 (-67%&plusmn22 - p < 0,001) groups compared with the OVX group. As well as TG, liver CHOL was increased in OVX group (+146%&plusmn174,3 p < 0,01) and decreased in OVX-INT747 (-79%&plusmn9,3 - p < 0,01), OVX-INT777 (-67,3%&plusmn23,2 - p < 0,01) mice but not significant different in OVX-E2 group. Conclusão These results suggest that the FXR and TGR5 agonists may prevent bodyweight gain and hepatic steatosis caused by ovariectomy. Studies on energy expenditure and gene expression are ongoing and these analyses will likely lead to the recognition of regulatory pathways in muscle and brown adipose tissue that may be relevant in menopause metabolic disorders.

FeSBE 2012

Resumo: 20.048

RELAÇÃO ENTRE ESTADO NUTRICIONAL E CAPACIDADE DE PRODUÇÃO DE FORÇA MUSCULAR EM CRIANÇAS PRÉ-PÚBERES

Autores

1,2MARINHO, S. M. O. C.

1, NASCIMENTO, E.

1, CABRAL, P. C.

1, SANTANA-DA-SILVA, M.

4,

SOUZA, T. O. L. 1, MANHÃES-DE-CASTRO, R.

3,1, LAMBERTZ, D.

1,4, LAMBERTZ, K. M. F. T.

1

Nutrição - UFPE, 2 Centro de Ciências da Saúde - UFRB,

3 Centro Acadêmico de Vitória - UFPE,

4

Fisioterapia - UFPE

Apoio Financeiro: CAPES e CNPq

Resumo Objetivos O estado nutricional é um indicador qualitativo de saúde e sua adequação é fundamental para propiciar a plenitude dos eventos de crescimento e desenvolvimento comuns em crianças. Este trabalho teve como objetivo avaliar o consumo alimentar e a produção de força muscular em um grupo de crianças pré-púberes. Este trabalho foi aprovado segundo resolução do 196/96 do CONEP, CEP/CCS/UFPE No 044/06 e todos os responsáveis assinaram termo de consentimento livre e esclarecido. Métodos Trata-se de estudo descritivo transversal, realizado no Semi Árido do Nordeste Brasileiro. Aos 108±6 meses foram avaliadas, segundo o indicador altura-idade, 61 crianças: 47 eutróficas-E e 14 baixa estatura-BE, que atenderam aos critérios de inclusão: apresentavam bom estado-geral de saúde e ausência de histórico de patologias neuromusculares, destas 41 (30E e 11BE) efetivaram todo o protocolo de avaliação muscular. Foram investigados dados alimentares, antropométricos e biomecânicos. Para análise alimentar utilizou-se recordatório de 24horas. Foram realizadas medições antropométricas e após foi utilizado o Ergômetro de Tornozelo, com a finalidade de avaliar as propriedades biomecânicas por meio de testes musculares. Os dados dietéticos foram digitados e analisados pelo software Avanutri versão 3.0 e valores energéticos totais (VET) e de macro e micronutrientes foram obtidos. Para análise estatística utilizou-se o software Jandel Sigma Stat versão 2-0 e Statgraphics 5.1, admitindo-se em todos os casos a significância de p < 0,05. A comparação das medianas entre os grupos foi realizada através do teste Mann-Whitney ( p < 0,05). Para avaliação das propriedades biomecânicas foi utilizado o ergômetro de tornozelo, avaliando a força de contração voluntária máxima (CVM) e de contração induzida eletricamente (CIE), twitch torque, sendo estes valores relativizados com a circunferência da panturrilha (CP). Foi ainda calculado o índice de déficit de ativação (IDA), por meio da técnica do twitch interpolado, onde foi calculada a diferença entre os percentuais de déficit de ativação e da CVM, esta relação exponencial gerou o IDA. Foram realizados três registros da CVM e cinco da CIE por criança. Os valores são apresentados em média±erro padrão e comparados através do teste t Student. Resultados Dos nutrientes consumidos foi encontrada diferença no consumo, em mediana (mínimo/máximo), de carboidratos (E=197,0g(174,0/233,7), BE=169,6g(154,6/200,1); p=0,040), proteínas (E=53,1g(42,5/60,5), BE=36,8g(32,5/56,3); p=0,036), VET (E=1354,1kcal(1214,6/1661,5), BE=1198,4kcal(906,2/1351,4); p=0,019), fibras (E=12,0g(9,8/13,9), BE=9,4g(7,8/12,4); p=0,011), ferro (E=9,2mg(7,7/11,9), BE=7,6mg(6,5/9,4); p=0,018) e vit. B12 (E=2,0mcg(1,0/4,1), BE=1,3mcg(0,5/3,0); p=0,049), quanto às medidas antropométricas foi encontrada diferença no peso corporal (E=29,5±1.0kg, BE=20,7±0,7kg; p < 0,001) altura (E=133,7±1,0cm, BE=118,8±0,9cm; p < 0,001), circunferência da panturrilha (E=26,1±0,4cm, BE=22,7±0,4cm; p < 0,001) considerando-se média ± erro padrão da média. A força muscular mostrou-se diminuída no grupo BE ( p < 0,05) mesmo após relativização com a CP; CVM (E=19,8±1,3nm, BE=13,1±0,9nm; p=0,01), CIE (E=3,3±0,3nm, BE=1,9±0,2nm; p=0,008), CVM/CP (E=73,2±4,6nm. m-1, BE=57,7±4,0 nm. m-1; p=0,04), CIE/CP (E=11,9±1,0nm. m-1, BE=6,5±1,2nm. m-1; p=0,02); os valores do IDA foram maiores nas crianças BE (E=0,26±0,02, BE=0,46±0,04; p=0,001).

FeSBE 2012

Conclusão Os resultados indicam que as crianças identificadas com baixa estatura para a idade apresentaram diferenças quanto ao padrão dietético, do ponto de vista energético e nutricional, em relação às eutróficas, bem como alterações no padrão de produção de força muscular, voluntária ou induzida. Sugere-se, devido à relativização dos valores de força com a CP, que estas alterações não sejam devidas apenas à massa muscular reduzida no grupo BE, mas que uma deficiência nutricional precoce, provavelmente possa ter induzido alterações no padrão de produção de força muscular.

FeSBE 2012

Resumo: 20.049

MODULAÇÃO HEPÁTICA DO SISTEMA CININA EM RATOS SUBMETIDOS À MODELO EXPERIMENTAL DE DIABETES TIPO I

Autores 2DANTAS, E. O. **

3, KOUYOUMDJIAN, M.

4, BORGES, D. R.

2, NAGAOKA, M. R.

2 Biociências

- Unifesp, 3 Bioquímica - Unifesp,

4 Medicina - Unifesp

Apoio Financeiro: FAPESP (11/15379-0 e 08/55928-0) e CNPq (477868)

Resumo Objetivos Avaliar a resposta hipertensiva portal a cininas bem como parâmetros metabólicos (liberação de glicose, depuração de bromosulfaleína e secreção de bile) nos fígados de animais submetidos a modelos experimental de diabetes tipo I (DMI) Métodos CEP0724/09. Ratos machos Wistar, 8 sem, pesando aproximadamente 250g receberam injeção iv de estreptozocina (60 mg/Kg) em citrato de sódio para indução de DMI. Animais controle receberam citrato iv. A glicemia dos animais foi dosada para confirmação da DMI no momento da perfusão de fígado. Perfusão do fígado in situ foi realizada a 37ºC com solução de Krebs/BSA em dois estados: bem alimentado e após jejum. Solução salina, Bradicinina (BK, 0,2 μmol) ou des-arg9-bradicinina, (DABK, 0,26 μmol) foi administrada in bolus na cânula aferente e a pressão portal foi monitorada. Os seguintes parâmetros metabólicos foram analisados: secreção de bile, liberação de glicose e depuração de bromossulfaleína (BSP). A análise estatística foi realizada pelo programa GraphPad Prism 3.0 e foi utilizada ANOVA, seguida de Bonferroni. O nível de significância para rejeição da hipótese nula foi considerado inferior ou igual a 0,05. Resultados A Diabetes foi confirmada pela hiperglicemia dos animais no estado bem alimentado (727 ± 83 mg/dl, n=15) e no jejum (303 ± 56 mg/dl, n=18). Não houve diferença na resposta hipertensiva portal a BK nos grupos estudados comparados com os animais controle. DABK não induz resposta hipertensiva portal em animais controle e DMI Em relação aos parâmetros metabólicos estudados verificamos que não há diferença significativa nos grupos estudados no estado em jejum. No entanto, no estado bem alimentado, verificamos que a DABK promoveu alterações em todos os parâmetros metabólicos analisados: 1. a liberação de glicose foi significativamente menor no grupo STZ (0,7 ± 0,2 mg/g fígado, n=6) que no grupo controle (2,9 ± 0,3 mg/g fígado, n=6); 2. Secreção de bile no grupo STZ (2,9 ± 0,6 μl/min/g fígado, n=5) foi significativamente menor (p=0,018) que no grupo controle (6,0 ± 0,9 μl/min/g fígado, n=6); 3. A meia vida de eliminação do BSP foi significativamente (p=0,001) maior (2,98 ± 0,11 min/g fígado, n=6) no grupo STZ comparado com grupo controle (2,11 ± 0,08 min/g fígado) e com o grupo STZ que recebeu salina (1,80 ± 0,31 min/g fígado, n=6). Conclusão DMI não altera a resposta hipertensiva portal a BK e nem o metabolismo hepático após adição in bolus de BK. Entretanto, injeção in bolus de DABK induz importantes alterações no metabolismo hepático na DMI no estado bem alimentado, como diminuição da liberação de glicose e secreção de bile, além de menor depuração de BSP. Estes dados sugerem participação do receptor B1 de cininas nestes eventos na DMI no estado bem alimentado.

FeSBE 2012

Resumo: 20.050

OBESIDADE ASSOCIADA A ESTRESSE CRÔNICO: AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS PONDERAIS.

Autores

1,2,5DIEFENTHALER, F.

1,2,3, OLIVEIRA, C. M.

1,2,3, OLIVEIRA, C.

1,2,3,5, SOUZA, A.

