低コストでのタンパク質精製に ni-nta アガロース...

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低コストでのタンパク質精製に Ni-NTA アガロース HP(High Per formance) Ni-アガロースは、6×ヒスチジン融合タンパク質をアフィニティー精製するために使用されます。本品 は、リガンドにニトリロ三酢酸(NTA)を用いており、金属イオンの脱落によるタンパク質純度の低下を 抑えます。また、変性剤耐性を有し、FPLCにも対応しています。 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 ① 大腸菌に発現させた6×ヒスチジン融合GFPを超音波破砕法により回収する。 ② 前処理を行い精製前サンプルを調製する。 PBSで平衡化したレジン1mLを精製前サンプルに添加し、バッチ法にて反応(41時間)させる。 ④ オープンカラムにレジンを回収し、洗浄バッファー 25mLでカラムを洗浄する。 ⑤ 溶出バッファー3mL6×ヒスチジン融合GFPを溶出させる。 ⑥ 各溶出サンプルをスーパーセップ TM エース,10-20%,17well(コードNo. 198-15041)にてSDS-PAGECBB染色を行う。 低コスト 高い変性剤耐性 高圧力対応 M: ワイドビュー TM プレステインタンパク質サイズ マーカーⅢ (コードNo. 236-02463) レーン1: 精製前サンプル レーン2: カラム素通り画分 レーン3: 洗浄画分 (10mmol/L Imidazole in PBS) レーン4-16:溶出画分(25-500mmol/L Imidazole in PBS) 14 15 16 13 溶出画分 特長 使用例・他社品比較データ 比較データ取得プロトコール 20 35 48 25 20 35 48 25 20 37 50 25 kDa : 6×ヒスチジン融合GFPを示す 本品 A社品 B社品 Imidazole 濃度 試薬に対する安定性 本品は、下記記載の濃度まで安定です。 洗浄バッファー: 20mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate (pH7.4), 500mmol/L Sodium Chloride, 10mmol/L Imidazole 溶出バッファー: 20mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate (pH7.4), 500mmol/L Sodium Chloride, 25-500mmol/L Imidazole 他社品と同等の性能を確認しています。 TritonはDow Chemical Companyの登録商標です。 TweenはICI Americas, Inc. の登録商標です。 還元剤 30mmol/L Reduced gultathione 20mmol/L β-Mercaptoethanol 10mmol/L DTT 10mmol/L DTE 0.3% SDS 変性剤 8mol/L Urea 6mol/L Guanidine Hydrochloride 界面活性剤 2% Triton X-100 2% Tween 20 他添加剤 50% Glycerol 1mmol/L EDTA 20% Ethanol

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低コストでのタンパク質精製に

Ni-NTA アガロース HP(High Per formance)

Ni-アガロースは、6×ヒスチジン融合タンパク質をアフィニティー精製するために使用されます。本品は、リガンドにニトリロ三酢酸(NTA)を用いており、金属イオンの脱落によるタンパク質純度の低下を抑えます。また、変性剤耐性を有し、FPLCにも対応しています。

M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

① 大腸菌に発現させた6×ヒスチジン融合GFPを超音波破砕法により回収する。 ② 前処理を行い精製前サンプルを調製する。 ③ PBSで平衡化したレジン1mLを精製前サンプルに添加し、バッチ法にて反応(4℃、1時間)させる。 ④ オープンカラムにレジンを回収し、洗浄バッファー 25mLでカラムを洗浄する。 ⑤ 溶出バッファー3mLで6×ヒスチジン融合GFPを溶出させる。 ⑥ 各溶出サンプルをスーパーセップTMエース,10-20%,17well(コードNo. 198-15041)にてSDS-PAGE、CBB染色を行う。

低コスト 高い変性剤耐性 高圧力対応

M: ワイドビューTMプレステインタンパク質サイズ マーカーⅢ (コードNo. 236-02463) レーン1: 精製前サンプル レーン2: カラム素通り画分 レーン3: 洗浄画分 (10mmol/L Imidazole in PBS) レーン4-16:溶出画分(25-500mmol/L Imidazole in PBS)

