低コストでのタンパク質精製に ni-nta アガロース...
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低コストでのタンパク質精製に
Ni-NTA アガロース HP(High Per formance)
Ni-アガロースは、6×ヒスチジン融合タンパク質をアフィニティー精製するために使用されます。本品は、リガンドにニトリロ三酢酸(NTA)を用いており、金属イオンの脱落によるタンパク質純度の低下を抑えます。また、変性剤耐性を有し、FPLCにも対応しています。
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
① 大腸菌に発現させた6×ヒスチジン融合GFPを超音波破砕法により回収する。 ② 前処理を行い精製前サンプルを調製する。 ③ PBSで平衡化したレジン1mLを精製前サンプルに添加し、バッチ法にて反応(4℃、1時間)させる。 ④ オープンカラムにレジンを回収し、洗浄バッファー 25mLでカラムを洗浄する。 ⑤ 溶出バッファー3mLで6×ヒスチジン融合GFPを溶出させる。 ⑥ 各溶出サンプルをスーパーセップTMエース,10-20%,17well(コードNo. 198-15041)にてSDS-PAGE、CBB染色を行う。
低コスト 高い変性剤耐性 高圧力対応
M: ワイドビューTMプレステインタンパク質サイズ マーカーⅢ (コードNo. 236-02463) レーン1: 精製前サンプル レーン2: カラム素通り画分 レーン3: 洗浄画分 (10mmol/L Imidazole in PBS) レーン4-16:溶出画分(25-500mmol/L Imidazole in PBS)
14 15 16 13
溶出画分
特長
使用例・他社品比較データ
比較データ取得プロトコール
20
35
48
25
20
35
48
25
20
37
50
25
kDa
: 6×ヒスチジン融合GFPを示す
本品
A社品
B社品
Imidazole 濃度
試薬に対する安定性
本品は、下記記載の濃度まで安定です。
洗浄バッファー: 20mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate (pH7.4), 500mmol/L Sodium Chloride, 10mmol/L Imidazole
溶出バッファー: 20mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate (pH7.4), 500mmol/L Sodium Chloride, 25-500mmol/L Imidazole
他社品と同等の性能を確認しています。
TritonはDow Chemical Companyの登録商標です。 TweenはICI Americas, Inc. の登録商標です。
還元剤
30mmol/L Reduced gultathione
20mmol/L β-Mercaptoethanol
10mmol/L DTT
10mmol/L DTE
0.3% SDS
変性剤 8mol/L Urea
6mol/L Guanidine Hydrochloride
界面活性剤 2% TritonⓇ X-100
2% TweenⓇ 20
他添加剤 50% Glycerol
1mmol/L EDTA
20% Ethanol
コードNo. 品名 規格 容量 希望納入価格(円)
010-23181 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (9C11), Peroxidase Conjugated 免疫化学用
100μL 45,000
014-23184 500μL 75,000
013-23171 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (9F2), Peroxidase Conjugated 免疫化学用
100μL 36,000
017-23174 500μL 75,000
コードNo. 品名 規格 容量 希望納入価格(円)
019-23391 Anti 6×Histidine Antibody Beads (27-75) 免疫化学用
2mL (NET 1mL) 65,000
015-23393 10mL (NET 5mL) 200,000
011-23091
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (9C11) 免疫化学用
200μg 40,000
015-23094 1mg 65,000
011-23096 5mg 照会
017-23211 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (21-48) 免疫化学用
200μg 35,000
011-23214 1mg 95,000
014-23221 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (28-75) 免疫化学用
200μg 40,000
018-23224 1mg 95,000
010-21861
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (9F2) 免疫化学用
200μg 30,000
014-21864 1mg 65,000
010-21866 5mg 照会
コードNo. 品名 規格 容量 希望納入価格(円)
145-07981
Ni-Agarose 遺伝子研究用
5mL 19,000
141-07983 10ml 27,000
149-07984 100mL 120,000
031-19781 Co-Agarose 遺伝子研究用 5mL 29,500
038-19791 Cu-Agarose 遺伝子研究用 5mL 25,000
263-01871 Zn-Agarose 遺伝子研究用 5mL 26,000
コードNo. 品名 規格 容量 希望納入価格(円)
149-09684
Ni-NTA Agarose HP 遺伝子研究用
2mL (NET 1mL) 8,500
145-09681 10mL (NET 5mL) 13,000
141-09683 100mL (NET 50mL) 100,000
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製品規格
製品価格
●6×ヒスチジン融合タンパク質精製アガロースビーズ(IDAタイプ)
●抗体ビーズ ・ モノクローナル抗体
●HRP標識モノクローナル抗体
製品 Ni-NTA アガロース HP Ni-アガロース(145-07981)
ゲルマトリックス 6%高度架橋アガロース 6%架橋アガロース
リガンド ニトリロ三酢酸(NTA) イミノ二酢酸(IDA)
ニッケル結合量 ≧15μmol Ni2+ / mL gel 20-40μmol Ni2+ / mL gel
ビーズサイズ 50-150μm 40-180μm
保存液 50% slurry in 20% Ethanol 50% slurry in 20% Ethanol
FPLC 対応 非対応