1,2,4,

MEDEIROS, L. F. 1,2,3

, SOUZA, A. C. 1,2,3

, SCARABELOT, V. L. 1,2,3

, ADACHI, L. N. 1,2,4

,

MACEDO, I. C. 1,2,3,4

, TORRES, I. L. D. S. 1 Farmacologia - LFDN/animais,

2 Experimentação Animal

- UEA/HCPA, 3 Medicina - PPGCM/UFRGS,

4 Fisiologia - PPGFISIO/UFRGS,

5 Bioquímica -

UNIVATES

Apoio Financeiro: FIPE/HCPA, CAPES, CNPQ

Resumo Objetivos A obesidade é um fator de risco para doenças cardiovasculares e está relacionada com a deposição central de gordura. Exposição ao estresse crônico também é associada a aumento dos depósitos de gordura abdominal e desordens metabólicas o que é explicado em parte, pelo aumento na ingestão de alimentos calóricos resultante da liberação de glicocorticoides nestas situações. Este estudo foi aprovado pelo CEUA/HCPA (GPPG 10382) e teve como objetivo avaliar parâmetros ponderais e o peso do frações do tecido adiposo de ratos Wistar submetidos a um modelo de obesidade e de estresse crônico. Métodos Foram utilizados 100 ratos Wistar machos com 60 dias (250-300g) divididos em 4 grupos: grupo controle (CT), grupo estresse (E), grupo dieta hipercalórica (D) e grupo dieta hipercalórica/estresse (DE). O modelo de estresse crônico utilizado foi restrição 1h/dia/5 dias da semana/80 dias, entre 9h e 12h da manhã. Para avaliação do ganho de peso foram utilizados: peso semanal (12 semanas em g), o comprimento naso-anal dos animais (cm), o Índice de Lee (g/cm) e delta de peso (peso final-peso inicial em g). Após os 80 dias, os animais foram mortos por decapitação, o frações de tecido adiposo (subcutâneo, mesentérico, hepático e pericárdico) foram retiradas e pesadas (g). Os pesos semanais foram analisados por ANOVA de medidas repetidas/Bonferroni; para os demais dados p foi utilizado ANOVA de duas vias/Bonferroni. Dados expressos como média±E.P.M.. e considerados significativamente diferentes P < 0.05. Resultados Os animais que receberam dieta hipercalórica apresentaram índices indicadores de obesidade: delta de peso - CT 115,719±9,62; D 155,71±9,82; E 96,41±77,31; DE 123,69±9,44; índice de Lee - CT 33,86±0,31; D 34,38±0,33; E 33,66±0,32; DE 35,04±0,32; tecido adiposo total - CT 9,36±0,64; D 14,06±0,67; E 6,62±0,64; DE 10,52±0,63 (ANOVA de duas vias, P < 0.05 para todos os parâmetros). Por outro lado, os animais submetidos a estresse crônico apresentaram menor ganho de peso em 12 semanas (ANOVA de medidas repetidas, P < 0,05), menor delta e índice de Lee, e menor peso de tecido adiposo em relação aos animais não estressados (dados citados acima, ANOVA de duas vias, P < 0.05). Associado a isto, os grupos submetidos ao estresse crônico apresentaram um menor comprimento naso-anal: CT 22,12 ±0,24; D 22,99 ±0,24; E 21,53 ±0,24; DE 21,55±0,23 (ANOVA de duas vias P < 0.05). Conclusão Os resultados obtidos com a associação de um protocolo de estresse crônico a um modelo de dieta hipercalórica conhecida como dieta de cafeteria demonstram que, esta última teve supremacia em relação ao estresse nos parâmetros avaliados tornando os animais obesos. É interessante salientar que o índice de Lee e o delta de peso tiveram significante aumento nos animais expostos à dieta hipercalórica isoladamente, no entanto o grupo DE manteve os dados semelhantes ao grupo CT. Os animais expostos a estresse crônico apresentaram um menor crescimento, provavelmente devido à crônica ativação do eixo HPA que causa alterações hormonais inclusive relacionadas com o hormônio do crescimento. Estes resultados nos levam a concluir que, nos parâmetros avaliados, o estresse atua em oposição aos efeitos dieta

FeSBE 2012

hipercalórica.

FeSBE 2012

Resumo: 20.051

PROGRAMAÇÃO FETAL DE DOENÇAS DA VIDA ADULTA: MODULAÇÃO DO METABOLISMO CARDÍACO

Autores

1FREITAS, C. M.

2, BARRETO, M. D. P.

1, SILVA, A. B.

1, NASCIMENTO, L. C. P.

3, FILHO, R. C.

S. 3, FERNARDES, M. P.

3, LAGRANHA, C. J.

1 Núcleo de Nutrição - UFPE,

2 Patologia - UFPE,

3

Núcleo de Educação Física e Ciências do Esporte - UFPE

Apoio Financeiro: CNPq e FACEPE

Resumo Objetivos Avaliar o efeito da desnutrição perinatal na capacidade metabólica das mitocôndrias de coração de ratos através da atividade das enzimas citrato sintase, fosfofrutoquinase e β-hidroxiacil-CoA desidrogenase. Métodos Foram utilizados 16 ratos machos Wistar, provenientes da colônia de criação do Departamento de Nutrição da Universidade Federal de Pernambuco. A manipulação e os cuidados com os animais seguiram as recomendações do COBEA e aprovação do comitê de ética em estudos com animais do Centro de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Pernambuco (n°23076.044262/2010-88). Os animais foram mantidos em sala com temperatura de 23 + 2°C, ciclo claro-escuro. As ratas prenhas passaram a receber dieta a base de caseína, durante a gestação e lactação, para formação de dois grupos experimentais: Controle (caseína 17%) e Desnutrido (caseína 8%). Após o período de lactação, os filhotes passaram a receber dieta padrão do biotério - LABINA. Aos 60 dias de vida, os filhotes (Controle, n=8 e Desnutrido, n=8) foram sacrificados para a análise metabólica do tecido cardíaco. A atividade da Citrato sintetase (E.C.1.1.1.49) foi determinada segundo Alp et al. (Biochem. J., 154: 689-700,1976), a partir da quantificação do complexo formado entre a CoA liberada e o DTNB do meio. Para a determinação da atividade da Fosfofrutoquinase (E.C. 2.7.1.11) foi utilizado o método descrito por Opie e Newsholme (Biochem. J., 103: 391-399, 1966). A atividade da β-hidroxiacil-CoA desidrogenase (E.C 1.1.1.35) foi avaliada pelo método descrito por Heilbronn et al. (Diabetes, 56: 2046-2053, 2007). O

cálculo foi feito através do coeficiente de extinção do NADH (6.22 mol/ml/cm). Os dados foram apresentados como média ± erro padrão da média. O nível de significância foi mantido em 5% para todas as análises. Foi feito o teste para verificação de normalidade e posterior teste de análise de significância estatística, Teste T- de Student. Resultados Em relação à atividade da enzima fosfofrutoquinase (PFK) verificamos que o grupo desnutrido apresentou uma redução significativa em comparação com o grupo controle (C: 0,1374 ± 0,0300 vs D: 0,0290 ± 0,0090 nmol/min/mg proteína; p < 0,01). Também foi observada uma redução significativa na atividade da citrato sintase dos animais desnutridos (C: 396,37 ± 47,33 vs D: 268,85 ± 31,40 nmol/min/mg proteína; p < 0,01). Entretanto, no que se refere à atividade da beta-hidroxiacil-CoA desidrogenase, terceira enzima do processo de beta-oxidação, foi verificado um considerável aumento na atividade dessa enzima nos animais desnutridos (C: 12,037 ± 2,2 vs D: 70,06 ± 14,6 nmol/min/mg proteína; p < 0,001). Conclusão A desnutrição causou uma diminuição na atividade das enzimas metabólicas fosfofrutoquinase (PFK) e citrato sintase. No entanto, o aumento significativo na atividade da β-hidroxyacil-CoA desidrogenase, enzima que atua na β-oxidação de ácidos graxos, indica um aumento do metabolismo lipídico no coração de animais submetidos à desnutrição protéica perinatal.

FeSBE 2012

Resumo: 20.052

Efeito da dislipidemia sobre IL-beta e IL-6 na inflamação – Estudo experimental.

Autores 1PAULA, P. C.

1, SILVA, G. A.

1, LOURENÇO, A. G.

1, NAKAO, C.

1, KOMESU, M. C.

1

morfologia, estomatologia e fisiologia - FORP-USP

Apoio Financeiro: CAPES

Resumo Objetivos A dislipidemia é caracterizada por alteração dos níveis de lipídeos no sangue, que incluem aumento de colesterol total, triglicerídeos, LDL (lipoproteína de baixa densidade), VLDL (lipoproteína de muita baixa densidade) e diminuição de HDL (lipoproteína de alta densidade). A dislipidemia é fator de risco para doenças como diabetes II e aterosclerose. É a manifestação mais importante presente na obesidade. Estudos mostram que existe uma relação entre dislipidemia e resposta inflamatória, entretanto ainda não está claro se o que ocorre é a dislipidemia predispondo a inflamação ou a inflamação provocando a dislipidemia. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a resposta inflamatória, em ratos, frente à indução de inflamação gengival induzida por LPS (lipopolissacarídeo bacteriano), em condição de dislipidemia experimental, avaliando níveis de mediadores da resposta inflamatória sistêmico. Métodos Ratos wistar machos (peso inicial: 40 gramas, total de 40 animais) foram divididos em 4 grupos: animais tratados com ração padrão (CP); animais tratados com ração padrão+aplicação de LPS, divididos em 3 subgrupos de acordo com período de aplicação de LPS, 1, 2 ou 4 semanas(CP-LPS1, CP-LPS2 e CP-LPS4); animais tratados com ração especial (DIS); e animais tratados com ração especial+aplicação de LPS, divididos em 3 subgrupos (DIS-LPS1, DIS-LPS2 e DIS-LPS4). A ração especial foi preparada com 1% (em peso) de aumento de colesterol + 20% de gordura (óleo de soja) para indução de dislipidemia. Após as oito primeiras semanas de livre acesso às respectivas rações, a inflamação foi induzida nos animais com aplicação de LPS (100mg/kg de peso do animal) na região palatina de incisivos e molares, duas vezes/semana por períodos de 1, 2 e 4 semanas. Após o término dos períodos experimentais os animais foram submetidos à eutanásia por meio de sobredose anestésica. Após a morte do animal, amostra de sangue via punção cardíaca foi coletada, para quantificação das lipoproteínas, colesterol total e triglicérides, através de análise bioquímica; e dos níveis de mediadores de resposta inflamatória (IL-6 e IL-1β), através do teste imunoenzimático ELISA. O trabalho foi aprovado pelo comitê de ética no uso de animais n° 10.1.1484.53.4. Os dados obtidos foram analisados pelo teste estatístico:Mann whithey,onde P < 0,05 foi considerado significante. Resultados Os animais tratados com ração especial+LPS apresentaram níveis de IL-6 maiores em relação aqueles tratados com ração padrão+LPS, nos três períodos avaliados (pg/ml) (DIS-LPS1=2443,0 e CP-LPS1=1012,6, p=0,024; DIS-LPS2=5104,6 e CP-LPS2=1774,0, p=0,009; DIS-LPS4=2398,0 e CP-LPS4=1423,5, p < 0,0001). Os níveis de IL-1β não apresentaram diferença significativa entre os grupos (pg/ml) (DIS-LPS1=381,8 e CP-LPS1= 362,4, p=0,796; DIS-LPS2= 709,8 e CP-LPS2= 579,7 p= 0,369; DIS-LPS4= 703,1 e CP-LPS4= 671,0 p= 0,634). Os animais tratados com ração padrão+LPS não apresentaram diferença significativa dos níveis lipídicos em relação ao grupo tratado com ração padrão. Conclusão Na presença de inflamação, os ratos com dislipidemia induzida, apresentaram aumento sérico de IL-6, sugerindo que a dislipidemia pode estar associada a uma alteração da resposta inflamatória.