14 15 16 13

溶出画分

特長

使用例・他社品比較データ

比較データ取得プロトコール

20

35

48

25

20

35

48

25

20

37

50

25

kDa

: 6×ヒスチジン融合GFPを示す

本品

A社品

B社品

Imidazole 濃度

試薬に対する安定性

本品は、下記記載の濃度まで安定です。

洗浄バッファー: 20mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate (pH7.4), 500mmol/L Sodium Chloride, 10mmol/L Imidazole

溶出バッファー: 20mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate (pH7.4), 500mmol/L Sodium Chloride, 25-500mmol/L Imidazole

他社品と同等の性能を確認しています。

TritonはDow Chemical Companyの登録商標です。 TweenはICI Americas, Inc. の登録商標です。

還元剤

30mmol/L Reduced gultathione

20mmol/L β-Mercaptoethanol

10mmol/L DTT

10mmol/L DTE

0.3% SDS

変性剤 8mol/L Urea

6mol/L Guanidine Hydrochloride

界面活性剤 2% TritonⓇ X-100

2% TweenⓇ 20

他添加剤 50% Glycerol

1mmol/L EDTA

20% Ethanol

Page 2: 低コストでのタンパク質精製に Ni-NTA アガロース …wako-chem.co.jp/siyaku/product/life/Ni-NTA/pdf/Ni-NTA.pdfx 低コストでのタンパク質精製に Ni-NTA アガロース

コードNo. 品名 規格 容量 希望納入価格(円)

010-23181 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (9C11), Peroxidase Conjugated 免疫化学用

100μL 45,000

014-23184 500μL 75,000

013-23171 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (9F2), Peroxidase Conjugated 免疫化学用

100μL 36,000

017-23174 500μL 75,000

コードNo. 品名 規格 容量 希望納入価格(円)

019-23391 Anti 6×Histidine Antibody Beads (27-75) 免疫化学用

2mL (NET 1mL) 65,000

015-23393 10mL (NET 5mL) 200,000

011-23091

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (9C11) 免疫化学用

200μg 40,000

015-23094 1mg 65,000

011-23096 5mg 照会

017-23211 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (21-48) 免疫化学用

200μg 35,000

011-23214 1mg 95,000

014-23221 Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (28-75) 免疫化学用

200μg 40,000

018-23224 1mg 95,000

010-21861

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody (9F2) 免疫化学用

200μg 30,000

014-21864 1mg 65,000

010-21866 5mg 照会

コードNo. 品名 規格 容量 希望納入価格(円)

145-07981

Ni-Agarose 遺伝子研究用

5mL 19,000

141-07983 10ml 27,000

149-07984 100mL 120,000

031-19781 Co-Agarose 遺伝子研究用 5mL 29,500

038-19791 Cu-Agarose 遺伝子研究用 5mL 25,000

263-01871 Zn-Agarose 遺伝子研究用 5mL 26,000

コードNo. 品名 規格 容量 希望納入価格(円)

149-09684

Ni-NTA Agarose HP 遺伝子研究用

2mL (NET 1mL) 8,500

145-09681 10mL (NET 5mL) 13,000

141-09683 100mL (NET 50mL) 100,000

1 7 7 0 0開 1 1

●本文に記載しております試薬は、試験・研究用にのみ使用されるもので、「医薬品」、「食品」、「生活用品」などとして使用できません。 ●希望納入価格には消費税等が含まれておりません。 ●希望納入価格は予告なく変更する場合がございますがご了承下さい。

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関連製品

製品規格

製品価格

●6×ヒスチジン融合タンパク質精製アガロースビーズ(IDAタイプ)

●抗体ビーズ ・ モノクローナル抗体

●HRP標識モノクローナル抗体

製品 Ni-NTA アガロース HP Ni-アガロース(145-07981)

ゲルマトリックス 6%高度架橋アガロース 6%架橋アガロース

リガンド ニトリロ三酢酸(NTA) イミノ二酢酸(IDA)

ニッケル結合量 ≧15μmol Ni2+ / mL gel 20-40μmol Ni2+ / mL gel

ビーズサイズ 50-150μm 40-180μm

保存液 50% slurry in 20% Ethanol 50% slurry in 20% Ethanol

FPLC 対応 非対応