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Resumo: 20.053

INTERACTION AMONG RENIN-ANGIOTENSIN SYSTEM BLOCKADE, INSULIN SENSITIVITY AND OBESITY IN C57BL/6 MICE FED A HIGH FAT DIET

Autores

1FRANTZ, E. D. C.

1, BARRETO-VIANNA, A. R. C.

1, ALVES-PEREIRA, J. L.

1, CRESPO-

MASCARENHAS, C. 1, LESSA, P. F.

1, MANDARIM-DE-LACERDA, C. A.

1 Laboratório de

Morfometria, Metabolismo e Doenças Cardiovasculares - UERJ

Apoio Financeiro: CNPq, CAPES, Faperj

Resumo Objetivos To evaluate the effects of different RAS blockers on lipid profile, carbohydrates metabolism and systolic blood pressure in C57BL/6 mice fed high fat diet. Métodos Male C57BL/6 mice (3 months of age) were fed on a high fat diet (60% lipids, HF group, n=60) or standard chow diet (10% lipids, SC group, n=15) for 8 weeks. After this period, drug treatment began and 5 groups were formed, with fifteen mice each: SC, HF, HF-A (HF diet treated with aliskiren, 50mg/Kg/day), HF-E (HF diet treated with enalapril, 30mg/Kg/day), and HF-L (HF diet treated with losartan, 10mg/Kg/day). The following treatments lasted 6 weeks and drugs were mixed into the chow. Body mass and blood pressure were evaluated every week, and food intake was measured daily. We evaluated in the groups insulin sensitivity based on the OGTT (oral glucose tolerance test) and IPITT (intraperitoneal insulin tolerance test). We studied oxygen consumption (VO2), carbon dioxide production (VCO2), respiratory quotient (RQ) and energy expenditure (EE) using indirect calorimetry. Ethics committee: CEA21/2011. The differences among the groups were tested by ANOVA, post-hoc Tukey test ( p < 0.05 was statistically significant). Resultados The HF (31.24 g), HF-A (29.11 g) and HF-L (30.80 g) groups had significantly greater body mass and total visceral fat pads than SC (24.14 g) and HF-E (23.48 g). HF group had increased BP (139 mmHg) compared to SC (121 mmHg); all treatments decreased blood pressure with values similar to SC (HF-A 120 mmHg; HF-E 119 mmHg; HF-L 122 mmHg). OGTT and IPITT showed impairment insulin sensitivity and hyperglycemia in HF (171 mg/dL), HF-A (154 mg/dL) and HF-L (153 mg/dL) mice compared to SC (126 mg/dL) and HF-E (133 mg/dL) mice. HF mice exhibited higher VO2 and lower VCO2 than SC mice; respiratory quotient was lesser in HF (0.53) mice, suggesting an increased use of lipid in their energy production, while the SC (0.70) and HF-E (0.68) mice respiratory quotient value indicates burning a mixture of the three available fuels. The HF (136 kcal/day/kg) group had a decreased energy expenditure than SC (177 kcal/day/kg) and treatment groups. The animals HF (80 kcal/week), HF-A (79 kcal/week) and HF-L (85 kcal/week) had increased energy intake compared with the SC (61 kcal/week) and HF-E (65 kcal/week) groups, agreeing with great body mass gain and accumulation of whole adipose tissue in HF(5.6%), HF-A (5.8%) and HF-L (5.6%) groups than SC (2.9%) and HF-E (1.8%) groups. Conclusão Our results indicated that enalapril treatment improved blood pressure and insulin sensitivity, body mass gains and accumulation of adipose tissue in mice fed a high-fat diet; the indirect calorimetry and food intake suggesting that the HF-E mice consumed a mixture of the three available fuels in their energy production. Aliskiren and losartan treatment decreased blood pressure but had minor effects on lipid profile and carbohydrates metabolism, getting closer to the HF group.

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Resumo: 20.054

EFEITOS DA DIETA HIPOPROTÉICA-HIPERGLICÍDICA SOBRE A PROLIFERAÇÃO CELULAR E NA SINALIZAÇÃO DA INSULINA NO TECIDO ADIPOSO BRANCO RETROPERITONEAL (TABR) DE RATOS MACHOS EM CRESCIMENTO.

Autores 1FROELICH, M.

1, Dos Santos, M. P.

1, FRANÇA, S. A.

1, CHAVES, V. E.

1, PEREIRA, M. P.

1,

ANDRADE, C. M. B. 1, KAWASHITA, N. H.

1 Departamento de Química - UFMT

Apoio Financeiro: CAPES, FAPEMAT, CNPq

Resumo Objetivos Ratos em crescimento submetidos à dieta hipoprotéica-hiperglícidica (H- 6% de proteína e 74% de carboidrato) por 15 dias apresentaram aumento no peso e conteúdo de lipídeos no tecido adiposo retroperitonial (TABR) quando comparado a animais submetidos a uma dieta normoprotéica-normoglícidica (N–17% de proteína e 63% de carboidrato). Essas alterações foram acompanhadas por elevação nos níveis de TNF-α e corticosterona séricos e menor nível de insulina pós-prandial, sem alteração na insulinemia de jejum. O aumento da massa adiposa pode ser determinada pelo aumento do tamanho (hipertrofia) e/ou número de adipócitos (hiperplasia). Este fato é de extrema relevância, pois pode determinar a natureza do processo adaptativo, e definir a evolução, ou não, para obesidade na fase adulta. O receptor PPARγ expresso principalmente no tecido adiposo é o principal regulador da proliferação celular. Ativadores e ligantes deste receptor, como a corticosterona, estimulam a conversão de pré-adipócitos, mioblastos e linhagens celulares pluripotentes em fenótipo adiposo. Ao mesmo tempo, trabalhos mostram que a diminuição na fosforilação das proteínas da via de sinalização da insulina, levam a redução na fosforilação de ERK que pode levar a aumento na expressão de PPARγ. O fato da corticosterona e o TNF-α (aumentado nos animais H) estarem relacionados diretamente com prejuízo na sinalização da insulina, nosso objetivo neste trabalho foi avaliar a natureza hipertrófica e/ou hiperplásica do aumento do TABR e verificar se um possível prejuízo na sinalização da insulina, pode estar contribuindo com estas alterações. Métodos Ratos albinos Wistar, machos, pesando 90-100g, foram tratados com dieta normoprotéica-normoglicídica (N–17% de proteína e 63% de carboidrato /AIN 93G) ou Hipoproteica-Hiperglicídica (H- 6% de proteína; 74% de carboidrato). A diferença de energia resultante da redução de proteína na dieta H foi compensada com carboidratos, mantendo-as isocalóricas. Após 15 dias de tratamento, foram determinados o número e o tamanho dos adipócitos. A área dos adipócitos foi medida por planimetria utilizando-se o software UTHSCSA Image Tool 3:0, em aumento de 20x. Com os resultados obtidos os adipócitos foram classificados por tamanho, segundo recomendações Sturges (1926). O conteúdo protéico dos intermediários da sinalização da insulina foi determinado por western blotting. Na análise dos dados foram utilizados o teste t-Student e ANOVA 2 vias (como critério de significância foi adotado p < 0,05). Todos experimentos foram dirigidos de acordo com os princípios éticos na experimentação animal adotados pelo Colégio Brasileiro de Experimentação Animal (COBEA) tendo sido aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal (CEPA) da UFMT sob o número de protocolo 23108.029613/09-3. Resultados Houve um aumento de 26% no número total de adipócitos dos animais H com aumento de 170% na frequência de adipócitos de área pequena ( < 2930 μm 2 ) quando comparado ao grupo N. O conteúdo protéico de IRS1 e AKT reduziu 40% e 14% respectivamente, e a fosforilação basal de AKT reduziu 48% quando comparado aos animais N. Conclusão O aumento do TABR nos animais H ocorre por hiperplasia e a maior parte das células se encontra em estágio inicial de proliferação. O prejuízo na sinalização da insulina no TABR determinado pela dieta pode estar contribuindo para este quadro de hiperplasia pelo aumento na expressão de PPARγ.

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Resumo: 20.055

A restrição de sono por 21 dias induz redução na expressão de proteínas hipotalâmicas envolvidas no controle da saciedade

Autores 1VENANCIO, D. P.

1, LIRA, F. S.

1, SUCHECKI, D.

1 Psicobiologia - UNIFESP,

2 Psicobiologia -

UNIFESP

Apoio Financeiro: Fapesp e AFIP

Resumo Objetivos Avaliar a imunorreatividade de proteínas envolvidas com o mecanismo de fome e saciedade, como o receptor de insulina (IR), o receptor de leptina (ObR1), a AMPK-alfa 1 e o receptor de adiponectina 1, respectivamente, no hipotálamo de animais submetidos à restrição crônica de sono. Visto que animais submetidos à privação de sono apresentam hiperfagia. Métodos O estudo foi aprovado pelo comitê de ética em pesquisa, sob o nº 0334/11. Vinte quatro animais foram distribuídos em dois grupos, controle (CTL) e restrição de sono por 21 dias (RS21). Neste modelo, os animais ficam privados de sono paradoxal, pelo método da plataforma imersa em água, durante 18 h (das 16:00 h às 10:00 h) e podem dormir em suas gaiolas por 6 h por dia. No grupo controle, os animais permanecem no mesmo ambiente, contendo maravalha, e portanto, podem dormir à vontade. Os animais foram pesados diariamente até a manhã da eutanásia. Após a eutanásia, os hipotálamos foram coletados e utilizados para a extração de proteínas. A análise das mesmas foi realizada por western blot, usando-se anticorpos dirigidos contra as proteínas em questão e foram avaliadas por densitometria óptica. Resultados Os animais do grupo RS21 apresentaram redução na massa corporal em relação ao grupo controle (383,97 ± 5,37 g vs 421,03 ± 10,42 g, p < 0,0001), diminuição da imunorreatividade do receptor de adiponectina do tipo 1 (1,97 ± 0,62 vs 2,67 ± 0,62 p < 0,05) e do receptor de leptina do tipo 1 (0,38 ± 0,09 vs 1,318 ± 0,43 p < 0,05). Porém, não houve redução na imunorreatividade do receptor de insulina (2,17 ± 0,72 vs 3,8 ± 0,16, p=0,1) e da AMPK (3,2 ± 0,5 vs 4,03 ± 0,64, p > 0,05). Conclusão A restrição de sono por 21 dias reduziu a imunorreatividade do receptor de adiponectina e de leptina, sugerindo que esta redução altera o controle da saciedade ao nível hipotalâmico. Parece que o receptor de insulina e a AMPK1-alfa não estão relacionados às alterações metabólicas observadas na restrição de sono.

FeSBE 2012

Resumo: 20.056

AVALIAÇÃO DO EFEITO DE TAURINA SOBRE LOCOMOÇÃO E COMPORTAMENTO ALIMENTAR EM RATAS

Autores

1MELO*, T. L. B. D.

1, SOUZA**, M. F. D.

1, BISOGNIN**, K. M.

1, PEREIRA**, N. D. S. C.

1,

FREESE**, L. 1, COSTA**, P. A.

1, NIN**, M. S.

1,2, GOMEZ, R.

1, BARROS, H. M. T.

1,

CALETTI**, G. 1 Ciências Biológicas - Farmacologia - UFCSPA,

2 Instituto de Ciências Básicas da

Saúde - Farmacologia - UFRGS

Apoio Financeiro: CNPq, CAPES, UFCSPA

Resumo Objetivos A obesidade é uma doença crônica de alta prevalência, principalmente em indivíduos do sexo feminino. Vários fármacos são utilizados como alternativa para a perda de peso, dentre eles derivados anfetamínicos, que apresentam muitos efeitos adversos. A taurina (TAU) é um aminoácido semi-essencial que vem sendo testada por suas possíveis propriedades anti-obesidade. O objetivo deste estudo foi avaliar o comportamento alimentar e motor de ratas tratadas com diferentes doses de TAU. Métodos Número da aprovação do CEUA/UFCSPA: 09/558. Neste estudo foram utilizadas 30 ratas Wistar (n=6/grupo) adultas (200g -250g), tratadas por 7 dias com solução salina (SAL), anfepramona (ANF) 15mg/kg (controle positivo) e TAU 25mg/kg (TAU25), 50mg/kg (TAU50) e 100mg/kg (TAU100) por via intraperitoneal. Anterior ao experimento, os animais foram habituados ao alimento palatável (cereal doce). No dia do teste, após 18 horas de jejum, os animais foram administrados com as soluções e colocados em gaiolas metabólicas para observação do consumo de cereal e/ou ração. Trinta e 60 minutos após a administração, a atividade locomotora foi testada no campo aberto. A análise estatística foi realizada utilizando ANOVA, seguida do teste de Bonferroni. Consideramos diferença estatisticamente significativa se P < 0,05. Resultados A taurina apresentou uma tendência em diminuir o consumo total de alimentos de acordo com o aumento da dose (valores em gramas SAL: 3,7 ± 1,8; ANF: 0,6 ± 0,49; TAU25: 3,3 ± 1,4; TAU50: 2,8 ± 1,2; TAU100: 2,4 ± 1,4 g). Nos primeiros 30 minutos, os animais tratados com TAU25 e TAU50 consomem mais ração do que animais tratados com TAU100 (SAL: 0,58 ± 0,72; ANF: 0,082 ± 0,19; TAU25: 0,92&plusmn0,43; TAU50: 0,87&plusmn0,41; TAU100: 0,62&plusmn0,29 g, P=0,017). No consumo de cereal, taurina apresenta uma tendência em diminuir o consumo desse alimento, apesar de não ter diferença estatística entre grupos (SAL: 2,131 ± 1,382; ANF:0,51 ± 1,26; TAU25: 1,5 ± 1,2; TAU50: 1,2 ± 0,8; TAU100: 0,9 ± 1,0; P=0,066). TAU nas diferentes doses ou ANF não afetaram o consumo de ração ou cereal. Também, não houve diferença na locomoção entre os animais tratados e não tratados. Conclusão Nas nossas condições experimentais a taurina apresenta apenas uma tendência em diminuir o consumo alimentar dos animais de acordo com a dose administrada, sem alterar o comportamento locomotor. Essa redução parece ser mais acentuada quando se oferece a eles alimento palatável. Não descartamos que doses maiores de taurina afetem o comportamento alimentar, podendo ser utilizada como um adjuvante no tratamento da obesidade, pois possui poucos efeitos adversos.

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Resumo: 20.057

INFLUÊNCIA DA DIETA DE CAFETERIA DURANTE A GESTAÇÃO E LACTAÇÃO SOBRE PARÂMETROS NUTRICIONAIS DA MÃE E DE SUA PROLE.

Autores 1OLIVEIRA, D. S.

1, LIMA, L. R.

1, MARTINS, K. G. L. S.

1, PEREIRA, J. P.

1, BARBOSA, L. V.

1,

BELLOT, R. G. 1, FREITAS, T. A.

1, CONCEIÇÃO, I. M.

1 Faculdade da Saúde - UMESP

Apoio Financeiro: CNPq-PIBIC; Centro de Neurociências – Fac. Saúde - UMESP

Resumo Objetivos Durante a gestação e a lactação a alimentação possui papel crucial. O aporte de alimentos deve ser elevado no sentido de garantir a manutenção dos dois processos, porém não deve ser exagerado, pois, poderia prejudicar tanto mãe como bebê. Nesse sentido, animais nascidos de mães submetidas a uma dieta de cafeteria, durante a gestação tende a desenvolver hiperfagia e apresentar maior massa corporal do que aqueles nascidos de mães que se alimentaram com ração padrão. Nosso trabalho tem como objetivo analisar o impacto de uma dieta de cafeteria (DC), sobre o desenvolvimento físico dos filhotes. Métodos O uso dos animais foi aprovado pelo CEUA – Metodista sob protocolo n: 057/2011. Para isto 12 ratas Wistar prenhes foram divididas em dois grupos: controle (GC) e experimental (GE). O GE recebeu durante a gestação e lactação dieta de cafeteria composta por ração padrão(37,5%), bolacha maisena (12,5%), amendoim torrado (25%) e chocolate ao leite (25%), GC recebeu ração padrão. Para ambos os grupos as dietas foram fornecidas “ad libitum”. Durante todo o período da gestação (21 dias) e lactação (21 dias) o consumo de líquido, ração e a massa corporal das ratas e filhotes foram verificados diariamente. O teste t de Student foi utilizado para verificar possíveis diferenças entre os grupos. A probabilidade de p < 0,05 foi considerada como sendo capaz de revelar diferenças estatisticamente significantes entre os grupos. Resultados Observamos que a DC levou a um aumento de massa corporal (gramas) das mães estatisticamente maior para GE (66,8±1,5) do que para o GC (42,8±9,0). Apesar do aumento da massa corporal, não houve diferenças significativas entre os grupos para a circunferência abdominal. Em relação aos filhotes observamos durante a lactação (21 dias) que as fêmeas do grupo GE apresentaram redução na massa (gramas) nos dias 15 (29,6±0,6) e 16 (30,8±2,02) em comparação ao GC dias 15 (26,3±2,02) e 16 (27,2 ±2,1). Os filhotes machos do GE apresentaram redução na massa (gramas) apenas no dia 3 (9,7 ±0,2) e GC (9,9±0,3). Estes dias observados correspondem a idade dos filhotes. Nos demais tempos para ambos os grupos não houve diferença estatisticamente significante. Conclusão Esses dados demonstraram que o consumo da dieta de cafeteria durante o período de gestação e lactação é capaz de promover alterações nas ratas e como consequência influenciar de forma negativa o desenvolvimento dos filhotes, principalmente das fêmeas. Estes dados reforçam o cuidado que deve ser dispensado em relação à alimentação durante o período de gestação e lactação.

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Resumo: 20.058

OS EFEITOS DAS MUDANÇAS DO ESTILO DE VIDA NA GLUTATIONEMIA DE ADULTOS ESTÃO ASSOCIADOS A QUALIDADE DA DIETA COM A MAIOR INGESTÃO DE FRUTAS

Autores

1,2MORETO, F.

2, TOREZAN, G. A.

2, KANO, H. T.

1,2, MANDA, R. M.

2, PESAVENTO, T. F. C.

2,

BURINI, R. C. 1 Patologia - FMB-UNESP,

2 Centro de Metabolismo em Exercício e Nutrição - FMB-

UNESP

Apoio Financeiro:

Resumo Objetivos A mudança do estilo de vida (MEV) é considerada conduta terapêutica inicial no tratamento das várias doenças crônicas da modernidade. Dentre as co-morbidades presentes há o estado pró-oxidante para o qual contribuem as deficiências de nutrientes antioxidantes na dieta moderna. A capacidade antioxidante intracelular pode ser ilustrada pela concentração plasmática de glutationa (GSH). O objetivo do estudo foi verificar a variação da GSH plasmática frente a um programa de MEV e os principais fatores associados. Métodos Foram estudados 42 indivíduos (37 mulheres) acima de 40 anos de idade, participantes em demanda espontânea do programa para mudança do estilo de vida “Mexa-se Pró-Saúde” em Botucatu, Estado de São Paulo. Todos eles concluíram o programa (MEV) com 5 meses de intervenção e tiveram todos os dados das avaliações (basal e final). O protocolo de intervenção consistiu de 5 sessões semanais de exercícios físicos supervisionados, sendo 3 com atividades aeróbias (alongamento e caminhada) e 2 com atividades de força (exercícios com pesos), de maneira alternada e com duração de 50 a 60 minutos por sessão. Adicionalmente, ocorreram aconselhamentos nutricionais semanais. As avaliações basais e finais foram antropométrica, dietética, clínica (com teste máximo em esteira), aptidão física e bioquímica, com análise plasmática de GSH total (por HPLC). Os valores de GSH foram utilizados na discriminação comportamental de dois grupos: indivíduos com redução, manutenção ou ligeiro aumento de GSH (G1) e indivíduos com aumento maior ou igual a 50% do valor basal (G2). O método estatístico utilizado para avaliar o efeito do protocolo foi o teste t pareado de Student ou Mann-Whitney. O estudo foi apreciado e aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa com seres humanos da Faculdade de Medicina de Botucatu sob o ofício 262/2010-CEP. Resultados A adesão ao programa de MEV resultou, em ambos os grupos, na redução significativa de circunferência abdominal (97,3 ± 15,0 x 94,6 ± 14,0 cm) e percentual de gordura corporal (39,9 % [30,0 – 45,1] x 34,8 % [29,9 – 44,2]) e aumentos no percentual de massa muscular (26,6 ± 3,5 x 27,7 ± 4,4 %), HDL colesterol (46,5 ± 11,4 x 48,7 ± 12,3 mg/dL), GSH (5,2 ± 1,6 x 6,4 ± 2,3 µmol/L) e capacidade cardiorrespiratória (29,9 ± 5,3 x 33,0 ± 5,4 mL/kg/min). Entretanto, apenas o G2 apresentou melhora da qualidade da dieta (IAS de 78,3 ± 11,4 x 84,4 ± 7,5 pontos) e aumento na ingestão de frutas (1,3 [0,12 – 1,84] x 2,2 [1,3 – 2,7] porções). Conclusão Os dados da presente amostragem apontam o aumento da capacidade antioxidante decorrente da melhora da qualidade da dieta e ingestão de frutas como valor agregado às melhoras de composição corporal, de aptidão física e bioquímicas observadas com o MEV.

FeSBE 2012

Resumo: 20.059

EFEITOS DE DUAS DIETAS CONSIDERADAS CONTROLES COMPARADAS COM UMA HIPERLIPÍDICA/HIPERCALÓRICA EM RATOS

Autores 1MOURA, L. P.

1, SPONTON, A. C. S.

1, ARAÚJO, M. B.

1, DALIA, R. A.

2, PAULI, J. R.

1,

MELLO, M. A. R. 1 Educação Física - UNESP,

2 Faculdade de Ciências Aplicadas - UNICAMP

Apoio Financeiro: FAPESP, CNPq, CAPES e FUNDUNESP

Resumo Objetivos Introdução: O elevado consumo de calorias e/ou de lipídeos contribui para o desenvolvimento de obesidade e depósito de gordura no fígado. O acúmulo de gordura hepático gera efeitos deletérios no órgão, podendo levar à falência. Com o intuito de alimentar animais controles, vários estudos utilizam diferentes dietas tidas como balanceadas. As principais dietas utilizadas para manutenção desses animais é a desenvolvida pelo Instituto Americano de Nutrição em 1993 (AIN-93) ou a ração comercial para roedores Purina®. Devido a diferenças calóricas entre essas duas dietas, resultados podem ser sub ou supra estimados nas diversas áreas de pesquisas onde as variáveis calorias e nutrientes vem sendo estudas. Objetivo: Visto isso, o presente estudo objetivou analisar os efeitos fisiológicos da administração de duas dietas não isocalóricas, mas consideradas controle, em relação a uma dieta hiperlipídica/hipercalórica em ratos Wistar adultos. Métodos Métodos: (Aprovados pelo comitê de ética em pesquisas com animais: 2010/4573, CEUA, IB, UNESP / Rio Claro). Trinta ratos Wistar adultos foram divididos em três grupos durante oito semanas, Purina (P): ratos alimentados com ração comercial para roedores (3.028Kcal/Kg); AIN-93M (AIN): ratos alimentados com ração estipulada como controle pelo Instituto Americano de Nutrição (AIN-93M: 3.803 Kcal/Kg) e Hiperlipídica/hipercalórica (Hiper): ratos alimentados com dieta rica em gordura (5.350Kcal/Kg). A ingestão alimentar foi registrada semanalmente e ao final do experimento o índice de Lee (razão da raiz cúbica do peso corporal (em gramas) sobre o comprimento naso-anal (em centímetros) multiplicado por 1000), concentrações séricas de insulina e acúmulo de gordura no fígado foram analisados. Resultados Resultados: A ingestão alimentar foi menor no grupo Hiper em relação ao P (gx8 semanas): P: 31129 ± 1838,83; AIN: 33467 ± 3736,97; Hiper: 34858 ± 3171,44. Ao final do experimento, o peso corporal (g): (P: 501,0 ± 41,0; AIN: 532,28 ± 66,93; Hiper: 572,71 ± 23,92), índice de Lee: (P: 300,36 ± 6,14; AIN: 307,84 ± 8,21; Hiper: 310,01 ± 4,15), insulinemia (ng/ml): (P: 1,31 ± 0,29; AIN: 1,88 ± 0,93; Hiper: 2,24 ± 0,62) e triglicerídeos hepáticos (mg/g): (P: 11,89 ± 1,10; AIN: 14,93 ± 3,62; Hiper: 17,56 ± 4,44) apresentaram-se elevados para o grupo Hiper em relação ao grupo P. Considerando os resultados obtidos, a diferença calórica entre as duas dietas controles não promoveu diferenças fisiológicas significativas, mas o principal achado deste estudo foi de a dieta AIN-93M não se diferenciar da hiperlipídica/hipercalórica no desenvolvimento da obesidade e suas consequências como hiperinsulinemia, e acúmulo de gordura no fígado. Conclusão Conclusão: Devido ao fato de uma das dietas controles não apresentar diferenças em relação a uma dieta hiperlipídica/hipercalórica, deve ser dada maior atenção na utilização de dietas controles em experimentações com animais.

FeSBE 2012

Resumo: 20.060

TREINAMENTO FÍSICO ATENUA EFEITO DA DESNUTRIÇÃO MATERNA NO PERÍODO PERINATAL SOBRE A COMPOSIÇÃO DE TIPO DE FIBRAS MUSCULARES DA PROLE

Autores

1SILVA, R. B. P.

1, FALCÃO-TEBAS, F.

1, MULULO, P. R. R.

1, ANTÔNIO-SANTOS, J.

1,

BENTO-SANTOS, A. 1, LIMA, C. O. R.

1, LEANDRO, C. G.

1 Nutrição - UFPE,

2 Nutrição - UFPE,

3

Nutrição - UFPE, 4 Nutrição - UFPE,

5 Nutrição - UFPE,

6 Nutrição - UFPE,

7 Nutrição - UFPE

Apoio Financeiro: CAPES

Resumo Objetivos Analisar se o treinamento físico durante a gestação atenua os efeitos provocados pela desnutrição perinatal sobre a proporção de fibras musculares esqueléticas de ratos adultos. Métodos Ratas Wistar (n=12) foram divididas em 2 grupos (controle, C; n=6 e treinada, T; n=6). O treinamento de treinamento físico moderado em esteira foi iniciado 4 semanas antes da gestação (5 dias/semana e 60min/dia, a 65% VO2max). Na gestação, a duração e a intensidade do treinamento foram reduzidas (5 dias/semana e 20min/dia, a 40% VO2max) até o 19 dia pré-natal. Durante a gestação e lactação os grupos C e T receberam dieta normoprotéica (caseína a 17%) e os grupo desnutrido (D, n=3) e treinado e desnutrido receberam dieta hipoprotéica (caseína a 8%). Após o desmame, os filhotes foram divididos de acordo com a manipulação materna, (C=7, T=7, D=7 e TD=7) e receberam dieta padrão do biotério. Aos 270 dias de idade, os filhotes foram avaliados quanto: ao peso e ganho de peso corporal, além do peso comprimento e largura dos músculos soleus e extensor longo dos dedos (EDL). A proporção de fibras em cada músculo foi avaliada pela técnica da atividade ATPase da miosina. Este estudo foi aprovado pelo comitê de ética em estudos com animais do Centro de Ciências Biológicas da UFPE (protocolo n 23076.049077/2010-80). Na comparação entre as médias foi usado o ANOVA (one-way ou two-way) seguido de Tukey ou de Bonferroni como testes a posteriori a depender da análise. Resultados O efeito da desnutrição perinatal foi observado tanto no peso corporal ao longo da vida e no ganho de peso corporal aos 90 dias. Este efeito foi atenuado nos animais do grupo TD ( p < 0,05). O grupo D apresentou diminuição no percentual de fibras tipo I e um aumento na proporção de fibras tipo Iib no soleus, embora não tenha ocorrido alterações na proporção de fibras do músculo EDL. Nos animais do grupo TD, os efeitos da desnutrição materna foram normalizados ( p < 0,05). Conclusão Nossos resultados confirmam associação entre desnutrição perinatal e as alterações no fenótipo do músculo esquelético na prole adulta, enquanto o treinamento físico durante a gestação atenua esses efeitos.

FeSBE 2012

Resumo: 20.061

Desnutrição associada a L-TRIPTOFANO altera o peso corporal e o comprimento da cauda de ratos neonatos .

Autores

1DIAS, L. L.

1, SILVA, T. D. D.

1, MEIRA, G. L. D. S.

1, COSTA, J. S.

1, SAMPAIO, M. D. Q.

1,

MEDEIROS, J. M. B. 1, SANTOS, A. Q.

1, RÊGO, L. C.

1, COSTA, F.

1, DEIRÓ, T. C. B. D. J.

1

Ciências da Nutrição - ENUFBA

Apoio Financeiro: CAPES, FAPESB, CNPQ, PIBIC, UFBA.

Resumo Objetivos A serotonina participa do desenvolvimento do organismo. (Ciência Hoje, 34:30, 2004). A desnutrição protéica tem sido extensamente relacionada aos déficits de ganho ponderal e de estatura, com implicações gerais sobre desenvolvimento de órgãos e sistemas em humanos e em ratos (Neurobiologia, 72:2, 2009). A manipulação do sistema serotoninérgico com inibidores seletivos de recaptacao de serotonina (ISRS) no período critico de desenvolvimento do encéfalo que corresponde ao período de lactação de ratos levou a uma redução na evolução ponderal e no crescimento somático (Physiol Behav. 28:338, 2006). Este estudo tem como objetivo avaliar os efeitos da manipulação do sistema serotoninérgico através da administração do precursor da serotonina o aminoácido L-triptofano no período critico de desenvolvimento sobre parâmetros somáticos de ratos normais e desnutridos. Métodos Ratos Wistar machos neonatos, foram delineados quanto ao percentual proteico da dieta materna durante a lactação, sendo 17% de acordo com a AIN 93G ou 8% e quanto a administração de água destilada ou L-triptofano 15mg/kg/dia s.c. do 7º ao 21ºdia pós-natal obtendo-se assim os seguintes grupos: normoproteico- água destilada (NP- AD; n=18), normoproteico-triptofano (NP- TRIP; n=19), hipoproteico- água destilada (HP-AD; n=23) e hipoproteico-triptofano (HP- TRIP; n=22). Sendo avaliados do 1° ao 21° dia de vida quanto ao peso corporal (PC) e comprimento da cauda (CC). Utilizou-se paquímetro Starret Caliper (0,01cm de acurácia) e balança semi-analítica digital Marte, (modelo AS 2000C - capacidade 2000g c/0,01g de acurácia). Os dados foram analisados utilizando-se ANOVA - Two Way Repeated Measures seguido do teste de Bartlett. Comitê de ética: 20.10 da Faculdade de Odontologia da UFBA. Resultados Comparados o grupo NP- AD ao grupo NP- TRIP, não houve diferença para o CC nem para o PC. Comparado ao grupo NP- AD, o grupo HP-AD apresentou redução no CC, F(3,82)=38,2412 do 140 ao 210 dia, e no PC do 130 ao 210 F(3,80)=46,6306. O grupo HP- TRIP comparado ao grupo NP- AD apresentou redução do CC, F(3,82)=38,2412 do 70 ao 210 dia; e do PC do 90 ao 210F(3,80)=46,6306. HP- TRIP em comparação com NP- TRIP apresentou redução do CC, F(3,82)=38,2412, do 70 ao 210 dia e do PC do 90 ao 210F(3,80)=46,6306. HP- TRIP comparado com HP-AD não mostrou diferença nestes parâmetros. Comparando NP- TRIP e HP-AD o último apresentou redução do CC, F(3,82)=38,2412, do 140 ao 210 dia e, do PC do 130 ao 210 F(3,80)=46,6306. Conclusão A administração isolada de triptofano não ocasionou mudanças nos parâmetros de crescimento avaliados nos grupos com diferente oferta proteica. Já a dieta hipoproteica materna fez reduzir o peso corporal e a velocidade de crescimento da cauda dos filhotes. No grupo em que a desnutrição foi associada ao triptofano houve também redução do peso e da velocidade de crescimento da cauda e essas alterações aconteceram ainda mais precocemente. Tais resultados mostram que a modulação do sistema serotoninérgico pela administração do L-triptofano altera parâmetros somáticos quando associada a restrição proteica, sugerindo o papel da serotonina nos mecanismos somáticos e os possíveis efeitos negativos de sua manipulação no período critico de desenvolvimento, a exemplo do uso indiscriminado de inibidores de recaptação de serotonina e triptofano por gestantes como inibidores de apetite e antidepressivos. Os ISRS, sertralina e o

FeSBE 2012

citalopram, têm sido considerados de baixo risco para o feto e usados com frequência na gestação (Rev. psiquiatr. clín. 33:2, 2006). Dados da literatura ainda são escassos, assim estudos se fazem necessários para melhor elucidar os presentes achados.

FeSBE 2012

Resumo: 20.062

DESENVOLVIMENTO DE DIETA BALANCEADA PARA SAGUI DE TUFO BRANCO (Callithrix jacchus) EM BIOTÉRIO EXPERIMENTAL

Autores

1PETRONILDO, V. A.

2, CAVALCANTE, A. S.

1,2, SANTANA, M. B.

1, MORYA, E.

1,2, BRYS, I.

1,

KUNICKI, A. C. B. 3, NICOLELIS, M.

2, PEREIRA, A. C.

1, FUENTES, R.

1,3, NICOLELIS, M.

1

Neurociências - IINNELS, 2 Neurociências - UFRN,

3 Neurobiology - Duke

Apoio Financeiro: AASDAP, FINEP, INCEMAQ, MJFF, MCT, CNPq, FAPERN.

Resumo Objetivos O sagui comum é um primata do novo mundo que atualmente vem contribuindo com avanços em pesquisas em neurociência. Entretanto, a nutrição, avaliação e digestibilidade dos alimentos para Calitriquídeos silvestres em cativeiro no Brasil são escassas. O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma dieta para Callithrix jacchus mantida em cativeiro no Instituto Internacional de Neurociências de Natal - Edmond e Lily Safra. Métodos O criadouro científico de primatas do IINNELS tem a autorização #2462749 do IBAMA e foi construído em Macaíba-RN, local com temperatura média anual de 27.1oC. Essa dieta foi elaborada baseada em modelos nacionais para primatas e adaptada de acordo com a observação diária da aceitação e do desenvolvimento dos animais no projeto aprovado pelo comitê de ética local (01/2009). As refeições foram oferecidas em três horários: (1) 8h dieta predominantemente proteica, com ração, goma arábica, larva de tenébrio, um tipo de lacticínio, carne, fígado ou ovo; tubérculos, grãos e um tipo de fruta; (2) 11h30min uma pequena quantidade de vitamina, suco ou leite fermentado, que também servem como veículo para administração de suplementos vitamínicos e medicamentos quando necessário, foi servida por meio de uma seringa individualmente aos animais; (3) 15 h frutas variadas, alimentos integrais e fibras, além de legumes, verduras ou hortaliças. Nos fins de semana foram disponibilizadas adicionalmente, penduradas nas gaiolas, frutas inteiras e com casca como mais uma forma de enriquecimento, além de cestinhas contendo castanha de caju, amendoim, semente de girassol, ameixa seca e coco seco. Água disponível a vontade e trocada diariamente. Em média 2 animais habitam uma gaiola de 1 m de largura x 1 m de profundidade x 1.1 m de altura, totalizando 22 gaiolas. Os animais são observados diariamente pela Veterinária responsável. O peso dos animais foi acompanhado por 2 anos. Um teto móvel possibilita controlar a entrada de luz solar e evitar a exposição às intempéries. Resultados A dieta desenvolvida apresentou uma boa aceitação dos diversos tipos de alimentos oferecidos, salvo algumas preferências individuais. As pequenas sobras de alimento observadas demonstram que a quantidade oferecida por animal tem sido suficiente quanto sua saciedade. O peso dos animais adultos avaliados foi em média 340g (dp 150), faixa considerada adequada dependendo da fase da vida dos animais observados. A pelagem mostrou-se uniforme, com características de textura, cor e brilho satisfatórias para a espécie. Os parâmetros fisiológicos mostraram-se dentro dos padrões de normalidade, assim como alta taxa de reprodução (em média 02 filhotes a cada gestação e duas gestações por ano). Estes fatores foram importantes para avaliar o baixo nível de estresse ambiental no cativeiro, e o bom estado nutricional dos animais. As avaliações foram feitas pela Veterinária, responsável técnica, com o auxilio do bioterista do Centro de Pesquisas. Conclusão A dieta desenvolvida mostrou-se eficaz para manutenção da saúde e do bem estar de saguis comum mantidos no criadouro científico do IINN-ELS na região Nordeste do Brasil.

FeSBE 2012

Resumo: 20.063

EFEITOS DO L-TRIPTOFANO SOBRE O CRESCIMENTO SOMÁTICO DE RATOS EXPOSTOS OU NÃO À RESTRIÇÃO PROTÉICA PÓS-NATAL.

Autores

1SILVA*, T. D. D.

1, DIAS*, L. L.

1, MEIRA**, G. L. D. S.

1, COSTA, J. S.

1, NÓBREGA, J. C. D.

1,

CERQUEIRA, C. A. 1, DEIRÓ, T. C. B. D. J.

1, RIBEIRO, R. S. S.

1, COSTA, F.

1, SACRAMENTO,

M. M. 1, BOAS, L. P. V.

1 Ciências da Nutrição - ENUFBA

Apoio Financeiro: CAPES, FAPESB, CNPQ, PIBIC, UFBA.

Resumo Objetivos O estado nutricional estabelece efeitos importantes na vida, desde o momento de sua concepção até a morte. Desequilíbrios nutricionais, ou manipulações farmacológicas dos sistemas neurotransmissores, sucedem uma série de alterações bioquímicas e orgânicas, que alteram o crescimento e desenvolvimento somático. O triptofano é um aminoácido essencial, precursor da serotonina (5-HT). A 5-HT pode promover alterações no crescimento de tecidos que influenciam a estrutura do corpo dos animais. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da administração de L-Triptofano (TRIP) em ratos submetidos ou não à restrição proteica na lactação sobre parâmetros do crescimento somático. Métodos Ratos Wistar machos neonatos, foram divididos em grupos de acordo com a dieta materna em: nutrido = N (dieta com 17% de proteína – Norma internacional AIN 93G) ou desnutrido = D – (manipulada com 8% de proteína) e administrado salina (SAL) ou triptofano 15mg/kg/dia, s.c.(TRIP15), do 7º ao 21º, de acordo com o peso corporal - obtendo-se assim os seguintes grupos: nutrido solução salina (N SAL; n=18), nutrido triptofano (N TRIP15; n=19), desnutrido salina (D SAL; n=23) e desnutrido triptofano (D TRIP15; n=22). Sendo avaliados do 1° ao 21° dia de vida : peso corporal (PC), eixo longitudinal (EL), eixo ântero-posterior do crânio (EAPC) e eixo latero-lateral do crânio (ELLC). Utilizou-se paquímetro Starret Caliper (0,01cm de acurácia) e balança semi-analítica digital Marte, (modelo AS 2000C - capacidade 2000g c/0,01g de acurácia). Os dados foram analisados utilizando-se ANOVA - Two Way Repeated Measures seguido do teste de Bartlett. Comitê de ética: 20.10 da Faculdade de Odontologia da UFBA. Resultados Ao comparar o grupo N-TRIP15 com o N-SAL, não houve diferença para os demais parâmetros. Comparado ao grupo N-SAL, o grupo D-SAL apresentou diminuição no EL F(3,82) = 47,4540 do 140 ao 210 dia, no EAPC do 170 ao 210F(3,82)=27,6565, p < 0,05. O grupo D-TRIP15 em comparação ao grupo N-SAL apresentou redução no EL do 60 ao 210 F(3,82)=47,4540, e no EAPC do 120 ao 210 F(3,82)=27,6565, p < 0,05. D-TRIP15 em comparação com N-TRIP15 teve redução no EL do 60 ao 210F(3,82) = 47,4540, no EAPC do 170 ao 210F(3,82)=27,6565, p < 0,05. D-TRIP15 comparado com D-SAL apresentou redução no EL, F(3,82) = 47,4540 do 80 ao 210 dia e no EAPC do 120 ao 210F(3,82)=27,6565, p < 0,05. Não houve diferença para os demais parâmetros. Comparando N-TRIP15 e D-SAL o último apresentou diminuição no EL do 120 ao 210 F(3,82)=47,4540,no e EAPC do 150 ao 210F(3,82)=27,6565, p < 0,05. Em todas as comparações entre os grupos, não houve diferença para o ELLC. Conclusão A administração isolada de TRIP-15 não resultou diferenças significantes em relação aos parâmetros PC e ELLC. Contudo, a restrição protéica interferiu em todos os grupos diminuindo o ganho de peso, e a velocidade de crescimento do corpo, resultando em diferenças significantes entre os mesmos. No entanto, no grupo em que a restrição proteica foi associada ao TRIP esses déficits no crescimento somático apareceram mais precocemente sugerindo o efeito modulador da 5-HT em diferentes condições de nutrição.

FeSBE 2012

Resumo: 20.064

Maturação de CARACTERÍSTICAS FÍSICAS E REFLEXOS DE RATOS neonatos EXPOSTOS À RESTRIÇÃO PROTÉICA podem ser alterados por L-TRIPTOFANO

Autores

1COSTA, J. S.

1, SILVA*, T. D. D.

1, MEIRA**, G. L. D. S.

1, DIAS*, L. L.

1, SACRAMENTO, M.

M. 1, SANTOS, A. Q.

1, DEIRO, T. C. B. D. J.

1, GOMES, Q. F.

1, BARRETO, J. M. .

1, SILVA, W. T.

F. E. 1, DEIRO, T. C. B. D. J.

1 CIENCIAS DA NUTRIÇÃO - ENUFBA,

2 CIENCIAS DA

NUTRIÇÃO - CABUFPE

Apoio Financeiro: CAPES, FAPESB, CNPQ, PIBIC, UFBA

Resumo Objetivos O estado nutricional estabelece efeitos fisiológicos importantes durante toda a vida, desde o nascimento até o final da vida. Agressões nutricionais, ou manipulações farmacológicas dos sistemas neurotransmissores, podem provocar uma série de alterações bioquímicas e orgânicas, que alteram o crescimento e desenvolvimento somático. O L- triptofano é um aminoácido essencial, precursor da serotonina (5-HT), uma amina biogênica que pode promover mudanças no crescimento de tecidos em mamiferos. Avaliar os efeitos do tratamento com L- triptofano sobre a maturação de características físicas e de reflexos de ratos submetidos ou não à restrição protéica. Métodos Ratos Wistar machos neonatos, foram distribuídos em grupos de acordo com a dieta materna (N -17% de proteína ou D -8%) e o tipo de tratamento s.c recebido (solução salina ou triptofano 15mg/kg/dia – TRIP15): N SAL, n=18, N TRIP15, n=20; D SAL, n=23 e D TRIP15, n=22. Foram observados em relação às características físicas: abertura do pavilhão auditivo (APA), do conduto auditivo (ACA), do olho (AO), erupção dos incisivos superiores (IIS) e inferiores (III); e os reflexos: preensão palmar (PP); recuperação do decúbito (RD); colocação pelas vibrissas (CV); aversão ao precipício (AP); geotaxia negativa (GN); resposta ao susto (RS) e aceleração (AC). Para análise estatistica utilizou-se o teste Kruskal-Wallis, seguido de Dunn's. Os dados foram apresentados como mediana e valores mínimo e máximo. P < 0,05 para diferenças significantes. Comitê de ética: 20.10 -Faculdade de Odontologia-UFBA Resultados Comparando o grupo N SAL: APA 3(2-4); ACA 12(8-14); III 10(9-13); IIS 10(8-11); AO 14(12-15), ao grupo N TRIP15: APA 3(2-3); ACA 12(9-14); III 11(8-13); IIS 10,5(9-12); AO 13(11-15), não foram observadas diferenças. Comparado ao grupo N SAL o grupo D SAL: APA 3(2-6); ACA 12(11-15); III 10(8-11); IIS 10(8-11); AO 15(14-17) atrasou AO. O grupo D TRIP: APA 4(3-6); ACA 13(11-17); III 10(9-11); IIS 10(8-11); AO 15(14-17) em comparação ao grupo N SAL, apresentou atraso em APA e AO. Comparados D TRIP com N TRIP atrasou APA e AO. D TRIP comparado com D SAL atrasou APA. Comparando N TRIP e D SAL o último apresentou atraso na AO. Comparando o grupo N SAL: Os reflexos PP 5(3-8); RD 9(7-13); CV 11,5(8-14); AP 11(6-16); GN 12(10-13); RS 11(10-14); AC 13(11-14) ao grupo N TRIP: PP 4(4-6); RD 2(1-4); CV 13(10-15); AP 9,5(6-15); GN 15(12-16); RS 11,5(10-12); AC 12(8-13), o último antecipou RD e atrasou GN. Comparado ao grupo N SAL o grupo D SAL: PP 7(4-12); RD 4(1-9); CV 12(8-17); AP 12(8-17); GN 15(13-17); RS 12(11-17); AC 15(8-17) atrasou o desaparecimento da PP e o aparecimento da GN e antecipou RD. O grupo D TRIP PP 6,5(4-11); RD 2(1-8); CV 12,5(9-17); AP 12(8-17); GN 15(13-17); RS 13(11-17); AC 14(9-17) em comparação ao grupo N SAL atrasou o desaparecimento da PP e o aparecimento da GN e RS e antecipou RD. D TRIP em comparação com N TRIP mostrou atraso no desaparecimento da PP e no aparecimento da RS e da AC. D TRIP com D SAL não diferiram. D SAL com N TRIP atrasou o PP e AC. Conclusão A desnutição isoladamente atrasou o aparecimento de características físicas e modificou a maturação de reflexos. Embora o TRIP isoladamente não tenha mostrado diferenças, quando associado à desnutrição observou-se atraso no

FeSBE 2012

aparecimento de características físicas e modificação na maturação de reflexos. Sendo o TRIP precursor da serotonina, sugere-se a influencia desse neurotransmissor, de forma dependente do estado nutricional na maturação de caracteres físicos e de alguns dos reflexos estudados. Estudos do aumento da 5-HT cerebral após o tratamento podem melhor elucidar tais achados

FeSBE 2012

Resumo: 20.065

Perfil metabólico de ratos adultos submetidos à restrição protéica na vida intrauterina e superalimentados durante a lactação

Autores 1COUTINHO, G. V. P.

1, COUTINHO, F. R.

1, TAKI, M. S.

1, GOMES-DA-SILVA, M. H. G.

1,

LATORRACA, M. Q. 1, MARTINS, M. S. F.

1 Departamento de Alimentos e Nutrição - UFMT

Apoio Financeiro: Cnpq

Resumo Objetivos Foi investigado se a superalimentação durante a lactação sobreposta à restrição protéica intrauterina poderia determinar no animal adulto obesidade e distúrbios metabólicos. Métodos Após o nascimento, ninhadas de mães alimentados com dietas controle (17% de proteína) e com baixo teor de proteína (6% de proteína), foram ajustadas para quatro (CO e LO grupos, respectivamente) ou oito (CC e LC os grupos, respectivamente) crias.Todos os filhotes foram alimentados com dieta contendo 12% de proteína desde o desmame até idade 90 dias de idade. Comitê de Ética em Experimentação Animal da Universidade Federal de Mato Grosso - UFMT Processo Número 23108021972/10-4. Resultados Os grupos CO e LO apresentaram maior ingestão de alimentos relativa e absoluta e consumo de oxigênio e produção de dióxido de carbono; diminuição do peso do tecido adiposo marrom e conteúdo de lipídios, porém maior ganho de peso dos tecidos adiposo branco e conteúdos de lipídios em relação aos grupos CC e LC. Os ratos LC e LO apresentaram maiores ingestão relativa de alimentos, peso do tecido adiposo marrom e conteúdo lipídico e reduzidos consumo de oxigênio, produção de dióxido de carbono e atividade espontânea, porém inalterados peso dos tecidos adiposos branco e conteúdo lipídico em relação aos animais CO e CC. A glicose sérica em jejum foi similar entre os grupos. A área sob a curva de glicose foi maior em LO e CO do que nos ratos LC e CC. A insulinemia basal e o HOMA-IR foram menores no grupo LO do que nos demais grupos. A área total sob a curva da insulina nos ratos LO foi similar aos ratos CC e ambos foram menores em relação a CO e LC. O Kitt foi maior nos grupos LO, LC e CO do que no grupo CC. Conclusão Portanto, a superalimentação durante a lactação aumentou a gordura visceral, a massa corporal e resultou em intolerância à glicose por deficiência da função pancreática ou resistência à insulina.

FeSBE 2012

Resumo: 20.066

PROLIFERAÇÃO, in vitro, DAS CÉLULAS DO TUMOR DE WALKER 256 NA PRESENÇA DE ÓLEO DE PEIXE BSA-COMPLEXADO E DE SORO OBTIDO DE RATOS COM TUMOR

Autores

1YAMAGUCHI, A. A.

1, PIETROBON, A. J.

1, BONATTO, S. J. R.

1, COELHO, I.

1, FERNANDES,

L. C. 1, PEQUITO, D.

1, AIKAWA, J.

1, BRITO, G. A. P. D.

1, BORGHETTI, G.

1 FISIOLOGIA -

UFPR

Apoio Financeiro: CNPq e Fundação Araucária

Resumo Objetivos Óleo de peixe (OP), rico m ácidos graxos poliinsaturados n-3 (AGPI), foi demonstrado ter capacidade imunomodulatória e antitumoral, entre outras. Dados prévios de nosso laboratório mostram que, suplementação com OP durante 30 dias a ratos Wistar portadores de tumor de Walker 256 é capaz de reduzir o crescimento tumoral e a caquexia. Os mecanismos pelos quais isso acontece ainda não são sabidos. Oro Inka (OI) também é rico em AGPI n-3, em especial no parental ácido graxo α-linolênico (ALA). OI, in vivo, tem efeitos antitumorais semelhantes aos do OP, porém não se sabe se isto corre por ação direta nas células cancerosas ou se é por alongamento a ácidos graxos maiores. Ferramenta importante de investigação é a abordagem in vitro. Neste estudo, investigamos a proliferação das células ascíticas de tumor de Walker 256 in vitro, na presença de soro de ratos controle e com tumor, bem como na de óleo complexados à BSA. Métodos Todos os experimentos foram aprovados pelo CEEA número 481. Ratas Wistar do biotério do Setor de Ciências Biológicas da Universidade Federal do Paraná foram inoculadas intraperitonealmente com suspensão de células do tumor de Walker 256. Após sete dias, estas foram ortotanasiadas, o fluído ascítico coletado e as células cultivadas a uma concentração de 105 células por mL em placas de 96 poços com meio de cultura RPMI-1640 enriquecido com SFB e antibióticos, 20 μL de solução (2-14C)- timidina e presença ou ausência de OP e OI complexados à BSA 2% nas proporções 1:5, 1:8, 1:10 e 1:20. Após 24h as células foram coletadas automaticamente em coletor múltiplo em papéis filtro nº 11731. Outro experimento foi efetuado na presença de soro obtido de ratas controle, ratas suplementadas com OP ou OI e de portadoras de tumor sem suplementação, em que as células ascíticas foram cultivadas na presença de soro diluído 1:5 e 1:10 e cultivadas por 48 horas onde após este período foram coletados como descrito acima. Os discos de papéis contendo a radioatividade incorporada no DNA foram transferidos para tubos contendo 1 mL de líquido de cintilação e mensurados em contador Beckman LS 6500. Os dados estão apresentados como média ± erro padrão da média e foram submetidos à análise de variância de uma via (ANOVA) com pós teste de Tukey com significância para p < 0,05. Resultados Na presença de OP-BSA complexado nas proporções 1:5, 1:8, 1:10 e 1:20 a proliferação após 24h foi reduzida significativamente em cerca de 4 vezes, quando comparada aos controles (meio e BSA).Por outro lado, a presença de OI-BSA complexado não promoveu mesmo efeito. A proliferação na presença de soro de animais com tumor aumentou em 1,7 vezes ( p < 0,05). Quando o soro foi diluído à 1:10 esse efeito não foi observado. Na presença de soro obtido de animais sem tumor e de suplementados com OP ou OI, não foi observada alteração da proliferação comparada aos grupos meio e BSA ( p > 0,005). Conclusão In vitro, OP-BSA complexado reduziu a proliferação das células de tumor ascítico de Walker 256 e isso não ocorreu na presença de OI-BSA complexado. Ainda, nossos dados sugerem que no soro de animais com tumor de Walker 256 há a presença de fator pró-proliferativo para as células tumorais.

FeSBE 2012

Resumo: 20.067

INVESTIGAÇÃO MORFOLÓGICA DO TEGUMENTO DE RATOS WISTAR SUBMETIDOS À DESNUTRIÇÃO PROTÉICA PRÉ E PÓS-NATAL SEGUIDA DA REABILITAÇÃO NUTRICIONAL

Autores 1POZZUTO, L.

1, NOGUEIRA, B. C. R.

1, DANIEL, N. V. S.

1, DE OLIVEIRA, F.

1, OLIVEIRA, F.

D. 1 Departamento de Biociências - UNIFESP

Apoio Financeiro:

Resumo Objetivos A desnutrição é uma condição patológica à restrição do conteúdo protéico ou protéico-calórico da dieta. O objetivo principal desse estudo foi investigar os efeitos da desnutrição protéica pré e pós-natal e da reabilitação nutricional na morfologia arranjo elástico-colágeno do tegumento, sendo que para isso foi necessário avaliar a morfometria das camadas do tegumento ( < b>espessura da epiderme, derme e hipoderme), a fração de volume (Vv) do colágeno e a análise das fibras elásticas. Métodos

15 ratos Wistar machos, jovens (CEP-UNIFESP n⁰ 0969/10), foram divididos em grupos (n=5 cada): nutrido (N) -ração 20% de caseína (AIN93G, protéica), massa corporal (MC)=149,96±21,37g; (D) -ração com 5% de caseína (AIN93G, hipoprotéica), MC=23,76±6,70g; Renutrido (RN), MC=128,87±18,98g. O tegumento foi preparado histologicamente e corado com hematoxolina-eosina para avaliação morfométrica das camadas do tegumento; com Picrosírius para determinação da Vv das fibras colágenas; com Verhoeff para identificação das fibras elásticas. Para a avaliação da média ± desvio-padrão das camadas do tegumento e da Vv foi utilizado ANOVA com um fator e, quando necessário, aplicado o método de Tukey. Resultados A espessura total do tegumento (μm 2 ) dos animais D foi menor que a dos animais N e RN, p < 0,05 (N=84,69±8,35; D=79,08±11,36; RN=93,83±1,63). A espessura da epiderme (μm 2 ) dos animais D é menor que a dos animais N e RN, p < 0,05 (N=284,81±158,55; D=99,28±23,18; RN=235,95±56,03). A espessura da derme (μm 2 ) dos animais N é maior que a dos animais D e RN, p < 0,05; sendo que a espessura da derme dos animais RN é maior do que a dos animais D (N=540,52±158,86; D=307,02±68,89; RN=449,13±57,21). A espessura da hipoderme (μm 2 ) dos animais D é menor que a dos animais N e RN, p < 0,05 (N=530,63±106,63; D=106,41±38,05; RN=453,41±76,37). Quanto à Vv do colágeno, o grupo RN obteve quantidade de colágeno total (Vv em %) maior que o grupo D, p < 0,05 (N=84,69±8,35; D=79,08±11,36; RN=93,83±1,63); o grupo RN possui menor quantidade de colágeno tipo I (Vv em %) que os grupos N e D, p < 0,05 (N=67,28±15,22; D=72,29±17,88; RN=55,74±5,06); e ainda o grupo RN obteve colágeno tipo III (Vv em %) em quantidade maior que os grupos N e D, p < 0,05 (N=17,41±9,64; D=6,79±7,11; RN=38,09±5,04). Na análise qualitativa das fibras elásticas observou-se que os animais N apresentaram fibras elásticas homogêneas e espessas, enquanto os animais D possuem poucas fibras, delgadas e distribuídas pela derme; já os animais RN mostraram fibras espessas e em grande quantidade espalhadas pela derme, porém de uma forma mais desorganizada do que nos animais N. Conclusão A desnutrição afeta a camada total do tegumento e altera a espessura das camadas do mesmo. A renutrição recupera a camada total do tegumento porém altera a proporção dessas camadas que compõem o tegumento. A renutrição ainda aumenta a quantidade total de colágeno do tegumento e esse aumento se deve à maior quantidade de colágeno do tipo III (considerado imaturo). As fibras elásticas apresentaram tendência à recuperação da morfologia nos animais RN.

FeSBE 2012

Resumo: 20.068

MORFOLOGIA DO COLÁGENO DO TEGUMENTO DE RATOS WISTAR SUBMETIDOS À DESNUTRIÇÃO PROTÉICA PRÉ E PÓS-NATAL E À LESÃO TÉRMICA POR ESCALDADURA

Autores 1DANIEL, N. V. S.

1, POZZUTO, L.

1, NOGUEIRA, B. C. R.

1, OLIVEIRA, F. D.

1 Biociências -

UNIFESP

Apoio Financeiro: Bolsa de Iniciação Científica, CNPq

Resumo Objetivos Nas lesões térmicas por escaldadura (LTEs), formam-se cicatrizes hipertróficas que desestruturam as camadas do tegumento. No Brasil, a maior parte das LTEs ocorre com crianças em acidentes residenciais e, associado ao trauma, geralmente há déficit nutricional. A deficiência de proteína pode atrasar a contração da ferida, geralmente relacionada à cicatriz hipertrófica. Os objetivos do presente estudo foram analisar a morfologia do colágeno total e das fibras de colágeno tipo I e colágeno tipo III do tegumento de animais submetidos à desnutrição protéica pré e pós-natal associada ou não à LTE. Métodos (CEP-UNIFESP n.0969/10) 60 ratos Wistar machos, jovens, foram divididos em grupos: nutrido (N) -ração 20% de caseína (AIN93G, protéica), massa corporal (MC)= 132,37+16,77g; desnutrido (D) -ração com 5% de caseína (AIN93G, hipoprotéica), MC=19,21+3,75g; Nutrido submetido à LTE (NQ), MC=130,64+17,37g; e Desnutrido submetido à LTE (DQ), MC=24,53+7,36g. Esses foram subdivididos de acordo com a eutanásia - 4, 7 e 14 dias pós LTE. O tegumento foi preparado histologicamente com Picrosírius para determinação da fração de volume (Vv) das fibras colágenas, analisadas em microscópio óptico com luz polarizada. Para a avaliação da média + desvio-padrão da Vv foi utilizado ANOVA com três fatores e, quando necessário, aplicação do método de Tukey. Resultados Tanto em nutridos quanto em desnutridos, os grupos submetidos à LTE apresentaram fibras colágenas mais desorganizadas que os que não sofreram lesão. Na análise do colágeno total, os animais que sofreram LTE, independente da nutrição e do dia da avaliação, foram diferentes dos seus respectivos controles, sendo que DQ apresentou quantidade maior de colágeno que seu controle D; e NQ menor quantidade quando comparado ao seu controle N, p < 0,05. Os dados a seguir são da Vv (%) do colágeno total dos subgrupos analisados 14 dias após a LTE, n=5 cada: N=84,69±8,35; NQ=74,20±15,79; D=79,08±11,36 e DQ= 84,26±6,28. Quanto ao colágeno tipo I, os animais desnutridos apresentaram maior quantidade que os animais nutridos, independente da lesão e dos dias avaliados. Os dados a seguir são da Vv (%) do colágeno tipo I dos subgrupos analisados 14 dias após a LTE, n=5 cada: N=67,28+15,22; NQ=60,56+15,43; D=72,29+17,88; DQ=68,09±11,36, p < 0,05. Já com relação ao colágeno tipo III, os animais desnutridos diferiram dos nutridos independente da lesão e dos períodos avaliados, p < 0,05; e os animais que sofreram LTE diferiram dos seus controles, independente da nutrição e do dia de avaliação, p < 0,05. Os dados a seguir são da Vv (%) do colágeno tipo III dos subgrupos analisados 14 dias após a LTE, n=5 cada: N=17,41±9,64; NQ=13,64±2,71; D=6,79±7,11; DQ=16,17±7,80. Conclusão A desnutrição e a LTE afetaram qualitativamente a morfologia do tegumento. A análise da Vv mostrou que o colágeno total foi influenciado pela LTE; o colágeno tipo I foi afetado pela nutrição e o colágeno tipo III foi afetado pela LTE e pela nutrição.

FeSBE 2012